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任何动、植物细胞都具有特定的形态结构，对其进行固定和染色等处理，便可以在显微镜下分辨清楚，然后借用目镜测微尺和镜台测微尺，便可测量大小。 实验用品 器具：显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、目镜测微尺、镜台测微尺 材料：H.E 染色标本：小白鼠肝细胞、睾丸组织细胞 I.H 染色标本：洋葱根尖细胞 新鲜材料：洋葱、紫鸭趾草 实验方法步骤 （一）细胞形态观察 1. 投影各种形态 ...

原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下，①具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；③通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。 实验原理 去掉植物细胞壁的方法可以是机械的人工操作，也可以利用酶解法。较早利用机械法制备原生质 ...

Professor Daichang Yang Wuhan University China Dr Daichang Yang did his PhD from Wuhan University and has worked as project scientist on the rice genome project at the International Rice Rese ...

随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用，使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ELISA）检测体液中游离的细胞因子（CK）或抗体，但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合，而不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。80年代，国外的科研工作者根据ELISA技术的基本原理，建立了体外检测特异 ...

一、E.coli/phage 裂解液预吸附血清 1. 将E.coli /phage lysate 以1:10-20 稀释在TBST 溶液中。 2. 将4 张82mm 的nitrocellulose membranes（NC）浸入稀释后的E.coli/ phagelysate 中，室温下水平摇动30 分钟，取出NC 并使膜沥干。 3. 用50ml TBST ...

本文应用沃特世（Waters®）Oasis® HLB固相提取技术和ACQUITY UPLC® 超高效液相色谱/TQD串联四极杆质谱系统测定分析动物性食品中糖皮质类激素兴奋剂。

1 前言 唾液酸主要存在于高等动物的细胞表面，是糖蛋白、糖脂等复合糖的组成成分，担任重要的生物学功能1）。另外，众所周知唾液酸糖链是流感病毒的受体，它像病原性微生物一样被人体识别。 传统方法检测α 2-3结合型唾液酸糖链的非还原糖链末端通常使用MAM或者MAH凝集素。这里的凝集素末端具有Sia α 2 -3 Gal β 1- 4Glc ...

1、接种细胞：收集对数生长期细胞，调整细胞悬液浓度，以每孔1000－10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200?l. 2、培养细胞：同一般培养条件，培养3－5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。 3、呈色：培养试验设定时间后，每孔加含20?l MTT 溶液（5mg/ml)的培养液200?l，继续培养1-4小时，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要 ...

1. 在6孔板中接种1~3×105细胞/孔，加入2ml完全培养基，置CO2孵箱中37℃培养过夜。 2. 待细胞长到50-80%单层时，在无菌离心管中配制如下溶液： i. 溶液A：将4?g待转染的超纯DNA稀释到250?l无血清培养基中，静置5min ii. 溶液B：将2-25?l LipofectAMINE ...

β-受体激动剂，又称为β-兴奋剂（β－agonists）是一类人工合成药物，主要用于防治人、兽支气管哮喘和支气管痉挛，在药学上称为β-肾上腺素兴奋剂。β-受体激动剂在体育比赛中可用于增强运动员、动物(如马)肌肉，提高运动成绩，国际奥委会将β-受体激动剂列为禁用药物。β-受体激动剂根据苯环取代基结构分为苯胺型（如：克伦特罗，俗称 ...

糖皮质激素是由肾上腺皮质分泌的一类甾体激素，具有调节糖、脂肪和蛋白质的生物合成和代谢的作用，还具有抗炎作用，称其为“糖皮质激素”是因为其调节糖类代谢的活性最早为人们所认识。糖皮质激素的基本结构特征包括肾上腺皮质激素所具有的C3的羰基、Δ4和17 β酮醇侧链以及糖皮质激素独有的17 α-OH和11 β-OH。 1.提 ...

玉米赤霉醇（zeranol，ZER），属于雷索酸内酯类非甾体同化激素。ZER作为牛羊促生长剂，以耳根埋植的形式应用，促进蛋白质的合成，能提高胴体瘦肉率及饲料转化率。但是，玉米赤霉醇具有弱雌激素作用，在动物尿液中的残留会引起人体性机能紊乱及影响第二性征的正常发育，在外部条件诱导下，还可能致癌。ZER排出动物体外后，还可经饮水和食物造成二次污染及环境污染。1998年欧盟禁止将玉米赤霉醇等 ...

合成类固醇类激素具有促进蛋白质合成的作用，雄性化作用是其主要特点。雄激素（俗称“合成类固醇”）及其相关物质是历史最悠久、最重要的违禁药品之一，在畜牧业、体育运动和保安业中一直被广泛的非法使用。早在二战时期即在德军中使用以提高战斗力。一些统计资料显示，在食品甾体类同化激素（anabolic steroids ASs）残留和体育运动兴奋剂监测中，雄性激素占阳性样品 ...

摘要：建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定尿液中的内源性类固醇激素的方法。尿样经葡萄糖醛酸甙酶酶解后进行液-液提取，以甲醇-0.1%甲酸缓冲液(含0.02mol/L乙酸铵)(体积比为68∶32)为流动相，采用Cosmosil C18色谱柱分离并以三重四极杆串联质谱多反应监测扫描方式对尿样中的脱氢表雄酮(DHEA)、睾酮、表睾酮、雄酮和苯胆烷醇酮等5种激素进行检测。方法的最低检出限为0 ...

在赛马业中滥用的药物包含种类繁多的化学药物，主要通过取复杂尿样进行分析，使得低浓度下快速、有效、诊断性检测这些药物比较困难。通常，定量分析工作是在三重四极杆质谱上用选择离子反应检测模式进行，但是这种检测方法不能监测到诊断性碎片结构确认方面的信息，需要对其进行衍生化和气相色谱-质谱联用进一步确认。 目 的： 为了建立一种简单、快速、实用性强、能够同时进行定性监测、定量分析的液相色谱- ...

摘要：临床研究实验室和法医实验室通常使用自动化免疫测定， LC-MS，HPLC-DAD技术来完成常规未知物筛选分析，即GUS分析。但其中没有任何一种方法可以完全鉴定一份样品中潜在的所有未知药物和有毒化合物。LC-MS附带的操作说明书为GUS中药物和有毒物质提供了精确、灵敏的分析方法。LC-MS GUS分析方法的优点：包含了样品的制备过程，可以在筛选方法中轻松增加新的被分析物，而且对该物质的挥发性 ...

摘要：在常规检测中，一些B2阻断剂(或其代谢物)的EI质谱图极其相似，给确证工作带来麻烦。本文采用GC/MS的化学电离功能得到了特征性很强的质谱图，使确证工作简单易行，并满意地应用于实际尿样分析。 1.取5 ml尿样于10 ml玻璃试管中，加入0.5ml浓盐酸和100 mg L-半胱氨酸，混匀，试管口盖上玻璃小球， 在100℃烘箱内水解30 min，冷却后加入3 ml乙醚， 在振荡 ...

摘要：本文采用GC、GC/MS技术对口服Selegiline Hydrochloride，一种单胺氧化酶抑制剂的尿中代谢物进行分析测定，确认检出10种代谢产物，其中三种为新检测到的羟基化代谢物。 1.尿样收集 健康男性(体重65 Kg)口服单次剂量10mg Selegiline 5片剂。分别收集所排各次尿液的全部及服药前的空白尿，于-20℃。 2.样品制备 取尿样5 ...

摘要：研究用芯片毛细管电泳激光诱导荧光检测系统分离测定经7-chloro-4-nitrobenzo-2-oax-13-diazole(NBD-Cl)衍生的麻黄碱和伪麻黄碱的实验条件。采用胶束毛细管电动色谱分离体系(12 mmol/L SDS+10 mmol/L硼砂缓冲液pH9.0)在45 mm长的通道上实现了麻黄碱和伪麻黄碱的快速分离，一次分离小于1.5min。10～100 mg/L范围内峰高与 ...

1.抗人促红细胞生成素单克隆抗体的制备复苏抗rHuFPO杂交瘤细胞，采用动物体内诱生单克隆抗体的方法，大量制备腹水。用快速蛋白液相分析仪(FPLC)，联合使用疏水柱(Phenyl-SepharoseCL-4B)和ProteinASuperoseFastFlow柱纯化单克隆抗体。 2.单克隆抗体理化性质及亲和力的鉴定采用双向免疫扩散法、紫外分光光度计法和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分 ...