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在凝胶成像系统电脑上发现的东西。园里不没有。呵呵。帖一个分享一下。园里相关的方法还有：酵母总RNA提取 mRNA的分离技巧小麦总RNA的提取验证有效的多酚类植物(苹果,棉花)提取RNA protocolRNA提取,欢迎对其细节进行交流土壤DNA、RNA的提取 RNA 操作注意事项与实验技巧操作注意事项：　　由于RNA酶的广泛存在与难以灭活的顽固特性。使得RNA的提取纯化和后续工作变得非常困难。为了保证RNA的研究工作成功，请仔细阅读 ...

国家人类基因组北方研究中心对外开展重组腺病毒构建包装服务通过与美国Vector Biolab公司合作，国家人类基因组北方研究中心（北京诺赛基因组研究中心有限公司）利用优越的实验条件和训练有素的科研人员，成功构建的一个集克隆、包装、扩增、纯化为一体的重组腺病毒构建技术平台。从2005年7月成立腺病毒小组并开展实验至今，为课题组内部完成包装200多个腺病毒，为Vector Biolab公司成功包装近300个腺病毒，并且 ...

全基因表达谱差异研究有这些方法，EST测序（成本巨大）、DDPCR（特异性差，基本已经不用）、基因芯片（技术上比较复杂，数据处理工作量大）、SAGE技术（相对较科学，实验数据较可靠、花费较大）等。个人推荐：（本人原创，请斑竹加一分表示鼓励）cDNA-AFLP是从AFLP (amplified fragment length polymorphism) 衍生而来的RNA指纹识别技术，现已发展成较为成熟的转录组研究技术（Donson, et al., 2002） ...

核酸版有赖于yong主任、liven主任和管理员的倾心建设，以及后期加入的斑竹和各位战友的热情参与，凝聚了不少优秀的资源。为对这些优秀资源进行整理，以便于dxyer更好地利用本版资源，特向广大战友征集“旧帖整理”。有兴趣的朋友可以选择一个核酸基因技术方面的常规角度进行整理。我们将根据劳动量、整理视角的合理性、整理内容的安排的科学性等方面进行评价，赠予2分~5分不等的积分。好机会不容错过！核酸基因技术版期待因为您的 ...

看到这篇文章，非常的详细，和大家分享一下。由于内容比较多，编辑不是很方便，也上传了附件供大家下载。如果觉得有帮助记得投票或者顶贴哦！基因芯片 1什么是基因芯片 生物芯片，简单地说就是在一块指甲大小（1cm3）的有多聚赖氨酸包被的硅片上或其它固相支持物（如玻璃片、硅片、聚丙烯膜、硝酸纤维素膜、尼龙膜等，但需经特殊处理。作原位合成的支持物在聚合反应前要先使其表面衍生出羟基或氨基（视所要固定的分子为核酸或寡肽而定）并与保护基建立 ...

原位杂交的教程及问题分析,可以帮助分析杂交试验失败的原因.目录第一节 原位核酸分子杂交技术的发展?第二节 原位杂交技术的基本方法?(一)固定?(二)玻片和组织切片的处理?(三)杂交?(四)杂交后处理?(五)显示?(六)对照实验和结果的判断?第三节 原位DNA和DNA分子杂交方法?(一)地高辛(Dig)标记DNA探针在石蜡切片检测病毒DNA的方法?(二)生物素标记HPV-DNA探针在石蜡切片上检测HPV-DNA的方法?第四节 RNA原位核酸杂交方 ...

完整RNA的提取和纯化,是进行RNA方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有ＲＮＡ的提取过程中都有五个关键点，即１）：样品细胞或组织的有效破碎；２），有效地使核蛋白复合体变性；３），对内源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）有效地将ＲＮＡ从ＤＮＡ和蛋白混合物中分离；5），对于多糖含量高的样品还牵涉到多糖杂质的有效除去。但其中最关键的是抑制ＲＮＡ酶活性。RNA的 ...

到医院实习之前，我有幸跟随我的恩师，利用课余时间做了两年多的基础科研。从不懂规矩到渐入佳境，期间学习了很多东西，在此感谢我的恩师！我们是生物化学教研室，这两年的时间里我做了很多生化方面的实验。像细菌培养、细胞培养、PCR、western-blot、MTT测细胞增殖能力，这些实验都有商品化的试剂和推荐的操作方法，做起来，难度并不大。唯独让我感到苦恼的就是ShRNA表达质粒的构建这部分，它耗费了我们很多的精力，虽然最终 ...

现在许多从事分子生物学研究的人都非常恐惧EB，希望本帖对大家有帮助。EB只不过是被证明具有“潜在”的致癌性，并不表示一定就有致癌性！而之所以说是“潜在”的致癌性，仅仅是因为其致癌性是通过细菌诱变实验(Ames 测试)证明的结论。然而，用细菌进行检验的结果并不一定就能直接证明对人体或其它种类的生物具有相同的效果，这也就是为什么以前的《分子克隆》也只说EB有可能具有致癌性，而不是一定就是致癌物质的原因。Ames测试也只是对 ...

第一章 质粒DNA的分离、纯化和鉴定第一节 概 述　　把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(Vector)。细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。　　质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，它具有自主复制和转录能力,能在子代细胞中保持恒定的拷贝数,并表达 ...

最近做了四次电转化，两次成功转化率大于10的9次方，效果非常好 ；另从两次失败转化率吸取了教训；现将试验方案及操作与大家共享：1.细菌电转化感受态细胞的制备 （方案由李芃同学提供，lzf继承补充）1）由-70度冰箱中保存得菌种划单菌落，过夜培养16－20hr。晚上将将新鲜的菌落接种于2ml-5mlSOB培养基的试管中，37℃振荡培养过夜，转速控制在180rpm。2）第二天，取过夜培养物250uL转接入含50ml SOB培养基（1 ...

RNA提取的流毒非浅的经典误区（初学者的必看贴）最近碰到了好几个RNA提取的初学者来实验室学习如何提取RNA，对于如此简单的操作，却有如此多的人提取不出来，细问一下，原来他们的知识来源都是书本上或者网上的“RNA提取注意事项一类”的所谓经验，其实，他们提取不出来的真正原因，恰恰是他们严格遵守了所谓的经验，精力全放在不需要注意的地方，结果搞得自己很紧张， 真正需要注意的操作反而没有注意了。下面我就结合生物通上常见的R ...

最近在做连接的试验，由于需要多次纯化回收，而胶回收的回收率往往又很低，使得最后目的基因和载体的量非常低，电泳最后跑不出来，非常头疼，在dxy上也看到很多战友遇到这样的问题，于是对这方面的资料进行了整理，希望对大家有用，并希望各位战友继续对这一问题进行交流，补充，谢谢！！！整理的资料在附件中1.提高胶回收量的办法：1)增加电泳时的上样量。2)电泳缓冲液用新鲜配制的。3)切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很 ...

请注意发贴规则导言MICROARRAY，是固定在固体基片上的大量DAN序列的微阵列，是许多复杂核酸样本中特定DNA序列定性和定量研究的有效工具。日益引起人们兴趣的MICROARRAY，已经用于基因作图、变异分析和基因表达的检测，并且，有希望成为科学研究和临床应用的标准工具。从原理上和实践上，基因芯片都是已用于核酸定性、定量研究数十年的杂交方法（Southern blot、Northern blot、克隆杂交和点杂交）的 ...

随着核酸疫苗和基因治疗的迅速发展，高纯度的，符合药物动力学的质粒DNA的需求越来越大，本人准备的论文综述初稿，对目前大规模进行质粒DNA生产的流程有一些初步见解，与大家一起探讨。======================================================综述： 质粒DNA生产工艺的研究进展一、质粒DNA细菌质粒（plasmid）是存在于细胞质中的一类独立于染色体的自主复制的遗传成分，除了酵母的杀伤质粒（killer plasmid）是一种 ...

--------------------------------------------------------------------------------丁香园生物技术参考书供所有DXY战友使用分 子 克 隆 参 考主编 （暂缺）副主编 （暂缺）编辑 liven dqlover biowind wangjun2002274 biotin编者 （报名参加的战友，排名不分先后）zein第一章　质粒DNA的碱裂解法提取与纯化第二章　基因组DNA的碱裂解法提取与纯化第六章　感受态细胞的制备newdragon第一章　质粒DNA的碱裂解法提取与纯化y ...

gateway技术近两年开辟了高效克窿 转载新方法，特转载一篇于大家共赏，也欢迎更详细资料.GATEWAYTM克隆中基因看上去是什么样的？基因两端应该有att位点，在Entry克隆中是att L序列（100bp），而在表达克隆中是att B序列（25bp）。在att位点间的所有序列会和你的基因一起移动。因此，你必须预先决定是否包含诸如真核或原核翻译信号，或3'终止编码等DNA元件。我能克隆多大的片段？对于PCR产物，我们已经克 ...

作为分子生物学的工作者来说，DNA的提取几乎是我们每个人都要面对的工作，该工作看似简单，实则不然，当我们面对形形色色的组织样品，选择什么样的试剂以及什么样的方法能够获得最理想的结果，常常是我们每个实验工作者所要考虑的，现在我将园子里面出现过的有关DNA提取的有价值的一些帖子整理如下，希望能够对各位战友的实验科研工作提供一定的方便。1.线粒体DNA的提取http://www.dxy.cn/bbs/actions/ar ...

欢迎来到《核酸基因技术讨论版》：本版归属于“实验技术讨论区”，以讨论各种以核酸基因为对象的理论和实验技术。本版的宗旨是为您提供各种核酸基因的相关理论和实践经验的交流平台！欢迎您参与交流！发贴必读&加分标准：1、本版欢迎0分站友参与讨论，加分特优。20分以下的战友，加分从优。2、对置顶的零回复帖进行回贴的战友，加分从快从优。3、对本版置顶帖子的讨论，或积极参与各位斑竹发起的各种活动，加分从优。对本版的建设提出任何意见或建议 ...

RNAi这个东西蛮新的，也是比较难理解的。所以做这个题目的整理工作难免闹笑话，请大家多多指正。今天，武汉的DXYer小聚一下，感谢lad莅临武汉促成了这次聚会。同时也感谢lad把召集的重任交给我。我更加感谢能来捧场的武汉朋友们。同时感谢对此次活动关注的朋友，我就不一一列举他们的名字了。我希望以这一帖送给所有的关心我、爱护我、教育过我、帮助过我的朋友。谢谢你们!(时间问题，我没有整理成超链形式，但并不影响大家检索，不好 ...