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1,超声效果判定:a)一般要在超的过程中监测，超几下就做个玻片染色，在你的视野里应该还能看到几个没有破碎的菌才行，没有这样完好的菌存在就说明你超过了，蛋白就会完蛋了。监测几次就有经验了，也不用每次都染就行了。最简单的方法：涂片--革兰氏结晶紫溶液染色0.5分钟---显微镜观察切记：只用结晶紫染色,别忘了染色后再用水稍冲洗一下b)我们的作法是：在第一次使用超声破碎仪时监测OD600以确定功率和时间，取5微升样品加入1毫升 ...

摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法，主要包括高效液相色法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。　　多肽类化合物广泛存在于自然界中，其中对具有一定生物活性的多肽的研究，一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细胞和体液中产生或获得的，生命活动中的细胞分化、神经激素递质调节、肿瘤病变、免疫调节等均与活性多肽密切相关。随着现代科技的飞速发展，从天然产 ...

10月6日 关于三羧酸循环的学习方法。。。我知道学习是没有捷径的，但是前辈们都说三羧酸循环好多要记我是大二从统计学专业转专业到医学检验专业的，还没有有机化学基础不知道，三羧酸循环的记忆要点在哪里，或者该怎么学起呢谢谢前辈们~~！附上百度出来的记忆方法一：糖无氧酵解过程中的“１、２、３、４”4 E' c% d0 D9 i# w; B8 s& U: L　　１：1分子的葡萄糖　　２：经过2个阶段生成乳酸（葡萄糖－－丙酮酸－－乳酸）, q/ {7 undefined o2 n+ n　　此中归纳为：（１）2个阶段；0 v- O7 k7 undefined b! R（２）2个磷酸化（葡萄 ...

北京、上海及其周围的战友们注意了！安玛西亚公司将在上海（9月15日）与北京（9月18日）举办《生物技术下游工艺经验交流会》。到时大家一定要去啊，可是有免费午餐啊。8D8D8D说不定我们还会在上海会场见面呢，来宾中最帅的那个就是我啊，呵呵~~~~:D:D:D(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)(y)以下文字摘自安玛西亚寄给本人的邀请函生物技术下游工艺经验交流会-与多国专家面 ...

不知道是否已经有了0.溴化乙锭（EB）：大家都比较熟悉了。具有强诱变致癌性，使用时一定要戴一次性手套，注意操作规范，不要随便触摸别的物品。1.DEPC(焦碳酸二乙酯):闻起来香香甜甜的,可是害人不眨眼!一种强有力的蛋白质变性剂,而且怀疑是致癌剂.开瓶时将瓶子远离你,内压可导致溅泼.操作时戴合适的手套,穿工作服,并在化学通风橱里进行.2.PMSF(苯甲基磺酰氟):老板说是神经毒!!!是一种**度毒性的胆碱酯酶抑制剂.它对呼吸道黏膜 ...

1. iTRAQ技术原理是什么？多个（每组最多8个）来源不同的蛋白样品经过不同标签标记后，可以合并后同时进行质谱分析。在每个肽段二级质谱图上，相应每个样品的报告离子强度用以表征该蛋白在不同样品中相对含量的高低，而肽段碎片离子可用于蛋白的鉴定分析。是鉴定与定量同时进行的一种定量技术。2. 关于“样品重复”，技术重复和上机重复有什么区别？“样品重复”，也可以称为生物重复。生物重复是指样品来自同一处理组的不同样品，是整个实验的完全 ...

摘要：在细胞的发展过程及其各种重要功能中，可逆的蛋白质磷酸化扮演了重要的角色。我们在做实验的过程中证明蛋白质体外磷酸化的实验经常碰到。在此，我以一种蛋白质激酶为例介绍蛋白质体外磷酸化的方法；同时，谈谈我做这个实验的一点点心得。希望对大家有点帮助。主要试剂：10x磷酸化buffer(200mM tris-HCl PH7.5 ,500mMKCl,100mM MgCl )PBS, 1xSDS电泳缓冲液 6xSDS加样缓冲液（参考精编分子实验指南第 ...

最近在做原核的诱导表达，现对原核表达IPTG诱导原理进行总结，同时在一楼也有一些问题，欢迎大家拍砖！！！乳糖（Lac）操纵子（operator）学说：当葡萄糖和乳糖同时存在时，细菌优先利用葡糖糖，当葡萄糖利用完以后，细菌经历一个生长停滞期，开始利用乳糖，细菌会出现“二次生产曲线”。乳糖操纵子的基因表达受 阻碍蛋白 和 CAP（分解代谢产物的激活蛋白，又称CRP，cAMP receptor protein）的双重调控。乳糖操纵子的结构：其中P ...

对于一个给定的抗原，最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力，以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外，更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超敏感信号底物进行的斑点印迹的操作方法。注：所有的抗体稀释度假定起始浓度为1 mg/mL。1. 用TBS和PBS稀释的蛋白样品，好的稀释方法是由样品中的抗原稀释浓度决定的，但是由于抗原 ...

甲基化是目前的研究热点，就我所做的一点工作并其中一点心得，与大家分享。希望能够对大家有所帮助。第一部分 基因组DNA的提取。这一步没有悬念，完全可以购买供细胞或组织使用的DNA提取试剂盒，如果实验室条件成熟，自己配试剂提取完全可以。DNA比较稳定，只要在操作中不要使用暴力，提出的基因组DNA应该是完整的。此步重点在于DNA的纯度，即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者 ...

2004年3月18日，世界上最具权威性的著名杂志《自然》以主题论文的方式发表了由中国科学院生物物理所、植物研究所合作完成的 “菠菜主要捕光复合物(lhc-ii)2.72 ?分辨率的晶体结构” 研究成果。该晶体的结构彩图被选作本期杂志的封面照片。光合作用机理一直是国际上长盛不衰的研究热点，lhc-ii是绿色植物中含量最丰富的主要捕光复合物。这一复合物是由蛋白质分子、叶绿素分子、类胡萝卜素分子和脂类分子所组成的一个复杂分子体系， ...

验室有毒物质介绍和防护注意事项申请加分乙酸(浓)必须非常小心地操作。可能由于吸入或皮肤吸收而受到伤害。要戴合适的手套和护目镜。在化学通风橱\生物安全柜里使用。·乙腈是非常易挥发和特别易燃的，它是一种刺激物和化学窒息剂，可因吸入、咽下或皮肤吸收而发挥其效应。严重中毒的病人可按氰化物中毒方式处理。操作时要戴合适的手套和安全眼镜。只能在通风橱\生物安全柜里使用，远离热、火花和明火。·丙烯酰胺(未聚合的)是一种强的神经毒剂并 ...

ftp上的pdquest，下载后才知道是只能用basic mode，很多功能是受到限制的，不知道哪位大侠有它的patch，供大家共享呀！此外，有pdquest的教学东东，申请上传！大概有180M。下面是一个简介：PDQUEST Tutorial Read MeIf the CD-ROM fails to auto-start, open the root directory of the CD using Windows Explorer and double-click on the RunTutori ...

J AM SOC NEPHROL7.689EUR UROL7.667KIDNEY INT6.193AM J KIDNEY DIS5.152J SEX MED4.884CLIN J AM SOC NEPHRO4.884J UROLOGY4.016CURR OPIN NEPHROL HY3.961AM J PHYSIOL-RENAL3.731AM J NEPHROL3.481SEMIN DIALYSIS3.366NEPHROL DIAL TRANSPL3.306PROSTATE3.081BJU INT2.865SEM ...

今天进行了GST融合蛋白的表达，pGEX-4T-1载体,BL21菌。步骤：摇菌至A600：0.7，然后加IPTG诱导3小时，温度35度（终浓度：0.3mM)，取1ml诱导后菌，离心去培养基，冰冷PBS洗一次，离心，吸净液体，加入undefined上样缓冲液50微升和终浓度1mM PMSF，100度煮菌5分钟，离心，取20微升上清跑胶。结果如图。1.空载体对照有GST的表达2.所有重组载体同样有GST大小的片断，（箭头 B）3.箭头A所示的条带在空载体 ...

Heparin-Sepharose Precipitation and ImmunoblottingTo analyze for CTGF protein expression, conditioned media were collected and the heparin-binding proteins were precipitated by end-over-end mixing for 4 h at 4°C with heparin-Sepharose CL-6B beads from Pharmacia (Piscata ...

09新书：Food Chemistry,4ed. PDFH.-D. Belitz, Werner Grosch, Peter Schieberle "Food Chemistry,4 Ed."Springer | 2009-02-01 | ISBN: 3540699333 | 1117 pages | PDF | 11,5 MBFor more than two decades, this work has remained the leading advanced textbook and easy-to-use reference on food chemistry and te ...

本内容需要回复后才能下载！本书版权归作者所有，请于下载后24小时内删除图解生物化学（英文版）Harper's Illustrated Biochemistry(26thAnnotation UP TO DATE, SUCCINCT, AND MEDICALLY RELEVANTHarper's Biochemistry offers concise yet authoritative coverage of the principles of biochemistry and molecul ...

Publisher: CRCNumber Of Pages: 768Publication Date: 2005-07-27Sales Rank: 614384ISBN / ASIN: 0824754662EAN: 9780824754662Binding: HardcoverManufacturer: CRCStudio: CRCAverage Rating: 5Total Reviews: 1--------------------------------------------------------------------------------Book D ...

Top 100 proteomics publications----From Ion Channel Media Group：ttp://www.ionchannelmedia.com/websites.php1. Gavin et al. (2006) Proteome survey reveals modularity of the yeastcell machinery. Nature2. Bonetta et al. (2006) Protein purification: proteomics at Harvard. Na ...