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真核基因表达调控　　一、真核基因组的复杂性　　与原核生物比较，真核生物的基因组更为复杂，可列举如下。　　▲真核基因组比原核基因组大得多，大肠杆菌基因组约4×106bp，哺乳类基因组在109bp数量级，比细菌大千倍；大肠杆菌约有4000个基因，人则约有10万个基因。　　▲真核生物主要的遗传物质与组蛋白等构成染色质，被包裹在核膜内，核外还有遗传成分(如线粒体DNA等)，这就增加了基因表达调控的层次和复杂性。　　▲原核生物的基因组基本上是单倍体，而真 ...

如果愿意，可以将某些人的身高调控成姚明那样的大高个、也可以把人类衰老的时钟往后再拨一拨……而这些可能不再是遥远得要苦苦等上几百年的事情了。复旦大学的科研人员最近找到了一种更为高效、快速地**“基因天书”的“密码”，这意味着人类大规模、逐一了解3万个基因中每个基因的功能、并找到基因疾病的根源将不再那么遥不可及。　　据悉，该项轰动世界、被称为“里程碑式发现”的科研成果已由国际顶尖生命科学杂志《细胞》在线刊登，并将刊登在8月12日 ...

无创DNA产前检测技术引领孕检新时代作者: 来源:生物谷 发布者: 亦云 类别:新闻扫描几十年前，生物学家们都发现胎儿细胞会通过胎盘进入母体血液循环系统，但由于技术上没能取得突破，至今生物学家们都不能将这些母体外周血中的胎儿细胞分离出来应用于无创性的产前诊断。转机出现在1997年，香港中文大学的Dennis Lo教授率先发现孕妇外周血中存在“漂流”的胎儿DNA。即便是在怀孕初期，母体外周血中胎儿的游离DNA含量也在5%左右。于是研 ...

阳性克隆筛选方法汇总——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法 近几年来，基因重组的技术层出不穷，包括TALEN和CRISPR/Cas9在内的重组技术给基础研究提供更为方便和快捷的分子生物学工具。 关于这些技术的具体原理和操作细节，这里不做展开介绍，主要谈一谈在用这些技术进行细胞株构建的过程中，如何做才能加快阳性克隆筛选的步伐,做好这个关键的步骤。一. 混合克隆pool验证 质粒转染后48-72小时后取转染后 ...

摘要：据8月10日刊《美国医学会杂志》上的一则对以往研究的回顾和分析报告披露，作为确定胎儿性别的一种无创伤性的方法，在妊娠7周后从母体血液中获得的无细胞胎儿DNA的检测效果良好，而基于尿液的检测则是不可靠的。无创性产前胎儿性别确认可为人们提供一种重要的创伤性的细胞遗传学性别确认的替代检测，后者目前是确认胎儿性别和单基因病的最可靠的标准。根据文章的背景资料，羊膜穿刺术会带来数量少但却是可检测得到的与手术有关的 ...

基因诊断是通过检测基因的存在状态或缺陷对疾病作出诊断的方法。基因诊断的主要技术：1、核酸分子杂交2、聚合酶链反应（PCR）3、基因芯片技术1 核酸分子杂交技术核酸杂交（Nucleic acid hybridization）是指具有一定同源性的两条单链核酸在一定条件下，按碱基互补的原则重新配对形成双链的过程。一、核酸杂交的基本原理 DNA的变性和复性： 在一定的条件（如适当的温度、有机溶剂存在等）下，DNA的双链可解开成为单链，这一过程 ...

如果链接不好用，请将网址粘贴到地址栏，回车即可。英文简历常用词汇http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=11&id=1199405&sty=3&keywords=%B3%A3%D3%C3%B4%CA%BB%E3英文简历常用词汇及用语http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=11&id=233169&sty=3&keywords=%B3%A3%D3%C3%B4%CA%BB%E3医学英语常 ...

1. 假设下列是小鼠基因组DNA的一个片段，其中含有开放阅读框（ORF）吗？若有请标出起始和终止密码子位置。一般来说，该ORF是基因编码序列的可能性大吗？tctcaagaagatgtcgattccattctccaaccatcttagactcttcatgaggaaaaagaggaaaacaagttgaggacacggttttacctccaggac2. 你设计了一对PCR引物，其中上游引物为22个碱基。公司代为合成后提 ...

本人初来乍到，草译了一篇文献，供各位大虾批评，就图先混个脸熟。癌症治疗中的增殖性腺病毒Alemany R, Balague C, Curiel DT（Replicative adenoviruses for cancer therapy.Nat Biotechnol. 2000 Jul;18(7):723-7. Review. ）摘要： 在癌症治疗领域取得的快速进展就是具有增殖活性的病毒。腺病毒是一种温和的致病性人类病毒，它可在多数人类癌症的起源细胞——上皮细胞中大量繁殖。当病 ...

在互联网上，有很多软件可以解决分子生物实验人员从立项到最后写论文的实际问题。本文提供了对相同作用的很多软件进行比较后推荐给一线实验人员使用的软件。一、资料收集整理阶段。在这一阶段，需要查找某个专题的文章,并写出对该专题的综述,以便对自己所要做的课题的现状有一个基本的了解。推荐软件：Reference Manager 9.0优点：可以在线通过查找关键词搜索PubMed和609个Z39.50数据库中的专业资料,保存查找的资 ...

不用试剂盒的凝胶回收（来自网络） 2008-01-09 15:41:32| 分类： 分子生物学实验室 | 标签： |字号大中小 订阅 .（1）用小针头在0.5ml离心管底部打洞，用玻璃棉塞住离心管底部。（2）紫外透射检测仪下观察，用小刀片小心切出含有目的片段的凝胶。（3）将凝胶条放入0.5ml离心管中，外套1.5ml离心管，8000rpm离心3分钟。用微量取液器吸取1.5ml离心管中的液体，转移到另一干净的1.5ml离心管中。然后重复离心，直到将凝胶条中的液体全 ...

反向遗传学是相对于经典遗传学而言的。经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研究生命的发生与发展规律。反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列的基础上，通过对靶基因进行必要的加工和修饰，如定点突变、基因插入\缺失、基因置换等，再按组成顺序构建含生物体必需元件的修饰基因组，让其装配出具有生命活性的个体，研究生物体基因组的结构与功能，以及这些修饰可能对生物体的表型、性状有何种影响等方面的内容。与之相关的研究技术称 ...

质粒DNA的提取与鉴定( 一)收获细菌（1）将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ML的试管中，接入一单菌落，于37度剧烈振荡培养过夜（2）将1.5ml培养物倒入1.5ml离心管中，用台式离心机于4度以12000g离心5min，将剩余的培养物储存于4度（3）吸尽培养液，使细菌沉淀尽可能干燥2碱裂解法小量抽提质粒　　（1）将细菌沉淀重悬于100μl预冷的溶液Ⅰ（50mmol/L葡萄糖，25mmol/l Tris –HCl ...

一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则，即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常，一个50μl的反应体系中，1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶，则可相应缩短反应时间；如果减少酶的用量，对许多酶来说，相应延长反应时间（不超过16小时）也可完全反应。二、 选择正确的酶不言而喻，选择的酶在底物DNA上必须至少有 ...

美国FDA已批准用RNAi进行临床研究。我国要加快进行RNAi临床前研究，需合成单位、研究单位和药厂通力合作，请各位对合成siRNA的成本降低、修饰、靶向给药、体内给药方式和剂量、药代动力学方法等提出宝贵意见。以便联系合作和互相促进、共同提高。附上RNAi临床前研究和临床新进展。4364753@sina.com.cn近据国外医药信息刊物报道，一种全新生物工程药品“RNA干扰剂”(非干扰素)业已浮出水面并有望在3年内上 ...

小弟最近在做荧光定量。由于荧光定量的灵敏性，一个处理组如果只做3个生物学重复（即每个处理组取3尾实验动物，分别提RNA，分别反转录，做定量），那个体之间的差异，势必会使实验结果难以分析。【以上内容可参考： http://www.dxy.cn/bbs/topic/16659187 下文中，第1种思路类似该帖中第1种情况。】为了增大样本量，以更好地估计总体，同时为了减小个体间的差异对实验的影响，且为不使试验成本过高，我身边的人有以下3 ...

近10年来，现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域，为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为，人类基因组并非人们想像的那样稳定，诸如基因重排、扩增、缺失，突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生，这些改变对于基因表过和调控，以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。　　医院病理科档案中积存的大量石蜡包埋组织，是一个可靠的分子生物学研究的材料来源。在石蜡切片上进行原位杂交或原位PCR ...

LAMP法的原理该方法主要是利用4种不同的特异性引物识别靶基因的6个特定区域，且可在等温条件进行扩增反应。基因的扩增和产物的检测可一步完成，扩增效率高，可在l5～6O min扩增1O^9～lO^10 倍；特异性高，所有靶基因序列的检测可只通过扩增产物的有、无来判别。有、无扩增反应是利用荧光定量PCR仪检测反应的荧光强度或利用核酸扩增过程中产生的焦磷酸镁沉淀反应用浊度仪检测沉淀浊度来判定的1．引物的设计：基于靶基因3'端的 ...

表达载体的构建方法及步骤一、载体的选择及如何阅读质粒图谱目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。一个合格质粒的组成要素：（1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。（2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+（3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段（4） P/E 启动子/增强子（5）Terms 终止信号（6）加 poly（A）信 ...

进行一次成功的连接实验需要优化一系列实验指标。A）载体和插入片段的摩尔浓度比特别重要，载体：插入片段的摩尔数的变化范围可为8：1到1：16，但通常的变化范围是3：1到1：3。插入片段的长度和序列的变化会影响和同一载体的连接效果。每一个连接反应都需要作实验，来选择最佳的载体和插入片段的摩尔数比。在最小的反应体积中，通常一个连接反应用10-50ng的载体DNA。B）进行连接反应时的保温的时间和温度也需优化。一般而言，平 ...