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看了下面的文章，我觉得◎＃￥％％￥＃◎碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。为了方便理解，这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液：溶液I，50 mM葡萄糖 /25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液，是再自然不过的了。那么50m ...

Human RNA silences viral DNAMicroRNA plays an unexpected role in the process, researchers report in Science | By Charles Q ChoiRNA silencing can defend against viruses in humans, French scientists report in this week's Science. Surprisingly, say the scientists, microRNA (miRNA) appears ...

基因芯片技术及其应用　基因芯片(DNA Chip) 又称DNA 芯片、DNA 微阵列等等,是伴随人类基因组计划而产生的,是近年来分子生物学及医学诊断技术的重要进展。该技术的突出特点在于其高度的并行性、多样化、微型化、自动化,被认为是生命科学研究中继基因克隆技术、基因自动测序技术、PCR 技术后的又一次革命性的技术突破1 　基因芯片技术简介基因芯片将半导体工业的微型制造技术与分子生物学技术结合起来,通过把巨大数量的寡核苷酸、肽核酸或cDNA 固定 ...

三院士PNAS杂志联合发表肝癌研究成果作者:何嫱 来源:生物通 发布者: 吴林寰 类别:新闻扫描近日，由中国科学院北京基因组研究所吴仲义所长及其科学团队与国立台湾大学医学院陈定信院士、陈培哲院士共同合作开展的“肝癌癌症基因组合作研究”计划获最新进展，相关学术论文在最新出版的《美国科学院院刊》（PNAS）杂志上发表。吴仲义教授早年毕业于台湾东海大学，1982年获得加拿大英属哥伦比亚大学遗传学博士，曾先后任职罗彻斯特大学和芝加哥大学 ...

【经验】如何确认RNA的质量各位都知道，提取到质量良好的RNA（包括总RNA和mRNA，以下同）是非常困难，关于RNA的提取技术，我就不说了，为什么呢？或许各位非常关心呢，我是这样想的，我可以看到的资料或者是厂家的说明书，各位也同样可以看到的，内容当然都是一样的了，所以实验做的好不好，主要是心的投入多少的问题，所以希望大家自己多多思考啊！提取技术虽然不说了，但是我可以告诉各位如何准确确认RNA质量的有效方法（可能是 ...

核酸定量检测核酸的定量核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长 260 nm。每种核酸的分子构成不一， 因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg / ml 的dsDNA，37μg / ml 的ssDNA， 40μg/ml的RNA，30μg/ml的寡核苷酸。测试后的吸光值经过上述系数的换算， 从而得出相应的样品浓度。测 ...

:(各位大侠：小弟最近做克隆实验遇到很大的障碍，已经连续三次失败了。请各位大哥帮助分析原因，小弟不胜感激！我克隆的是一个肿瘤标志物的基因片段，长约150bp 。具体过程如下：一，普通PCR，电泳，切下特异条带；二，用QiaGene公司胶回收试剂盒提取特异条带DNA，所得胶回收产物约30ul。取2ul做荧光定量PCR(该方法条件优化已完成)，证实胶回收产物中目的片段含量很高。三，用上海生工的PUCm-T载体试剂盒完成连接反应 ...

【鸡毛蒜皮】之3重组质粒是“筛”出来的吗？重组质粒的筛选是质粒构建的重要步骤，重组子是筛出来的，这个命题没有问题。问题是最关键步骤不在筛选。影响重组质粒构建效率的最关键步骤在于酶切，不管是否是定向克隆还是非定向克隆。酶切的关键在于切干净，彻底的酶切反应是成功的一半，尤其是载体的酶切。1）酶切反应的前提是对质粒载体的大致定量，一般大小的质粒（3－5kb）一次连接的用量在100ng左右，一般挖胶回收的损失在50%左右，为 ...

找了个公司做RNAi，只做构建载体，转染细胞，找到干扰效果好的片段后，做成腺病毒载体，包装之后给我。公司给了个协议，我改了一下，大家帮忙看看要公司提供的东西够不够全面了，因为这个是论文的一部分，所以必须尽可能详尽，也怕写的不够详细公司偷懒赖账。另外有没有提的要求不合理的，也请大家指出。希望协议既要最大限度的满足我的需要，也要兼顾公平。谢谢呀。第一条 服务内容1.1甲方委托乙方完成COMF-shRNA构建、RNAi筛选、腺 ...

琼脂糖糖凝胶电泳，是一门常规技术，需要熟练掌握。1．目的学会常用的DNA琼脂糖凝胶电泳、。2．原理DNA双螺旋分子骨架两侧带有含负电荷的磷酸根，在电场中会向正极方向移动。不同长度的DNA由于受到凝胶介质的阻力不同，表现为不同的迁移率而被分开。3．器材电泳仪，水平凝胶电泳槽和梳子及其制胶模块，250ml三角瓶，微波炉，台式离心机，旋涡混合器，凝胶成像系统，分光光度计，微量移液取样器，1.5ml离心管，双面微量离心管架，试管 ...

我前一段时间看了一些有关“RNA介导的基因调控系统”方面的文章，对该系统的分类有一点体会，本想写综述发表，但感觉有和各位探讨的必要，故拿出其中一部分，希望你们发表不同的意见：小双链RNA（short double-stranded RNA, dsRNA）触发的RNA干扰是近年来生物界的研究热点。随着对RNA干扰(RNA interference, RNAi)研究地深入，人们逐渐认清了RNA系统在细胞内的基因表达调控作用,它不但能关闭生 ...

RNA样品的完整性在应用芯片技术（Microarray）和RT-PCR的基因表达分析实验过程中至关重要。传统的RNA样品QC只是界定RNA浓度，而对RNA 完整性没有针对性的测定标准。2100 Bioanalyzer为您提供了一整套快速简便的total RNA 及mRNA完整性测定平台。今天，RNA Integrated Number (RIN)，已经成为了世界公认的最为权威可靠的RNA样品质量控制标准之一。“The Introduction ...

前一段时间实验室要革新核酸染色技术，于是查了一下这方面的东东，发现有好多产品面市了，现提供几个有用的资料，希望能对大家的健康有用！-------------------------------GoldView(GV)核酸染料 http://www.sbsbio.com我们实验室在用这个产品，尽管效果不如EB，但是无毒害的，所以还是要好些的，并且用看EB的紫外波长就可以了，所以成本要小，推荐使用GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核 ...

Andrew Z. Fire 生于1959年,1983年于美国麻省理工学院获生物学博士学位,现任美国斯坦福大学医学院病理与遗传学教授。Craig C. Mello 生于1960年,1990年于美国哈佛大学获生物学博士学位,现任美国马萨诸塞大学医学院分子医学教授。2006年10月2日,瑞典卡罗琳斯卡研究院颁发了本年度诺贝尔生理学或医学奖,美国斯坦福大学医学院的Andrew Z. Fire和马萨诸塞大学医学院的Craig C. Mello因发现一种全新 ...

miRNA Northern Blot实验技术应用MicroRNA（miRNA）是真核生物中一类长度约为20-25nt（核苷酸）的非编码单链RNA分子，在生物进化过程中高度保守，约占整个基因组基因总数2%。大量研究表明，miRNA在多种生物过程中起关键作用，包括细胞的发育、分化、增殖和凋亡等；并且功能研究已证实多种miRNA分子与肿瘤发生、发展过程相关，miRNA具有类似于致癌基因或抑癌基因的作用。最早被发现的两个miR ...

随着人类基因组（测序）计划（Human genome project）的逐步实施以及分子生物学相关学科的迅猛发展，越来越多的动植物、微生物基因组序列得以测定，基因序列数据正在以前所未有的速度迅速增长。然而,怎样去研究如此众多基因在生命过程中所担负的功能就成了全世界生命科学工作者共同的课题。为此，生物芯片，一项将计算机芯片制作技术与生命科学研究相结合的新兴技术应运而生了！　　计算机芯片的工作本质上是对0与1这二个数字以各种方 ...

以下是整理的microRNA靶标数据库和软件资源列表，希望对microRNA的研究者有所帮助。（1）miRbase：众所周知的microRNA基因注释数据库。目前miRBase只提供了microRNA的靶标的预测软件的链接（如：PicTar）。最新版本发布时间：2010年9月。网址：http://mirbase.org/index.shtml（2）starBase：一个高通量实验数据CLIP-Seq（或称为HITS-CL ...

据《科学》杂志4月23日报道，MicroRNA在人体发育过程中起着意想不到的作用。法国科学家称核糖核酸沉默机制（RNA silencing）能够抵抗人体中的病毒，不可思议的是，小RNA (miRNA)竟然是组成这一机制的基础。“科学家一直认为miRNA与调节内源基因有关，而小分子干扰核糖核酸（iRNA）能够控制外源基因，尤其是病毒RNA基因，”该文的主要作者、来自法国斯特拉斯堡的植物分子生物学院的查利斯·亨利·莱西利亚在《科学 ...

分子遗传学常用词汇(中文)腺嘌呤Adenine(A)：一种碱基，和胸腺嘧啶T结合成碱基对。等位基因(Alleles)：同一个基因座位上的多种表现形式。一般控制同一个性状，比如眼睛的颜色等。氨基酸（Amino Acid）：共有20种氨基酸组成了生物体中所有的蛋白质。蛋白质的氨基酸序列和由遗传密码决定。扩增（Amplification）：对某种特定DNA片段拷贝数目增加的方法，有体内扩增和体外扩增两种。（参见克隆和PCR技术）克 ...

核酸分离纯化实验技术指南总RNA提取常见问题分析Q：RNA降解A：1. 新鲜细胞：如果试剂没有问题，且外源性污染也可以排除，那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如 果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞，一定要使裂解液能覆盖住细胞。2. 新鲜组织：某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏，胸腺等)，即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是：在液氮条件下将组织研碎，并且匀浆时使用更多裂解液。3. 冷冻样品：样品取材后应立即置于 ...