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气相色谱-质谱法测定动物组织中的β2-兴奋剂含量

摘要:应用气相色谱-质谱(GC-MS) 联用技术建立动物组织中β2-兴奋剂的测定方法。动物组织加1%的高氯酸溶液匀浆用乙酸乙酯:异丙醇(6∶4)萃取经固相萃取柱净化 BSTFA+1% TMCS衍生后进行GC-MS 测定。样品中最低检出浓度分别为特布他林015μg/kg、克伦特罗110μg/kg、沙丁胺醇012μg/kg。 1.色谱条件  色谱柱:HP 2 ...

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新生大鼠心肌细胞培养

1 材料 1.1 动物 出生后 1-4 天 SD 乳鼠 15 只。 1.2 试剂 低糖 DMEM、胰酶(含 EDTA)、青链霉素、碳酸氢钠液、新生牛血清、谷氨酰胺、D-Hank's 液。0.1%新洁尔灭、碘酒、75%酒精。 培养液:培养液(DMEM,新生牛血清,青链霉素)。 1.3 手术器械和仪器 铝盒、眼科直剪、眼科弯剪、眼科直镊、 ...

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评测--试剂管理软件新锐:Mr.F

无论是新成立的,还是已运作多年的实验室,种类多样的试剂在出入库、盘点、管理方面带来繁重的工作,因此试剂管理信息化成为实验室信息化的必经之路,但试剂管理软件在市场上寥寥可数,免费的就更是凤毛麟角。Mr.F就是免费软件中的后起之秀。刚拿到Mr.F的Beta发布版就忍不住一睹芳颜: 软件界面 Mr.F界面上能看到得到的按钮很少,只有常用的出入库、库存和设置,左则“我的产品 ...

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高通量蛋白质组学新时代——iTRAQ技术

VIP技术服务:iTRAQ 技术起源&发展:iTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantitation)技术是由美国应用生物系统公司ABI 研发的一种多肽体外标记技术。该技术采用4种或8种同位素编码的标签,通过特异性标记肽的氨基基团,尔后进行串联质谱分析,可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。 ...

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ELISA的操作要点

优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。 1 标本的采取和保存 可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液、分泌物和排泄物)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于 ...

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GluR1-cGKII 相互作用调节AMPA 受体转运

摘要 Trafficking of AMPA receptors (AMPARs) is regulated by specific interactions of the subunitintracellular C-terminal domains (CTDs) withother proteins but the mechanisms involvedin ...

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检测mRNA开盖活力

摘要 mRNA decapping is a common step shared between twoimportant mRNA decay pathways in yeast Saccharomycescerevisiae. To investigate how mRNAs are decapped we havedeveloped an assay ...

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识别和表征无义介导的mRNA降解过程中的序列模式

摘要 In both prokaryotes and eukaryotes nonsense mutations in a gene can enhance the decay rate or reduce the abundance of the mRNA transcribed from that gene and we call this process nonsense-m ...

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多核糖体mRNAs是酿酒酵母中mRNA无义介导降解途径的底物

摘要In eukaryotic cells premature termination of translation at nonsense codons has been implicated as the cause of a variety of posttranscriptional events including rapid mRNA decay in the cytoplasm or ...

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识别和表征加速降解包含早期翻译终止密码子的mRNAs的基因

In both prokaryotes and eukaryotes nonsense mutations in a gene can enhance the decay rate of the mRNA transcribed from that gene a phenomenon described as nonsense-mediated mRNA decay. In yeast the ...

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PI3K/Akt/mTOR信号通路

目的:通过特异性阻断PI3K和mTOR观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路活性及生物学行为的改变探讨相关的分子机制。 方法:在培养的HepG2、Hep3B人肝癌细胞株和人正常肝细胞株QSG-7701上以免疫印迹方法(Western blot)检测各细胞株中PI3K(p110α亚单位)、PTEN、pAkt(S473T308)和p-mTOR(S ...

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热休克蛋白90信号通路抑制剂抗体

Abstract Chaperones (stress proteins) are essential proteins to help the formation and maintenance of the proper conformation of other proteins and to promote cell survival after a large varie ...

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PNAS:利用转基因水稻规模化生产重组人血清白蛋白

由武汉大学生命科学院教授、武汉禾元生物科技有限公司董事长杨代常领衔的研发团队从2006年开始进行植物源替代血浆来源的医药蛋白的研究与开发,现已取得突破性进展并已跨入规模化生产的阶段,填补了国际上此项技术空白。相关论文“Large-scale production of functional human serum albumin from transgenic rice seeds& ...

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大鼠肺成纤维细胞培养

1 材料 1.1 动物 出生后1-4天的Wistar乳鼠1只。 1.2 试剂 PBS、培养液(低糖DMEM,新生牛血清、青链霉素、1%明胶PBS、0.25%胰酶),碘酒和酒精绵球。 1.3 手术器械 眼科直剪2把、眼科弯剪2把、眼科直镊2把、眼科弯镊2把、玻璃平皿3套,25cm2 ...

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关于原料药的研发

长期困惑原料药企业:开发 D?研究 R? 在申报制剂时,有时欧美国家需要原料药的研发信息 因DMF及COS申请没有强制要求提供,所以研发部分的国际化程度很弱 SFDA的注册资料的要求往往经常参考 现在美国已经要求在DMF中的研发部分要参考ICH的Q11 关键质量参数是发达国家常用的也是Q11的所围绕的核心内容

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慢病毒包装

慢病毒(慢病毒(Lentiviruses)属于逆转录病毒科。慢病毒核蛋白质前整合复合物具有噬核特性,病毒基因组运输至细胞核,从而使慢病毒可以感染和在非有丝分裂细胞中复制。这一特性使慢病毒成为基因治疗的转移载体。 HIV (Human immunodeficiency virus) 、EIAV (Equine infectious anemia virus) 、 FIV (Feline immunodeficiency virus) 、 SIV (Simian immunodeficiency virus) 。其中研究最多最为透彻的是HIV。

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“点击化学”的应用:多肽和蛋白质修饰

随着蛋白质组学和生物医药等领域发展,多肽和蛋白质的修饰引起了人们的广泛关注,成为当前一个非常重要的研究方向。通过对多肽和蛋白的修饰,可以研究蛋白质分子结构与功能之间的关系以及蛋白质-蛋白质相互作用,利用标记分子进行追踪定位,另外还可以对一些活性多肽和蛋白质进行改性。

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基因芯片筛选发现大肠癌早期诊断分子标志物

大肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,其发病率位居全球恶性肿瘤第三位。2006年国家卫生部的统计数据显示,我国大肠癌死亡率已位居恶性肿瘤第五位,其发病率在40岁开始上升,至60-75岁时达到高峰。发病率呈逐年上升趋势。对大肠癌的早期诊断有助于大肠癌的治疗,减少病死率。

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TALENTM靶向基因修饰新工具

TALEN (Transcription Activator-Like (TAL) Effector Nucleases)靶向基因敲除基因修饰是一种崭新的分子生物学工具。科研人员发现来自植物病原菌Xanthomonas中的TAL蛋白核酸结合域的氨基酸序列与其靶位点的核酸序列有较恒定的对应关系。利用此恒定对应关系,构建与核酸内切酶的融合蛋白,在特异位点打断目标基因组DNA序列,从而可在该位点进行DNA编辑修饰操作,比如knock-out、knock-in、碱基替换、点突变或者基因修饰等。该技术与常规锌指核酸酶(ZFN)相比更有优势,能识别任意目标基因序列,不受上下游序列影响等问题,因此使得基因操作更加简单方便。

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RNA探针合成方法和合成效率检测方法介绍

在RNA的杂交检测实验中,应用标记的RNA 探针将获得高灵敏度的杂交检测结果,与DNA 探针相比,检测灵敏度提高10-100倍。因为对于不同的杂交体类型来说,RNA-RNA杂交体的结合强度高于RNA-DNA和DNA-DNA杂交体。对于通过Northern blots检测低浓度mRNA,以及原位杂交的核酸定位检测等应用,RNA探针是一种理想选择。RNA探针同样也适用于Southe ...

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