一、实验试剂 1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。 2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。 D6948-00B: 加入8 ml无水乙醇。 D6948-01B: 加入80 ml无水乙醇。 D6848-02B: 加入80 ml无水乙醇。 二、实验步骤 1. 取1.5-5 ml 菌 ...
一、实验试剂 采用T7 Tag Affinity Purification Kit T7 Tag抗体琼脂。B/W缓冲液:4.29 mM Na2HPO4,1.47 mM KH2PO4,2.7 mM KCl, 0.137 mM NaCl,1%吐温-20,pH7.3 洗脱缓冲液: 0.1 M柠檬酸,pH2.2 中和缓冲液:2 M Tris,pH10.4。 PEG 20 000。 二、实验 ...
一、实验原理 限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。 二、实验试剂 1. 电泳缓冲液 2. 荧光染料 3. 电泳级琼脂糖粉 4. 10′加 ...
一、实验原理 Dynabeads Human Treg Expander offers a simple method for expansion of Treg cells that does not require antigen- presenting cells or antigen. Just add Dynabeads? Human Treg Expander and recombi ...
一、实验试剂 Absolute (96%-100%) ethanol 二、实验设备 1. Centrifuge with swinging-bucket rotor at room temperature capable of 3000 x g (such as Eppendorf 5810 with MTP rotor) 2. Adapter ...
一、实验原理 将抗C5a单克隆抗体包被固相聚苯乙烯板,加入经聚乙二醇(PEG)处理的待测样本,然后依次加入兔抗人C5a-IgC多克隆抗体和过氧化物酶标记的猪抗兔IsC,再加入底物2,2’-连氮-双(3-乙基苯骈唑啉-6-磺酸盐)(ABTS)和H2O2显色,于酶标仪405 mn处测定每分钟光密度增加量(OD/min),以OD/min为纵坐标,C5a标准晶浓度为横坐标绘制标准曲线图,求出 ...
一、实验原理 在DNA复制过程中,核苷的类似物5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridine简称BrdUrd)或5-碘尿嘧啶核苷(5-Iodo-2′-deoxyuridine简称IdUrd)可以代替核苷酸掺入新合成的DNA链,并占有胸腺嘧啶(Thymidine,T)的位置。哺乳类细胞在含有适当浓度的BrdUrd的培养液中经历二个分裂周期之后,其中期染色体的两个单体的DN ...
一、实验原理 维生素C是人类营养中最重要的维生素之一,缺少它时会产生坏血病,因此又称为抗坏血酸(ascorbic acid)。它对物质代谢的调节具有重要的作用。近年来,发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力,并具有化学致癌物的阻断作用。 维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中。水果中以猕猴桃含量最多,在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富;蔬菜以辣椒中的含量最丰富,在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量 ...
一、实验原理 花卉组织培养,就是分离花卉植物体的一部分,如茎类、茎段、叶、花、幼胚等,在无菌试管,并配合一定的营养、激素、温度、光照等条件,使其产生完整植株。由于其条件可以严格控制,生长迅速,1-2个月即为一个周期,因此在花卉植物的生产上有重要应用价值。 快速大量繁殖方面:对一些难繁殖的名贵品种花卉及一些短期内大量急需生产的花卉,应用很广。兰花、菊花、唐菖蒲等花卉利用腋芽增生,短期 ...
一、实验试剂 CFD稀释液(即VBS),10%三氯醋酸,C1q溶液。 二、实验设备 PEG(MW6 000),离心机。 三、实验步骤 1. C1q标记法C1q的同位素标记,一般用125I,也可用131I。 125I的标记有两种方法,即氯胺T法和乳过氧化物酶法。下面介绍氯胺T法: (1)在100 μl C1q(1 mg/ml)中,加入100 μCi125I, ...
一、实验原理 提取样品的总RNA后,一般根据RNA的凝胶电泳图来判断RNA的质量。由于RNA容易形成二级结构,因此常用甲醛变性胶来进行RNA电泳,得到的电泳图能真实反映RNA的质量状况。将RNA通过凝胶电泳使之在凝胶中分离出来,通过加入标准核酸分子(markers)对其进行鉴定,并用于转膜、杂交等。 二、实验试剂 1. DEPC 水的处理:用量筒量取去离子水2 L,在通 ...
一、贴壁细胞 1. 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。 2. 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0.5 ml固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。 3. 去固定液,用PBS或0. ...
原生质体(Protoplast):指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。一、原生质体的应用由于没有细胞壁,原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。 用作细胞杂交服务于作物改良 用作遗传转化的对象 研究细胞壁的发生过程 筛选突变体 膜的结构、运输、激素接受位点等的研究 用于分离细胞器和大分 ...
一、实验原理 Dynabeads are mixed with the cell sample in a tube. The Dynabeads will bind to the target cells during a short incubation and then the bead-bound cells are separated by a magnet. Positi ...
一、实验试剂 GUS Buffer (500 ml) 2.0478 g Na2HPO4 1.2688 g NaH2PO4 (=50 mM NaPi pH7.0) 10 ml 0.5 M EDTA (=10 mM) 0.5 g Triton X-100 0.5 g N-Lauroylsarc ...
1. Weigh 500 mg of glass beads in a 2 ml centrifuge tube add 0.2-0.5 g soil sample. Add 0.8 ml Buffer SLX Mlus. Vortex at maximum speed for 3-5 minute to lyse samples. For the best result A Mixer Mil ...
一、实验原理 The E.Z.N.A. HP Total RNA Kit uses the reversible binding properties of HiBind matrix a new silica-based material. This is combined with the speed of mini-column spin technology. A specificall ...
一、实验原理 核型(karyotype)一词在20世纪20年代首先由苏联学者T. A. Levzky等人提出。核型分析的发展有三项技术起了很重要的促进作用,一是1952年美籍华人细胞学家徐道觉发现的低渗处理技术,使中期细胞的染色体分散良好,便于观察;二是秋水仙素的应用便于富集中期细胞分裂相;三是植物凝集素(PHA)刺激血淋巴细胞转化、分裂,使以血培养方法观察动物及人的染色体成为可能。 ...
Note: The following protocol is based on using OBI’s vacuum manifold (Product No. VAC-03). 1. Set up vacuum manifold by following manufacturer’s instructions. 2. Place waste ...
一、实验试剂 氯仿、异丙醇、无水乙醇、异戊醇、溴酚蓝、二甲苯氰FF、溴化乙锭、饱和酚(pH7.0 )、Taq DNA聚合酶、十二烷基肌氨酸钠、十二烷基硫酸钠、三轻甲基氨基甲烷、乙二氨四乙酸、饱和酚、100 bp Ladder DNA Marker 、琼脂糖。 二、实验设备 SW-CJ-CO净化工作台、FA1004A型电子天平、70型离子纯水器、SZ-93自动双重纯水蒸馏器、 ...