全部

提取植物总蛋白（以植物花粉为例）：1.三氯乙酸法（TCA）/丙酮(acetone)提取花粉总蛋白质花粉在liquid nitrogen中研磨成粉末，用含10%TCA和1%DTT的acetone沉淀蛋白质，-20度 2个小时(必要时过夜)，4度 25000g离心20min后去上清，用含1%DTT的acetone溶液悬浮沉淀，-20度 1个小时,再次离心去上清，将真空干燥的沉淀在等电聚焦缓冲液中(8M urea，20mmDTT,4%CHAPS,2% ...

植物精油的研究开发新进展张 东 峰（广东轻工职业技术学院食品与生物工程系，广东广州510300）植物精油是一类纯天然的植物提取混合物，化学组成比较复杂。迄今为止，其在食品、医药、果蔬保鲜、日常用品、人体保健等方面得到了广泛的开发和利用。概述了植物精油及其单组分的研究利用新进展。预计不久的将来植物精油在人类生活中必将具有广阔的应用前景。植物精油；食品；抗菌活性；医药保健；研究开发O 685A1003-5095(2008）02-00 ...

Northern blot技术经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳　　这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛－DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳， 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H＋梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率（Miller，1987），但用含朋乙二醛－DMSO的凝胶对RNA进行分级离，通常Northern杂交所显示的 ...

标题:植物蛋白提取试剂植物蛋白提取试剂 P1258Plant total protein extraction kit (cat # P1258)描述：植物蛋白提取试剂适用于多种植物根，茎，叶及果实等的新鲜或冻存组织。植物组织成分复杂，含有较多酚类物质、多糖、色素、次生代谢物质等，致使植物蛋白质的分离提取变得困难和复杂。本试剂采用优化的试剂和程序，能有效提取多种植物中的可溶性和疏水性蛋白成分，有效去除植物组织所含的多酚、多糖、醌、色素、脂质、次生 ...

摘 要3－磷酸甘油醛脱氢酶折叠中间体与分子伴侣GroEL的“半位结合”模式“分子伴侣”的发现和鉴定改变了蛋白质折叠研究的经典概念，开辟了崭新的蛋白质生物合成研究的时代，为解译第二遗传密码并最终全面阐明分子生物学中心法则奠定了基础。分子伴侣功能的研究是蛋白质折叠研究领域中最活跃的前沿，其中分子伴侣与其帮助的靶蛋白之间的识别、相互作用以及解离又是分子伴侣作用机制研究最根本的内容。李剑研究了当前最受注意的分子伴侣Gr ...

摘要在生物学和生物医学中，尤其在制药行业中，蛋白质的体外折叠复性是一个比较棘手的问题。最近利用层析方法复性成为研究的热点，本综述主要介绍层析复性方法的进展。随着基因工程和生物技术的发展，蛋白质克隆与表达已经趋于成熟。在重组蛋白质生产的过程中，目标产物的异源表达容易形成不溶的聚集体，称为“包涵体”。大肠杆菌表达产生包涵体有以下优点：1) 以包涵体形式表达的蛋白质的浓度比较高，有时甚至可以达到细胞总蛋白含量的30% ；2) 如果 ...

在分离分析特别是蛋白质分离分析中，层析是相当重要、且相当常见的一种技术，其原理较为复杂，对人员的要求相对较高，这里只能做一个相对简单的介绍。　　一、 吸附层析　　1、 吸附柱层析　　吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。　　2、 薄层层析　　薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种层析方法。这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸层析操作进行展层。　　3、 聚酰胺薄膜层析　　 ...

近期蛋白质结构研究突破大汇总在过去的9月中有许多影响因子极高的杂志都刊登了许多对蛋白质结构研究的突破，它们各自采用不同的原理，但目的都是攻克行使生物功能的大分子——蛋白质。目前研究蛋白的手段并不多，其中一些如核磁共振做起来即费时，成功率也不高，因为蛋白晶体非常难以获得。在9月18号Nature Structural and Molecular Biology 网络版上发表了一篇由来自加州大学圣地牙哥分校（UCSD）科研人员完成 ...

看到一篇很好的文献，在这里共享一下，希望对做分离纯化的站友有点帮助。来源：http://www.bioon.com/experiment/protein/protein4/200412/86142.html全文：摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法，主要包括高效液相色法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。　　多肽类化合物广泛存在于自然界中，其中对具有一定生物活性的多肽的研究，一直是药物开发的一 ...

1,超声效果判定:a)一般要在超的过程中监测，超几下就做个玻片染色，在你的视野里应该还能看到几个没有破碎的菌才行，没有这样完好的菌存在就说明你超过了，蛋白就会完蛋了。监测几次就有经验了，也不用每次都染就行了。最简单的方法：涂片--革兰氏结晶紫溶液染色0.5分钟---显微镜观察切记：只用结晶紫染色,别忘了染色后再用水稍冲洗一下b)我们的作法是：在第一次使用超声破碎仪时监测OD600以确定功率和时间，取5微升样品加入1毫升 ...

摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法，主要包括高效液相色法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。　　多肽类化合物广泛存在于自然界中，其中对具有一定生物活性的多肽的研究，一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细胞和体液中产生或获得的，生命活动中的细胞分化、神经激素递质调节、肿瘤病变、免疫调节等均与活性多肽密切相关。随着现代科技的飞速发展，从天然产 ...

10月6日 关于三羧酸循环的学习方法。。。我知道学习是没有捷径的，但是前辈们都说三羧酸循环好多要记我是大二从统计学专业转专业到医学检验专业的，还没有有机化学基础不知道，三羧酸循环的记忆要点在哪里，或者该怎么学起呢谢谢前辈们~~！附上百度出来的记忆方法一：糖无氧酵解过程中的“１、２、３、４”4 E' c% d0 D9 i# w; B8 s& U: L　　１：1分子的葡萄糖　　２：经过2个阶段生成乳酸（葡萄糖－－丙酮酸－－乳酸）, q/ {7 undefined o2 n+ n　　此中归纳为：（１）2个阶段；0 v- O7 k7 undefined b! R（２）2个磷酸化（葡萄 ...

北京、上海及其周围的战友们注意了！安玛西亚公司将在上海（9月15日）与北京（9月18日）举办《生物技术下游工艺经验交流会》。到时大家一定要去啊，可是有免费午餐啊。8D8D8D说不定我们还会在上海会场见面呢，来宾中最帅的那个就是我啊，呵呵~~~~:D:D:D(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)以下文字摘自安玛西亚寄给本人的邀请函生物技术下游工艺经验交流会-与多国专家面 ...

不知道是否已经有了0.溴化乙锭（EB）：大家都比较熟悉了。具有强诱变致癌性，使用时一定要戴一次性手套，注意操作规范，不要随便触摸别的物品。1.DEPC(焦碳酸二乙酯):闻起来香香甜甜的,可是害人不眨眼!一种强有力的蛋白质变性剂,而且怀疑是致癌剂.开瓶时将瓶子远离你,内压可导致溅泼.操作时戴合适的手套,穿工作服,并在化学通风橱里进行.2.PMSF(苯甲基磺酰氟):老板说是神经毒!!!是一种**度毒性的胆碱酯酶抑制剂.它对呼吸道黏膜 ...

1. iTRAQ技术原理是什么？多个（每组最多8个）来源不同的蛋白样品经过不同标签标记后，可以合并后同时进行质谱分析。在每个肽段二级质谱图上，相应每个样品的报告离子强度用以表征该蛋白在不同样品中相对含量的高低，而肽段碎片离子可用于蛋白的鉴定分析。是鉴定与定量同时进行的一种定量技术。2. 关于“样品重复”，技术重复和上机重复有什么区别？“样品重复”，也可以称为生物重复。生物重复是指样品来自同一处理组的不同样品，是整个实验的完全 ...

摘要：在细胞的发展过程及其各种重要功能中，可逆的蛋白质磷酸化扮演了重要的角色。我们在做实验的过程中证明蛋白质体外磷酸化的实验经常碰到。在此，我以一种蛋白质激酶为例介绍蛋白质体外磷酸化的方法；同时，谈谈我做这个实验的一点点心得。希望对大家有点帮助。主要试剂：10x磷酸化buffer(200mM tris-HCl PH7.5 ,500mMKCl,100mM MgCl )PBS, 1xSDS电泳缓冲液 6xSDS加样缓冲液（参考精编分子实验指南第 ...

最近在做原核的诱导表达，现对原核表达IPTG诱导原理进行总结，同时在一楼也有一些问题，欢迎大家拍砖！！！乳糖（Lac）操纵子（operator）学说：当葡萄糖和乳糖同时存在时，细菌优先利用葡糖糖，当葡萄糖利用完以后，细菌经历一个生长停滞期，开始利用乳糖，细菌会出现“二次生产曲线”。乳糖操纵子的基因表达受 阻碍蛋白 和 CAP（分解代谢产物的激活蛋白，又称CRP，cAMP receptor protein）的双重调控。乳糖操纵子的结构：其中P ...

对于一个给定的抗原，最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力，以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外，更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超敏感信号底物进行的斑点印迹的操作方法。注：所有的抗体稀释度假定起始浓度为1 mg/mL。1. 用TBS和PBS稀释的蛋白样品，好的稀释方法是由样品中的抗原稀释浓度决定的，但是由于抗原 ...

甲基化是目前的研究热点，就我所做的一点工作并其中一点心得，与大家分享。希望能够对大家有所帮助。第一部分 基因组DNA的提取。这一步没有悬念，完全可以购买供细胞或组织使用的DNA提取试剂盒，如果实验室条件成熟，自己配试剂提取完全可以。DNA比较稳定，只要在操作中不要使用暴力，提出的基因组DNA应该是完整的。此步重点在于DNA的纯度，即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者 ...

2004年3月18日，世界上最具权威性的著名杂志《自然》以主题论文的方式发表了由中国科学院生物物理所、植物研究所合作完成的 “菠菜主要捕光复合物(lhc-ii)2.72 ?分辨率的晶体结构” 研究成果。该晶体的结构彩图被选作本期杂志的封面照片。光合作用机理一直是国际上长盛不衰的研究热点，lhc-ii是绿色植物中含量最丰富的主要捕光复合物。这一复合物是由蛋白质分子、叶绿素分子、类胡萝卜素分子和脂类分子所组成的一个复杂分子体系， ...