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Analyzing Protein Complexes in Drosophila With Tandem Affinity Purification–Mass SpectrometryDEVELOPMENTAL DYNAMICS 232:827–834, 2005We describe the application of tandem affinity purification–mass spectrometry (TAP-MS) to the study of protein complexes in Dros ...

FRET (FluorescenceResonance Energy Transfer)荧光共振能量转移是距离依赖的dipole-dipole反应，能量从起始被激发的工体分子转移到受体分子不产生任何光子。FRET多肽是标记着供体分子和受体分子（淬灭基团）的多肽。在大多情况下供体和受体对是两个不同的染料。如果受体分子是非荧光物质（淬灭基团）从荧光供体转移的能量被转变成分子共振。当FRET被终止时（将供体受体分开），可以检测到 ...

Sphingosines鞘氨醇Synthetic Sphingosines with C18 Sphingoid Base（合成鞘氨醇与十八类鞘氨醇碱）Synthetic Sphingosines with Sphingoid Bases other than C18合成鞘氨醇与类鞘氨醇碱比其他Synthetic Dihydrosphingosines（二氢鞘氨醇）3-Keto-Dihydrosphingosines （3酮-二氢鞘氨醇）Phytosphing ...

Northstar BioProducts（NSBP），是美国ACC公司旗下研究产品的总称。Northstar BioProducts（NSBP）为应用设备提供一流质量的试剂和优质的化学品，用在糖生物和糖蛋白性质鉴定方面。原Seikagaku America生产的产品现在由美国ACC公司负责管理，并将其归属到Northstar BioProducts（NSBP）品牌下进行销售。Northstar BioProducts（NSBP） ...

【转】五年western blot 实验经验总结1.抗体的选择对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区的实验者而言，感触尤深。在这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元 ...

/biology/UploadFiles/201203/2012032221433145.jpg左边是鼠尾草、右侧是鼠尾草活性成分salvinorin A与阿片受体结合在分子水平上，像salvinorin A（致幻植物鼠尾草的活性成分）等*通过激活大脑和身体中某些特定的蛋白质（受体）发挥作用。Salvinorin A是天然的致幻剂，它之所以不寻常是因为它只与人类大脑中一个受体相互作用，这个受体就是阿片受体（kappa opio ...

反义肽（antisense peptide）：系指DNA 正义链的互补链（反义链）上同一读码框所编码形成的多肽。可从反义DNA 链5’→3’或3’→5’方向阅读，转录、翻译合成蛋白多肽。研究发现,正义氨基酸为亲水性,则反义氨基酸为疏水性,反之亦然。反义肽可以和正义肽相互作用,而将反义肽的N 端与C 端互换,合成的倒序反义肽(invertedantisense peptide) 同样可以选择性结合其正义肽。相互作用:1、反义肽与正义肽之间有相互识别的特 ...

利钠素家族包括：心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide ANP)、脑钠素(brain natriuretic peptide，BNP)、C型利钠素(c-type natriuretic pepdde，CNP)。利钠素家族是肾素-血管紧张素-醛固酮系统的天然拮抗剂，也抑制后叶加压素及交感神经的保钠、保水作用。ANP和BNP两者的作用相似，之前对利钠素与蛛网膜下腔出血(SAH)后的低血钠的关系做过较多的研究，但其与SAH的关 ...

生物质谱技术帮助发现精神分裂症特征蛋白 (2006-12-28 9:34:47,新闻来源：人民网)日前，四川泸州医学院附属医院硕士研究生姜伟，在导师王开正教授指导下，利用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术，发现了一组对精神分裂症的早期预警、鉴别诊断、治疗观察具有重要意义的蛋白标志物。　　目前鉴别诊断精神分裂症缺乏有效的病理学、影像学和实验诊断依据，也缺乏客观的检查指标用于早期诊断，这也是造成对某些精神分裂症的评定产生分歧、鉴定 ...

Western Blot一．配胶1．注意一定要将玻璃板洗净，最后用ddH2O冲洗，将与胶接触的一面向下倾斜置于干净的纸巾晾干。2．分离胶及浓缩胶均可事先配好（除AP及TEMED外），过滤后作为储存液避光存放于4℃，可至少存放1个月，临用前取出室温平衡（否则凝胶过程产生的热量会使低温时溶解于储存液中的气体析出而导致气泡，有条件者可真空抽吸3分钟），加入10%AP（0.7~0.8:100, 分离胶浓度越高AP浓度越低，15%的分离胶 ...

一，酵母表达系统毕赤酵母表达系统（invitrogen公司）：分泌型质粒pPIC9K，宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha （甲醇诱导）宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二，原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签（N端）：PET5-(a)氨苄抗性带His标签（N端）：PET28-(a)卡那抗性带His标签（C端）：PET24-(b)卡那抗性带His标签（C端）：PET21-(a)氨苄抗性带His标签（N端）+TrxA(硫氧还蛋白)：PET-32a氨苄抗性带His标签（N端）+DsbA(二硫键形成蛋白A)：氨苄抗性带Gst标签（N端）：pGEX-KG，pGEX4T-1，pGEX-5x-1共表达载体：pET-duet。(含有两个T7启动子)表达宿主菌为M15系列表达载体：pQE31表达宿主菌为DH5a,JM109系列热启动表达载体：pBV220克隆载体pGEM-7Z,pUC19 三，自研发原核表达载体1，带His标签（N端）：PET-DsbA卡那抗性2，带His标签（N端）：PET-DsbA（mutation）卡那抗性说明：DsbA(二硫键形

重组蛋白A在免疫试剂应用中的新进展广州精达公司-美国免疫学博士 胡勇摘要 抗体是免疫诊断试剂领域最重要的原料，蛋白A是纯化抗体最有效的工具，广泛用于免疫诊断试剂的许多领域。重组蛋白A具有产量大，成本低，纯度高，特异性好的优点。重组蛋白A的国产化将极大促进免疫诊断试剂的产品开发和市场效益。 关键词 抗体纯化 免疫诊断试剂 重组蛋白A 国产化蛋白A（Protein A）为金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白，具有与人类和哺乳动物血液中免疫球蛋白IgG分子的Fc段特异性结合的能力，广泛应用于各种免疫诊断试剂的制备，包括抗体的检测和纯化、免疫细胞化学、病原体的快速诊断；蛋白A也可用于免疫吸附治疗领域。采用发酵、基因诱导、镍柱纯化生产的重组蛋白A使得其成本下降、纯度提高、特异性增强，已经成为免疫诊断试剂抗体制备中最重要的工具！目前，国外有2-3家蛋白A的产品在中国销售，但价格昂贵；国内已有数家公司开展了蛋白A 的克隆或表达，其中，广州精达公司采用美国克隆和生产工艺，顺利的完成了该种产品的国产化。I、蛋白A的应用范围1、用于抗体的检测和纯化 由于蛋白A与IgG具有特异性结合

发信站: Unknown Space - 未名空间 (Thu Apr 28 14:37:18 2005) WWW-POST 本文献给YL 引子 　2000年5月6日，我一个人在合肥三孝口书店闲诳,希望买点参考书带出国去。我注意到有一本翻译过来的书， 书名叫做《蛋白质纯化与鉴定实验指南》。这本书很奇怪，里面列出了很多具体实验的步骤和解释。我很快意识到，这本书实际上是冷泉港实验室开设的一门《蛋白质纯化与鉴定》实验课的教材。这本书深深的吸引了我， 因为里面记录的实验十分经典，涵盖了蛋白质纯化中可能用到的大部分手段，并且对实验细节有十分详尽的解释。 我对这本书爱不释手，于是就买了下来, 而且当时就动了上这门课的念头。这是一个很模糊的想法，没有想到的是，五年以后这个想法竟然实现了。 这一系列文章是我对这次上课经历的全面总结，一部分是八卦，一部分是流水账般的记叙，还有一些是从这课程学到的tricks, 最后也掺杂着自己过去做蛋白质纯化的心得。想到哪说到哪，文字挺松散的，见笑了。 我来解释一下标题。课程结束之后，每一个学员都有一份证书，印着Per Pura

【我们实验室的SDS-PAGE改良集锦】蛋白SDS-PAGE电泳及定量在《蛋白质技术手册》基础上，根据实验条件的方便修改。请仔细看各种细节改良，各种操作效果经本实验室5年验证。【一】 储存液配制（均4℃冰箱保存，用完放回）（1）2 M Tris-HCl (实测pH 8.9±0.1，25℃) 500 mL：121 g Tris base加350 mL双蒸水溶解，以玻璃棒搅拌约1 min，缓慢加入浓盐酸（11.8 M）20 mL，继续搅拌均匀，并使Tris全部溶解，溶液澄清，加入适量双蒸水至500 mL，倒入无色玻璃试剂瓶中，4℃冰箱保存。（2）100 g/L SDS 溶液： 10 g SDS （要求高纯度，其质量明显影响电泳效果）加100 mL双蒸水，于洁净的250 mL烧杯中进行微波加热溶解，注意不要爆沸，间歇用玻璃棒搅拌以加速溶解，完全溶解后的溶液应清澈透明无色。倒入无色玻璃试剂瓶中，4℃冰箱保存。冰箱取出后可微波加热促进储存液的溶化。（3）75%（v/v）甘油：于500 mL量筒中倒入分析纯甘油300 mL，加双蒸水100 mL，以一次性塑料手套封口，颠倒量筒使甘油完全溶解，然后倒

蛋白质纯化－人人都会用到的实用技术研究的最后还是要看基因表达产物,无论是用于检测还是用于棉衣保护,都需要将表达出的蛋白质分离和纯化,然而蛋白质性质各异,故纯化方法不同,现共享一些基本的纯化方法,以飨读者:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质，综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异，利用一种同时多种性质差异，在兼顾收率和纯度的情况下，选择蛋白质 ...

各位同学，本人前些日子做了脂肪氧化酶活性测定的工作，遇到了一些问题，想在这里向大家请教，希望大家能不吝赐教，来帮助我解脱心中的迷惑。本人是做植物材料的，从叶片中提取粗蛋白，0.5g叶片使用液氮研磨，加入到4ml冰预冷提取缓冲液（0.05mol/L PH6.4 磷酸钠缓冲液，1mmol/L EDTA，1%PVP，1mmol/LDTT）中，12，000g，4℃离心10min，取上清进行脂肪氧化酶酶活性分析。通过检测234nm光吸收（Beck ...

蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质，综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异，利用一种同时多种性质差异，在兼顾收率和纯度的情况下，选择蛋白质提纯的方法。蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂的混合物形式存在，每种类型的细胞都含有成千种不同的蛋白质。蛋白质的分离和提纯工作是一项艰巨而繁重的任务，到目前为止，还没有一个单独的或一套现成的方法能把任何 ...

我搞的是光合作用中的蛋白质。现在大家似乎都乐意去研究最前沿、最热门的东西，如干细胞、信号转导、神经生物学、细胞分化及衰老等，而基础研究受到了大家的冷落。光合作用是绿色植物、藻类和某些光合细菌在光照下将光能转化为化学能，并利用二氧化碳和水等无机物合成有机物同时释放氧气的过程，是地球上最重要的化学反应。光合作用在叶绿体上进行，包括光反应和暗反应两个过程，其中光反应是由光系统I（photosystem I，PSI）和光系统 ...

核磁共振技术在结构生物学研究中的应用颜贤忠(国家生物医学分析中心)1. 前言人类基因组计划提供了大量新的信息，并由此改变了生物学研究的方式。这些信息特别在结构生物学领域产生巨大影响，导致了一个新的研究领域的产生，这就是结构基因组学，或者叫做基于结构的功能基因组学。基因组学的主要问题之一在于它不能确定新的基因产物的生物学功能，而这正是功能基因组学要解决的问题。利用新的基因与已知功能基因之间的序列同源性比较，人们在发 ...

Western Blot 内参选择要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗 ...