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问题 可能原因验证或解决办法1 转膜不充分 膜没有完全均匀湿透； 使用100% methanol浸透膜 靶蛋白分子量小于10,000； 选择小孔径的膜，缩短转移时间 靶蛋白等电点等于或接近转移缓冲液pH值； 可尝试使用其他缓冲液如CAPS缓冲液（pH 10.5)或使用低pH值缓冲液如乙酸缓冲液 甲醇浓度过高； 过高甲醇浓度会导致蛋白质与SDS分离，从而沉淀在凝胶中，同时会使凝胶收缩或变硬，从而抑制高分子量蛋白的转移。降低甲醇浓度或者使用乙醇或异丙醇代替 转移时间 ...

http://www.helixnet.cn/bbs/thread-394-1-2.html 酵母表达系统最新研究进展郑立运1 ,方先珍2(1. 中国科学院武汉病毒研究所,湖北武汉430071; 2. 河南省畜牧局兽医防治站,河南郑州450002 )中图分类号816　　　文献标识码:A　　　文章编号: 1008 - 3111 (2005) 04 - 0250 - 04　　分子生物学技术的发展为利用生物反应器生产外源蛋白提供了许多方法和手段。到目前为止,已发展出了大肠杆菌、酵母、昆虫、哺乳动物细胞等多种 ...

我最近在网上看到有公司在ELISA试剂盒的促销,好划算啊我想把这个好消息,好资源与大家分享几年来，博士德的ELISA试剂盒以优良的品质、卓越的性价比和良好的售后服务受到广大科研工作者的青睐。更因其品种齐全、操作简单、检测时间短、所需样品少而成为细胞因子检测的经典产品。公司生产的近270多种 ELISA 试剂盒，涉及分子生物学、分子免疫学、细胞生物学等生命科学研究的各个领域。公司总部位于武汉，代理商经销商遍及全国各地，形 ...

一、原核蛋白表达及纯化1、怎样提高E.coli中6′His标签蛋白的表达水平？6 × His标签蛋白的表达水平低原因可能为：目标蛋白有毒或不稳定，或者是细菌生长过程中不能维持表达结构。有时候，插入片段的5’端序列编码了干扰转录或翻译的元件（比如有反向重复序列而形成茎环结构，掩盖了Shine-Dalgarno序列），在这种情况下，有必要检查和修改表达序列。改变培养基和宿主菌也可能会有所帮助。外源性蛋白的表达会使宿主菌生长迟缓 ...

人体八种必须氨基酸（第一种较为顺口）1.“一两色素本来淡些”（异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、缬氨酸）。2.“写一本胆量色素来”（缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、赖氨酸）。3.鸡旦酥，晾（亮）一晾（异亮），本色赖。借来一两本淡色书。生糖、生酮、生糖兼生酮氨基酸：生酮+生糖兼生酮=“一两色素本来老”（异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、酪氨酸），其中生酮氨基酸为“亮赖”；除了这7个氨 ...

Allen He/何小姐，颂安！我是武汉的一位生物学科研人员，上次在水生所参加过一次您主讲的pet系统讲座，及其相关的内容，并且获得了会上派送的资料，非常感谢，novagen的这本册子对我帮助很大，感谢merck生化组，还有您何小姐给中国生物学工作者所作的努力！那天我在会上问到一个关于kan抗性机理的问题，我说的是kan基因编码一种磷酸转移酶，此酶将磷酸基团转移给卡那霉素，而使之灭活。我的问题是，这种磷酸转移酶是否像 ...

来论坛好长时间了，陆陆续续回复了一些帖子，可是回来回去，发现大家提的问题，还是那几个，看过很多总结经验的帖子，要么抄书本，要么人云亦云，缺乏自己的东西，新手参考这些当然难获进益。本人把自己多年的Western blotting实践经验整理一下，欢迎行家批评指正。首先，摆摆自己的经验。鄙人做WB有8、9年了，平均下来两天跑一张多的蛋白胶；文章嘛，凑数的单篇有上24+，一作单篇15+（系国内完成）其次，由于一些机缘的因素，在实验 ...

浏览资源细胞生物学 -- 细胞分子生物学资源列表 (1到10 共96条):休士顿大学生物和生物化学系这是休士顿大学生物和生物化学系的主页。该系有三个专业——生物化学，细胞和分子生物学，生态学和进化。该主页介绍了该系的一些基本情况、教师的研究情况、学生的学习生活、研究环境以及一些友好网站的连接。http://www.bchs.uh.edu 详细资料分子细胞这是著名的杂志的网站，收录细胞分子生物学相关论著，通过免费注册后可以免费看该杂志的文摘 ...

【专家讲座】GE公司於莉女士《定量蛋白质印迹实验的最优化方法》http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=10362930&sty=1&tpg=1&age=01、yaplewang wrote:於莉老师您好，我是丁香园会员yaplewang，我对于您的这次讲座很感兴趣。众所周知，免疫印迹进行蛋白质检测中最后条带结果的检测的可靠性一向备受关注，丁香园蛋白版的不少战友也讨论过这个问题。既往认为 ...

按：6年前的报道或许有点过时，但欣闻公司在发展壮大，业绩蒸蒸日上，很为他们高兴，也祝愿这家公司继续发展，再创佳绩，能在蛋白组和抗体，诊断研究中，显示其独特的地位和作用张维维和他的“金”鸡蛋。(李乔琚摄)http://tech.sina.com.cn/it/m/2002-05-30/118117.shtml　　人类基因图谱草图的制成，宛如天书有了字典，位于人杰地灵的圣地亚哥著名的生物科技区拉荷亚(La Jolla)的基因纬(GenWay)公司 ...

博苑蛋白双向电泳、DIGE、色谱、质谱、Mascot培训讲座（第三轮通知）自从1977年，人类完成第一个物种-噬菌体的全基因组测序以来，目前已经顺利完成了成千上万个物种的全基因组测序。虽然基因组测序获得了巨大进展，但人类对基因组的深入解读才刚刚开始。蛋白质是基因功能的执行者，蛋白质组学是功能基因组学的重要组成部分、是解读基因组的必经之路。以双向电泳、色谱和质谱为代表的经典实验技术在蛋白质组学研究中扮演着重要角色。 ...

临床微生物学诊断与图解(第二版)作　者： 周庭银出版社：上海科技日　期：2007年6月开　本：16 版　次：1页　数：491页装　帧：精装ISBN　：7532388514【作者简介】：周庭银 1951年12月出生，江苏省阜宁县人。现任第二军医大学长征医院实验诊断科主任技师。 从事临床微生物检验及科研工作30余年，在临床微生物鉴定方面积累了丰富的经验，尤其是对疑难菌、少见菌株鉴定的研究有独到之处。在国内首次发现卫星状链球菌(软弱乏养菌)、星座链球菌、霍利斯弧菌、拟态 ...

基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA，一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然，不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质，一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的蛋白质称为蛋白质组(proteome)。同理，不同细胞在不同生理或病理状态下所表达的蛋白质的种类也不尽相同。蛋白 ...

转萜 觉得 这篇文章不错 介绍给大家 一起分享作者：佚名摘要：蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质，综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异，利用一种同时多种性质差异，在兼顾收率和纯度的情况下，选择蛋白质提纯的方法。关键词：蛋白质 分离纯化前言蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂的混合物形式存在，每种类型的细胞都含有成千种不同的蛋白质。蛋白质的分离和提纯工作是一项 ...

柱层析技术常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。柱子可以分为：加压，常压，减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉 ...

微阵列技术在单个实验中能同时分析数千个参数。捕获分子微点在固体支持物上固定成行列并暴露在含相应结合分子的样品中。基于荧光、化学发光、质谱、放射性或电化学的读出系统能检测每个微点形成的复合物。这些微小化和平行的结合分析高度灵敏，方法的分析能力又能被微阵列基因表达分析所放大。在这些系统中，检测固定的DNA探针的微阵列与互补靶分子的杂交程度。最近在蛋白质微阵列领域中的发展展示了它在酶-底物、DNA-蛋白质和不同类型 ...

文章标题：蛋白质技术：一篇关于衣原体对我影响很深的文章。作者：Klein M, Kotz A, Bernardo K, Kronke M.文题：Detection of Chlamydia pneumoniae-specific antibodies binding to the VD2 and VD3 regions of the major outer membrane protein.杂志全名（或缩写）：J Clin Microbiol.年份，卷(期)：2003 May;41(5)起止页码：1957-62摘要及翻译：Ab ...

免疫胶体金的制备一 胶体金的制备和特性（一）胶体金的结构胶体金（colloidalgold）也称金溶胶（goldsol），是由金盐被还原成原金后形成的金颗粒悬液。胶体金颗粒由一个基础金核（原子金Au）及包围在外的双离子层构成，紧连在金核表面的是内层负离子（AuC12－），外层离子层H+则分散在胶体间溶液中，以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。胶体金颗粒的基础金核并非是理想的圆球核，较小的胶体金颗粒基本是圆球形的，较大的胶 ...

蛋白质质谱分析研究进展作者：汪福源摘 要：　随着科学的不断发展，运用质谱法进行蛋白质的分析日益增多，本文简要综述了肽和蛋白质等生物大分子质谱分析的特点、方法及蛋白质质谱分析的原理、方式和应用，并对其发展前景作出展望。关键词： 蛋白质，质谱分析，应用前言：蛋白质是生物体中含量最高，功能最重要的生物大分子，存在于所有生物细胞，约占细胞干质量的50%以上， 作为生命的物质基础之一，蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入 ...

尿嘧啶糖苷酶的表达与纯化做完taq酶的表达与纯化接着就做ung酶的表达与纯化，虽然刚刚做完taq酶的表达，但还是花了两个星期才做好ung酶的表达与纯化，把实验中的心得写出来，希望对大家有所帮助。1：蛋白表达的实验前准备，确认原材料的来源与实验用水的洁净度，认真的配好每一种试剂，设计好实验方案。2：上NCBI查找基因序列，确认ung酶基因在大肠杆菌K12菌株基因组的58.4min。总长度为690bp，所表达蛋白大 ...