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培养基母液配制

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm培养基配制通常先根据各组分性质,配制成较浓的母液(母液浓度为培养基浓度的若干倍如50或100倍),贮存在冰箱中备用,以后配制培养基时根据用量量取。由于培养基成分较多,如果每配制一次即进行多次称量(不少成分用量较微),不仅会造成较大的误差,而且会增加 ...

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培养基的配制和灭菌

以1000 ml “MS + 3.0 mg/l NAA + 0.5%(即5 g/l)琼脂 + 3%(即30 g/l)蔗糖”为例。第一步:准备好配制培养基的一切用具和试剂。第二步:称量5 g琼脂和30 g蔗糖,溶解在大约所要配制培养基 2/3~3/4左右体积(约600~750 ml)的(蒸馏)水中,加热溶解,不时搅拌,避免出现琼脂生块和泡沫。第三步:根据用量,用量简或移液管从母液中取出所需量的大量元 ...

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体外培养细胞

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm一、所谓细胞培养(Cell culture)是指细胞包括单个细胞在体外条件的生长。组织培养的发展史已有近百年,最初的组织培养是胚胎学和微生物学的引申,建立于无菌原则上,用天然体液(如胎汁、血浆)来维持从整体切下的组织块,对细胞进行形态和功能的观察。 ...

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豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的分离培养与鉴定

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm魏运军张学渊  (第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉科重庆400038)  提 要: 目的 建立稳定可靠的耳蜗微血管内皮细胞分离培养方法。方法 采用显微解剖法分离出耳蜗血管纹组织块培养法进行体外培养。结果 接种后2 d 部分组织块边缘有散在的细胞生长 ...

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细胞培养污染对策及预防方法

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm概论§污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。§一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。(一)污染的类型§细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培 ...

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DMEM细胞培养基的成分

DMEM(A) 细胞培养基(粉末型)成分 序号 化合物名称 含量 (mg/L) 序号 化合物名称 ...

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原代细胞培养实验

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm实验目的和要求:掌握无菌操作技术。了解小鼠解剖操作技术。了解原代细胞培养的一般方法与步骤了解培养细胞的消化分散。了解细胞计数方法。了解倒置显微镜的使用。实验原理:原代细胞培养是将机体内的某组织取出,分散成单细胞,在人工条件下培养使其生存并不断生长、 ...

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流感病毒细胞分离培养

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm一、组织培养概况(一)组织培养定义组织或细胞培养是指从机体中取出组织或细胞,模拟机体内的生理条件在体外进行培养,使之生存和生长。(二)、组织培养的原理组织培养主要是为病毒易感的组织细胞提供一个良好的生存环境,使细胞对环境产生适应性,获得生长繁殖的能 ...

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CHO细胞表达系统与酵母细胞表达系统比较

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm CHO细胞表达系统与毕赤酵母表达系统是当前发展前景看好的两个表达系统,为了能够更加直观地对两个表达系统有一定的认识,特意在此篇中对两个表达系统作一定的比较,从而能够更进一步的对两个表达系统有更深的了解1.CHO细胞表达系统 ( ...

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成人骨髓基质细胞体外培养及鉴定

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm王振斌1 艾合麦提·玉素甫1 邹林樾2 刘大鹏1新医大一附院 1骨科专科医院创二科;2 中心实验室,乌鲁木齐 830054关键词:骨髓基质细胞 细胞培养 成骨细胞骨髓是一个具有多种细胞成分的复杂器官,有造血及成骨能力。骨髓细胞的成骨能力来源于骨髓基 ...

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CHO细胞的稳定转染与基因表达

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm1、pcDNA3.1+-gD的线性化: pcDNA3.1+使用说明书推荐了以下几个酶作为线性化酶(BglⅡ MfeⅡ Bst1107Ⅰ Eam1105Ⅰ PvuⅠ ScaⅠ SspⅠ)通过DNAMAN分析gD序列发现其带有MfeⅡ酶切位点。2、转染 ...

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细胞培养从头学起

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm常用设备准备室的设备:单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品规(放置消毒过的物品)、包装台。配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)。培 ...

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细胞活性测定方法专题讨论

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm我们在实验过程中很多时候都要用到细胞活性测定技术,现在常用的细胞活性测定方法有台盼蓝染色法、克隆(集落)形成法、3H放射性同位素掺入法、MTT法等。其中MTT法以其快速简便,不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。 ...

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哺乳动物细胞表达系统

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm按照宿主细胞的类型,可将基因表达系统大致分为原核、酵母、植物、昆虫和哺乳动物细胞表达系统。与其它系统相比,哺乳动物细胞表达系统的优势在于能够指导蛋白质的正确折叠,提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能,因而表达产物在分子结构、理 ...

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一株抗人内皮细胞培养及单克隆抗体的制备与鉴定方法

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm摘要:从人脐静脉分离的内皮细胞经培养后免疫Balb/c小鼠,利用小鼠杂交瘤技术,建立了一株持续分泌抗人内皮细胞单克隆抗体的杂交瘤。对其进行了较系统的鉴定,其抗体类别为IgG1。该单抗特异性地识别人内皮细胞,而与血细胞无交叉反应。关键词:单克隆抗体, ...

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细胞培养基本技术(免疫细胞分离、肿瘤细胞株传代培养)

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm(张卓然、孟庆丽、陈琰、陈彦伟)一、免疫细胞分离技术1、淋巴细胞的分离取肝素抗凝血1m1 加Hanks 液1m1 稀释后,沿管壁徐徐滴流叠加盛有2m1 淋巴细胞分离液的试管内(注意勿与分离液混合,然后2000r/min 水平离心20min,管内分为 ...

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角质形成细胞的原代培养方法

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm人角质形成c方法A. 从新生儿包皮分离出表皮角质形成细胞1. 在包皮环切术中,包皮放置于含有庆大霉素(Cat.No.15710)(浓度为5ug/ml)的Dk-SFMZ中。包皮可保存于2~8°C直到需要使用时。(注意:人类包皮可以保存于此种物质中2~ ...

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精彩细胞培养图片

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm如何鉴定、观察和分析细胞的种类和状态,是细胞培养过程中一项很重要的内容,为了方便广大同学们对细胞图片的查找和利用,丁香园着力打造最好的细胞图片库!(注:标准细胞主要是归纳于一些书籍中或资料中的标准细胞图片,而原创细胞库主要归纳战友们自己拍摄的细胞图 ...

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细胞培养实验

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm一、制备1000mlRPMI 1640培养基;RPMI 1640 干粉培养基10.4g(1包)蒸馏水 400ml   ↓ 磁力搅拌至完全溶解   ↓ 加三蒸馏水定容至1000ml在超净台内无菌条件下,用灭菌后的并置有0.22&m ...

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人的外周血淋巴细胞培养实验

细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/cellculture.htm一、实验目的 掌握人体微量血液体外培养制备染色体标本的方法。二、实验原理 人外周血液中的小淋巴细胞,几乎都处在G1期(G0期),一般情况下是不再分裂的,在培养液中加入植物凝血素(PAH)时,这种小淋巴细胞受刺激转化为淋巴母细胞,随后进入有丝分裂。这 ...

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