• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        人的外周血淋巴细胞培养实验

        互联网

        2197


        掌握人体微量血液体外培养制备染色体标本的方法。

        二、实验原理

        人外周血液中的小淋巴细胞,几乎都处在G1期(G0期),一般情况下是不再分裂的,在培养液中加入植物凝血素(PAH)时,这种小淋巴细胞受刺激转化为淋巴母细胞,随后进入有丝分裂。这样经过短期培养,秋水仙素的处理,低渗和固定,就可获得大量的有丝分裂细胞。本方法已为临床医学、病毒学、药理学、遗传毒理学等方面的广泛应用。

        三、实验材料

        仪器设备

        5毫升灭菌注射器,离心管,吸管,试管架,量桶,培养瓶,试剂瓶,酒精灯,烧杯,天平,离心机,恒温培养箱。

        材料和试剂

        1.人的外周血淋巴细胞。

        2.Giemsa染色液原液:配方是0.5g Giemsa+33ml甘油+33ml甲醇。配制方法是:在研钵内先用少量甘油与Giemsa粉混合,研磨至无颗粒为止,再将其余甘油倒入,搅拌后56 o C水浴保温2小时,再加入甲醇,搅匀后保存于棕色瓶中。

        3.Giemsa染色液应用液:用0.1M pH7.4磷酸缓冲液稀释Giemsa染色液原液10倍。

        四、实验步骤

        1. 培养液的分装:在无菌室内或接种罩内,用移液管将培养液和其他各试剂分装入10毫升培养瓶中,每班8~10瓶,每瓶量为:

        1640培养液4毫升

        小牛血清1毫升

        PHA0.2毫升

        肝素0.05毫升

        双抗(青霉素和链霉素):终浓度为:100单位/毫升

        pH:7.2~7.4用3.5%碳酸氢钠调节

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序