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蛋白表达及纯化研究中的FAQ一、原核蛋白表达及纯化1、怎样提高E.coli中6′His标签蛋白的表达水平？6 × His标签蛋白的表达水平低原因可能为：目标蛋白有毒或不稳定，或者是细菌生长过程中不能维持表达结构。有时候，插入片段的5’端序列编码了干扰转录或翻译的元件（比如有反向重复序列而形成茎环结构，掩盖了Shine-Dalgarno序列），在这种情况下，有必要检查和修改表达序列。改变培养基和宿主菌也可能会有所帮助。外源性 ...

首先打开Google，在关键词输入框中输入"index of/"inurl:lib(双引号为英文状态下），选择“搜索简体中文网页”选项，回车搜索，得到了一些网页，不要以为这是一些普通的页面，其实它们是一些图书网站的资源列表，点击打开它来看看，怎么样？是不是所有资源一收眼底了？使用其他关键字可能得到更多的资源在搜索框上输入："index of /"cnki再按搜索你就可以找到许多图书馆的CNKI、VIP、超星等入口！在搜索框上输入："i ...

蛋白质提取分离技术选择材料及预处理　　以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析，有机溶剂提取，层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力场的 ...

　　分离技术是高科技产业中生物工程技术和中草药现代化中最重要的组成部份之一。生物分子的纯化，一般是指蛋白、酶、抗体及抗原、肽类、多肽类激素、核酸及多糖等的分离纯化。天然药物的纯化包括植物药物中一个或多个有效成分的分离纯化。根据待测样品的物理和化学特性，选择适当的分离方法和分离介质，方能筛选出经济、有效的纯化流程。【粗品的纯化】　　在常压或低压下处理大量的粗品时，为了避免堵塞柱子，一般使用MKF-CISLM, MKF-CICLM, MKF ...

Chemistry and Biology of Heparin and Heparan SulfateBundefined Publisher: Elsevier Sciencundefined Number Of Pages: 79undefined Publication Date: 2005-12-2undefined Sales Rank: 143952undefined ISBN / ASIN: 008044859undefined EAN: 978008044859undefined Binding: Hardcoveundefined Manufacturer: Elsevier Sciencundefined Studio: Elsevier Scienc ...

当然啦,不只是蛋白组学会议,还有一些RNA干扰等方面的东东.Meetings DiaryRNAi3–4 November 2003, Boston, MA, USAWebsite: http://www.lifesciencesinfo.com/email/3003/Future Challenges for Target Validation3–4 November 2003, London, UKWebsite: http://www.marcusevans.com/EVENTS/ ...

1、 水化上样缓冲液（ I ） :尿素 8M 4.805gCHAPS 4% 0.4gDTT 65mM 0.098g （现加）Bio-Lyte 0.2%(w/v) 50 m l （ 40% ）（现加）溴酚蓝 0.001% 10 m l （ 1% 溴酚蓝）MilliQ 水 定容至 10ml分装成 10 小管，每小管 1ml ， -20 ℃冰箱保存。2、水化上样缓冲液（ II ）:尿素 7M 4.2g硫脲 2M 1.52gCHAPS 4% 0.4gDTT 65mM 0.098g （现加）Bio-Lyte 0.2%(w/v) 50 m l （ 40% ）（现加）溴酚蓝 0.001% 10 m l （ 1% 溴酚蓝）MilliQ 水 定容至 10ml分装成 10 小管，每小管 1ml ， -20 ℃冰箱保存。3、水化上 ...

Rice proteomics: Current status and future perspectivesElectrophoresis 2003, 24, 3378-3389Randeep Rakwal, Ganesh Kumar AgrawalRice, the first cereal crop genome to be decoded, has attracted the attention of researchers worldwide because of its immense socio-economic impact ...

1. 如何选用透析/超滤膜？ （这个问题很多人问过:D）Dialysis membranes are available in a number of thicknesses and pore sizes. Thicker membranes are tougher, but restrict solute flow and reach equilibrium more slowly. Pore size is defined by “molecular weight cutoff” (MWCO)—i.e., the size of the smallest partic ...

借问一个问题---定量很低浓度的蛋白请教一个问题:各位朋友：我用一篇文章中介绍的BCA微量法测定微量蛋白浓度,结果发现其漏了一项NaHCO3 于是加入相应量的NaHCO3, 结果线性关系还是不好, 而且不稳定, 所以想找原始文献, 但我一直找不到原始文献:不知那位用过这种方法请指点指点，或者手头有这篇文献提供参考, 谢谢！Schoel, B., Welzel, M., and Kaufmann, S. H. E. (1995) Quantification of protein in dilute and ...

In this protocol, the concentration of a substance of interest in a sample is determined by Enzyme-Linked Immunosorbant Assay (ELISA). Antigen and the substance will compete for specific antibodies. Concentration can be determined by comparison of the blocking effect on plates of antig ...

http://www.protocol-online.org/一个非常棒的实验技术资料提供网址。版面清晰，一目了然，内容丰富，各方面的生物学实验技术均有权威的PROTOCOL提供。主要内容如下：Animal TechniquesPathology, SurgeryBiochemistryAmino Acids & Protein, Lipid...BioinformaticsDatabase Search, Sequence Analysis...Cell ...

Kosmotropes and ChaotropesThe terms 'kosmotrope' (order-maker) and 'chaotrope' (disorder-maker) originally denoted solutes that stabilized, or destabilized respectively, proteins and membranes. Later they referred to the apparently correlating property of increa ...

Protocols 1In-gel Digestion of Coomassie Stained Proteins(No Reduction/Alkylation)Always wear gloves and work in the hood to reduce keratin contamination.Excise gel bands or spots.It is highly recommended that a positive and negative control be conducted in parallel to all analy ...

刚读到一片essay。觉得很有意思。”没有什么比生物医学研究令人更激动人心，或者说对社会更有利了。但具有讽刺意味的是，从来没有比现在更难成为一位生物医学研究工作者。“Jonathan W. Yewdell （他培养了至少13个PI）用这个开始了他对年轻科学家的指导。Biomedical research has never been more intellectually exciting or practically important to society. Iron ...

为什么蛋白质是边缘稳定的？以下是一篇文章的Ａbstract:Most globular proteins are marginallystable regardless of size or activity. The mostcommon interpretation is that proteins must bemarginally stable in order to function, and so marginalstability represents the results of positivesel ...

Subcloning NotebookSubcloning is a basic molecular biology procedure used to move inserts from one vector to another. Essentially all subcloning reactions proceed as follows: You release and purify your insert from the parent vector, ligate the insert into a prepared destination vec ...

20种氨基酸的结构与功能特点Glycine1. Gly存在于Pr中一般都有作用，因其容易destabilize Pr2. Contact point of α helices (prior to N-terminus, 因为易形成turn)3. C-cap of α helices4. Flattening of antiparallel β sheets5. Interior of parallel barrels6. Nucleotide binding motifs (GxGxxG)Proline1. 虽然疏水，但是经 ...

核酸、核苷酸的基本换算1．核酸的换算：(1)摩尔数与质量：1 μg 1,000bp DNA = 1.52 pmol1 μg pUC18/19 DNA (2,688bp) = 0.57 pmol1 μg pBR322 DNA (4,361bp) = 0.35 pmol1 μg SV40 DNA (5,243bp) = 0.29 pmol1 μg FX174 DNA (5,386bp) = 0.28 pmol1 μg M13mp18/19 DNA (7.250bp) = 0.21 pmol1 μg l phage DNA (48,502bp) = 0.03 pmol1 pmol 1,000bp DNA = 0.66 μg1 pmol pUC18/19 DNA (2 ...

Peter Järver and Ülo Langel. The use of cell-penetrating peptides as a tool for gene regulation Drug Discovery Today (DDT). 2004, 9(9): 395-402.The use of cell-penetrating peptides as a tool for gene regulationA novel carrier system that originates from membrane shuttling proteins such as the D ...