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如何选择凝胶当目标蛋白的物理特性如分子量、等电点等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同pH缓冲液的试管中，可简单地测出pI, 并确定纯化用缓冲液的最佳pH。选择层析方法在对目标蛋白的特性或样品成分不太了解，可尝试几种不同的纯化方法：一、使用最通用的凝胶过滤方法，选择分离范围广泛的介质如Superose、Seph ...

冷泉港有一本很经典的书，叫《蛋白质纯化与鉴定实验指南》。其中的附录7给出了用亚氨基乙二酸（铁螯合）Sepharose 6B分离磷酸肽的方法。后面有2篇参考文献，最重要的那篇因为发表时间太久远了（Muszynska, G., L. Andersson, and J. Porath. 1986. Selective adsorption of phosphoproteins on gel-immobilizedferric chelate. Biochemistry 25:6850-68 ...

北京xx生物医学科技有限公司蛋白质纯化介质选购指南一、生物大分子色谱纯化方法的选择思路通常在做纯化前对自己的目标物质特性了解越多对纯化将会越有利，如果不太了解，也可以通过电泳知道目标物质和杂质的情况，找到一种简单的鉴定方法，此外在纯化前必须先建立可靠的活性测定的方法。如果是未知的蛋白，那么通常可以有几种简单的摸索：1.凝胶过滤色谱。这个方法很常用，但是效率不高，对低浓度的样品没有富集作用，上样量小。2.离子交换 ...

一，写在前面作为一个有着3年以上丁香龄的老人，一直只看不发帖 ，从园子里的大神那里学到了很多，小硕毕业后从事蛋白质组学和修饰蛋白质组学相关市场推广和学术交流工作，环顾园子，针对蛋白质组学和修饰蛋白质组学进行全面讲解的帖子基本没有，少数还是6-7年前的，技术已经很落后了。为能和志同道合的园友们相互促进相互学习，也丰富丁香园的科学交流，特立此贴，针对蛋白质组学特别是修饰蛋白质学方面进行一些概述。二，行业背景 人类基因组的解 ...

感谢您对蛋白版的支持。不过请在标题中注明“转帖”。skykiller梯度凝胶电泳梯度凝胶电泳也通常采用聚丙烯酰胺凝胶，但不是在单一浓度（孔径）的凝胶上进行，而是形成梯度凝胶。从凝胶顶部到底部丙烯酰胺的浓度呈梯度变化，如通常顶部凝胶浓度为5％，底部凝胶浓度为25％。凝胶梯度是通过梯度混合器形成的，高浓度的丙烯酰胺溶液首先加入到玻璃平板中，而后溶液浓度呈梯度下降，因此在凝胶的顶部孔径较大，而在凝胶的底部孔径较小。梯度凝 ...

“蛋白质组学—从基础到应用”专题研讨会—— 慕尼黑上海分析生化展同期活动系列时间：2008年9月23-24日地点：上海新国际博览中心主办单位：随着被誉为解读人类生命“天书”的人类基因组计划的成功实施，人类对生命本质的认识达到前所未有的深度，但基因组图中绝大部分基因及功能目前仍然处于未知状态，需要从蛋白质水平予以解释。以研究一种细胞、组织或完整生物体所拥有的全套蛋白质为特征的蛋白质组学自然就成为功能基因组学中的“中流砥 ...

复旦、中科院、中山医、北京医科大学生化试题（题有些老，但是很有用的，申请加点分!!XIEXIE)Sample TextSample TextSample Text生物化学试题复旦大学医学院硕士生生物化学（专基）试题（2001）一、名词解释1、DNA和CDNA2、亮AA拉链3、限制性内切酶4、巴斯德效应5、肽单元6、Ribozyme7、酮体8、结合型胆酸9、内含子和外显子10、氧化磷酸化二、问答题1、胰岛素降低血糖的机制。2、血氨的来源及 ...

蛋白质质功能预测 发信人: palomino (~快马加鞭~), 信区: Bioinformatics标 题: 蛋白质质功能预测发信站: 北大未名站 (2003年06月12日02:41:51 星期四), 转信───────────────────────────────────────作者 kingsyl (智者不惑,勇者不惧), 信区: Bioinformatics标题 蛋白质质功能预测时间 北大未名站 (2003年06月06日10:09:54 星期五), 站内信件─────────────────────────────────────── Global protein func ...

蛋白质专家巡回演讲——成都站本年度GE（通用电气）下属的Lifesciences（生命科学部）邀请了来自GE Healthcare总部的几位具有10-30年工作经验的专家讲述蛋白质纯化中的策略和技巧，内容覆盖从蛋白质组研究到蛋白质纯化、蛋白质鉴定和功能研究等等。本次巡回演讲共四站：上海，成都，香港和台北。本人有幸亲临现场聆听了他们的演讲，虽然大部分是英文，听着有点“晕”，但是他们对工作的那种敬业和执着的精神令我深受感动！ ...

问题 可能原因验证或解决办法1 转膜不充分 膜没有完全均匀湿透； 使用100% methanol浸透膜 靶蛋白分子量小于10,000； 选择小孔径的膜，缩短转移时间 靶蛋白等电点等于或接近转移缓冲液pH值； 可尝试使用其他缓冲液如CAPS缓冲液（pH 10.5)或使用低pH值缓冲液如乙酸缓冲液 甲醇浓度过高； 过高甲醇浓度会导致蛋白质与SDS分离，从而沉淀在凝胶中，同时会使凝胶收缩或变硬，从而抑制高分子量蛋白的转移。降低甲醇浓度或者使用乙醇或异丙醇代替 转移时间 ...

http://www.helixnet.cn/bbs/thread-394-1-2.html 酵母表达系统最新研究进展郑立运1 ,方先珍2(1. 中国科学院武汉病毒研究所,湖北武汉430071; 2. 河南省畜牧局兽医防治站,河南郑州450002 )中图分类号816　　　文献标识码:A　　　文章编号: 1008 - 3111 (2005) 04 - 0250 - 04　　分子生物学技术的发展为利用生物反应器生产外源蛋白提供了许多方法和手段。到目前为止,已发展出了大肠杆菌、酵母、昆虫、哺乳动物细胞等多种 ...

我最近在网上看到有公司在ELISA试剂盒的促销,好划算啊我想把这个好消息,好资源与大家分享几年来，博士德的ELISA试剂盒以优良的品质、卓越的性价比和良好的售后服务受到广大科研工作者的青睐。更因其品种齐全、操作简单、检测时间短、所需样品少而成为细胞因子检测的经典产品。公司生产的近270多种 ELISA 试剂盒，涉及分子生物学、分子免疫学、细胞生物学等生命科学研究的各个领域。公司总部位于武汉，代理商经销商遍及全国各地，形 ...

一、原核蛋白表达及纯化1、怎样提高E.coli中6′His标签蛋白的表达水平？6 × His标签蛋白的表达水平低原因可能为：目标蛋白有毒或不稳定，或者是细菌生长过程中不能维持表达结构。有时候，插入片段的5’端序列编码了干扰转录或翻译的元件（比如有反向重复序列而形成茎环结构，掩盖了Shine-Dalgarno序列），在这种情况下，有必要检查和修改表达序列。改变培养基和宿主菌也可能会有所帮助。外源性蛋白的表达会使宿主菌生长迟缓 ...

人体八种必须氨基酸（第一种较为顺口）1.“一两色素本来淡些”（异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、缬氨酸）。2.“写一本胆量色素来”（缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、赖氨酸）。3.鸡旦酥，晾（亮）一晾（异亮），本色赖。借来一两本淡色书。生糖、生酮、生糖兼生酮氨基酸：生酮+生糖兼生酮=“一两色素本来老”（异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、酪氨酸），其中生酮氨基酸为“亮赖”；除了这7个氨 ...

Allen He/何小姐，颂安！我是武汉的一位生物学科研人员，上次在水生所参加过一次您主讲的pet系统讲座，及其相关的内容，并且获得了会上派送的资料，非常感谢，novagen的这本册子对我帮助很大，感谢merck生化组，还有您何小姐给中国生物学工作者所作的努力！那天我在会上问到一个关于kan抗性机理的问题，我说的是kan基因编码一种磷酸转移酶，此酶将磷酸基团转移给卡那霉素，而使之灭活。我的问题是，这种磷酸转移酶是否像 ...

来论坛好长时间了，陆陆续续回复了一些帖子，可是回来回去，发现大家提的问题，还是那几个，看过很多总结经验的帖子，要么抄书本，要么人云亦云，缺乏自己的东西，新手参考这些当然难获进益。本人把自己多年的Western blotting实践经验整理一下，欢迎行家批评指正。首先，摆摆自己的经验。鄙人做WB有8、9年了，平均下来两天跑一张多的蛋白胶；文章嘛，凑数的单篇有上24+，一作单篇15+（系国内完成）其次，由于一些机缘的因素，在实验 ...

浏览资源细胞生物学 -- 细胞分子生物学资源列表 (1到10 共96条):休士顿大学生物和生物化学系这是休士顿大学生物和生物化学系的主页。该系有三个专业——生物化学，细胞和分子生物学，生态学和进化。该主页介绍了该系的一些基本情况、教师的研究情况、学生的学习生活、研究环境以及一些友好网站的连接。http://www.bchs.uh.edu 详细资料分子细胞这是著名的杂志的网站，收录细胞分子生物学相关论著，通过免费注册后可以免费看该杂志的文摘 ...

【专家讲座】GE公司於莉女士《定量蛋白质印迹实验的最优化方法》http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=10362930&sty=1&tpg=1&age=01、yaplewang wrote:於莉老师您好，我是丁香园会员yaplewang，我对于您的这次讲座很感兴趣。众所周知，免疫印迹进行蛋白质检测中最后条带结果的检测的可靠性一向备受关注，丁香园蛋白版的不少战友也讨论过这个问题。既往认为 ...

按：6年前的报道或许有点过时，但欣闻公司在发展壮大，业绩蒸蒸日上，很为他们高兴，也祝愿这家公司继续发展，再创佳绩，能在蛋白组和抗体，诊断研究中，显示其独特的地位和作用张维维和他的“金”鸡蛋。(李乔琚摄)http://tech.sina.com.cn/it/m/2002-05-30/118117.shtml　　人类基因图谱草图的制成，宛如天书有了字典，位于人杰地灵的圣地亚哥著名的生物科技区拉荷亚(La Jolla)的基因纬(GenWay)公司 ...

博苑蛋白双向电泳、DIGE、色谱、质谱、Mascot培训讲座（第三轮通知）自从1977年，人类完成第一个物种-噬菌体的全基因组测序以来，目前已经顺利完成了成千上万个物种的全基因组测序。虽然基因组测序获得了巨大进展，但人类对基因组的深入解读才刚刚开始。蛋白质是基因功能的执行者，蛋白质组学是功能基因组学的重要组成部分、是解读基因组的必经之路。以双向电泳、色谱和质谱为代表的经典实验技术在蛋白质组学研究中扮演着重要角色。 ...