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一 、组织RNA提取 1. 最好新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好，这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的（最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的）组织，注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0~4℃，注意不要拿到常温，待组织解冻后，用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，然后加入一定量的TRIZOL试剂，然后匀浆。注意：速度不要太快，要匀一会挺一会，否 ...

bioanalyzer 到底能干什么？下面的图表会给你一个较为清晰的了解和认识，看来用处还不少呢！bioanalyzer在检测RNA的质量方面绝对是有独到之处的，相信大家看完我所提供的图片就会更加相信这一点的。 bioanalyzer的操作也是非常简单容易的，可以简单的来说上样，点击软件的start，然后40分钟左右看结果。这个时间与你的样本数量和片子类别有关系，通常来说，smallRNA和D ...

转化后在含抗生素的平板上长出的菌落即为转化子，根据此皿中的菌落数可计算出转化子总数和转化频率，公式如下： 转化子总数＝菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积 转化频率（转化子数/每ug质粒DNA）＝转化子总数/质粒DNA加入量（ug） 下面以大肠杆菌TG1电转感受态为例给你演示一下： 第一天，上午取大肠杆菌TG1菌液划线平板（一般要48小时以上才能长出单 ...

实验原理 感受态是指细菌处于容易吸收外源DNA的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导人细菌的过程。其原理是细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。 转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经42℃短时间热击处理，促进细胞吸收DNA复合物。将细菌放置在非选择性培养基中保温一段时间，促使在转化过程中获得的新的表型（如 ...

1. 从37℃培养16~20 h 的新鲜平板中挑取一个单菌落（如大肠杆菌DH52），或1 ml 新鲜的16~20 h过夜培养物，转到一个含有100ml LB培养基的1 L 或500 ml 培养瓶中。于37℃振摇培养约2~3 h（旋转摇床200~300 r/min），每隔20~30 min测量OD600值≈0.4。 2. 在无菌条件下将细菌转移到一个，用冰预冷 ...

一、感受态细胞的概念 重组DNA分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组DNA分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在细胞间转化是否发生，一方面取决于供体菌与受体菌两者在进化过程中的亲缘关系，另一方面还与受体菌是否处于一种感受状态有着很大的关系。 所谓的感受态，即指受体（或者宿主）最易接受外 ...

Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology Fourth Military Medical Univer ...

一、3%酸性酒精溶液 浓盐酸3 ml 95%酒精97 ml 二、中性红指示剂 中性红0.04 g 95%乙醇28 ml 蒸馏水72 ml 中性红pH6.8-8，颜色由红变黄，常用浓度为0.04%。 三、淀粉水解试验用碘液（卢戈氏碘液） 碘片1 g 碘化钾2 g 蒸馏水300 ml 先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。 &nb ...

一、吕氏（Loeffler）碱性美蓝染液 A液：美蓝（methyleneblue）0.6 g 95%酒精30 ml B液：KOH 0.01 g 蒸馏水：100 ml 分别配制A液和B液，配好后混合即可。 二、齐氏（Ziehl）石炭酸复红染色液 A液：碱性复红（basicfuchsin）0.3 g 95%酒精 10 ml B液：石炭酸 5.0 g 蒸馏水 95 ml 将碱性复红在研钵 ...

Hoechst染色：hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合有hoechest33342和hoechst33258两种（主要为凋亡活细胞）在紫外光下将核染为蓝色。Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果。hoechsthoechsts33258，hoechst33342二者区别不大，但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些，所以一般来说hoechsts33 ...

1. 酸性品红：酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容於水，略溶於酒精（0.3%）。是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、医学教|育网搜集整理髓部等薄壁细胞和纤维素壁。它跟甲基绿同染，能显示线粒体。组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。 2. 刚果红：刚果红 ...

实验目的 1. 掌握光电型血细胞计数器的基本原理。 2. 了解施密特电路在脉冲整形方面的应用。 实验器材 直流稳压电源1台、示波器1台、万用电表1台、面包板1块、施密特集成电路CD40931块、光敏电阻1个、电阻、导线若干。 实验原理 光电型血细胞计数器的原理是利用换能器将血细胞流动过程中所出现的非电量转换为对应的电脉冲信号，经过信号处理后，显 ...

目的与原理 了解各种类型白细胞的形态特征，掌握血涂片制作方法和白细胞分类计数方法，进行不同鱼类白细胞分类计数和血细胞形态特征、变形率等的观察。 白细胞依据其形状、染色颗粒、细胞质和细胞核的形状大小可以进行分类。通常的分类方法是根据细胞浆中有无特殊的嗜色颗粒，将其分成颗粒细胞和无颗粒细胞。颗粒细胞又依据所含颗粒对染色剂反应特性，被区分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞；无颗粒细 ...

初生儿：（15～22）×109/L 婴儿：（10～20）×109/L 儿童：（5～12）×109/L 成人：（4～10）×109/L 白细胞分类计数参考值： 中性粒细胞： 儿童：0.3～0.65 成人：0.5～0.7 嗜酸性粒细胞：0.005～0.05 嗜碱性粒细胞：0～0.01 淋巴 ...

实验目的： 掌握细胞计数的方法。 了解区分细胞存活状态的方法。 实验用品： 0.4%台盼蓝溶液、无水乙醇或95%乙醇溶液、脱脂棉 普通显微镜、试管、吸管、毛细吸管、细胞计数板、绸布。 实验原理： 在细胞培养工作中，常需要了解细胞生活状态和鉴别细胞死活，确定细胞接种浓度和数量以及了解细胞存活率和增殖度，如用酶消化制备的细胞悬液中细胞活力的鉴别，冻存细胞复苏后的活力检测等。细胞悬液制备后，常用活 ...

一、原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。复苏后的细胞也要检查活力，了解冻存和复苏的效果。 用台盼兰染细胞 ...

由于传统的血球计数板已不能满足高速发展的细胞研究需要，市场上各种自动细胞计数的设备越来越多。常见的主要分为两 类：基于图像的细胞计数仪（Automated vision-based counter）和基于库尔特电阻抗原理的细胞计数仪。 两者主要区别在于，前者扫描仪器视野内图像，依靠设定的上下限细胞大小来进行图像识别，而后者根据细胞通过小孔引起电位变化来计算细胞个数（关于库尔特原理，详见此处）， ...

血细胞计数器（也被拼写血球计数仪）是一种蚀刻玻璃室提出双方将举行石英盖玻片完全室地板0.1毫米以上。为9毫米2的总表面积的计数室中进行蚀刻。 图1、 血细胞计数器的尺寸。 浓度的计算是根据上下方的盖玻片的体积。一个大广场（参见图2中的W）拥有量为0.0001毫升（长x宽x高，也就是说，0.1厘米×0.1厘米×0.01厘米）。 & ...

一、原理 用稀乙酸将血液稀释20倍，使红细胞全部溶解，滴入白细胞计数池中，在显微镜下计数，求得每立方毫米血液中的白细胞数。 二、器材和试剂 1. 器材 生物显微镜、Neubauer氏血细胞计数池、0.02 ml 吸管、小试管、刺血针、2 ml 吸管。 2. 试剂 白细胞稀释液:采用3%乙酸溶液。 三、稀释 ...

一、基本原理： 将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应.其优点是方法简便. 特异性高，非特异性荧光染色少.缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体.此法常用于细菌. 病毒等微生物的快速检查和肾炎活检. 皮肤活检的免疫病理检查。 二、试剂与仪器： 1. 磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01 mol/L，pH7.4 ...