纳米生物技术 活的细胞是造化所赐的天然纳米技术。如今人工纳米技术将为这种天然纳米技术提供辅助。纳米技术好像无处不在,然而,它的全部就是一种基于纳米尺度的技术,由于大分子就是纳米尺度,许多批评者认为它只是一个有趣的化学名词。最先用纳米一词的人是Eric Drexler,当时他是麻省理工大学的一名工程师,并且雄心勃勃。在他1986年写作出版的一本专著中,他极力证明:将来有一天可能会构建具有自我复制功能的纳米机器,这种机器 ...
HPLC 篇1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法样品量不足:解决办法为增加样品量样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器检测器衰减太多:调整衰减即可。检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。检测池中有气泡:解决办法为排气。记录仪测压范围不当:调整电压范围即可。流动相流量不合适:调整流速即可。检测器与记录仪超 ...
Protein Lounge数据库Protein Lounge是系统生物学领域中的领先者。为了帮助生命科学工作者更好的理解系统生物学的复杂性,Protein Lounge已经开发了多个基于互联网的数据库和生物工具软件。系统生物学关注探索细胞间网络以及蛋白质相互作用(包括信号传导,细胞存活和细胞凋亡的机制)其目的是为了更好的发展和鉴别对不同疾病的药物选择。在后基因组时代,基因和蛋白质数据的组织是生命科学工作者最关注的问 ...
摘要 综述了包涵体形成、包涵体分离和溶解、包涵体折叠复性的方法、复性产率低下的主要因素以及通过分子伴侣、低分子量添加物等的应用而提高了蛋白质复性产率。关键词 包涵体 蛋白质 复性Abstract Strategies for decreasing the formation of inclusion bodies, isolation and resolution of inclusion bodies, refolding of inclusion body proteins and the cause of ...
自由基与衰老关系的研究进展随着老龄人口的比率越来越高,阐明衰老的机制,延缓衰老,提高老年生活质量成为日益迫切的要求。自由基在衰老的发生发展中具有重要作用,是衰老机制的研究热点,许多学者对此进行了系统深入的研究,并取得了阶段性进展,本文就此作一综述。1 衰 老1.1衰老的概述:衰老是指生物体发育成熟后,随着年龄的增长,机体在形态、结构、功能方面出现的种种不利变化,如皮肤变薄起皱、色素形成、器官老化、智力下降等,衰老是一种正常的 ...
题目:Protein Identification by Mass Spectrometry: Issues to be Considered出处:MCP Papers in Press. Published on November 6, 2003 as Manuscript R300012-MCP200主要观点、创新点及学术、技术意义:• 文章指出在大量运用蛋白质组技术鉴定蛋白的同时,要探究该技术的可靠性和显著性,急需制定一个运用该技术的规范标准。但由于蛋白质组技术路线和数据处理的多样性 ...
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。电泳技术的基本原理和分类 在电场中,推动带电质点运动的力(F)等于质点所带净电荷量(Q)与电场强度(E)的乘积。F=QE质点的前移同样要受到阻力(F)的影响,对于一个球形质点,服 ...
1.完成western blot实验步骤:一、蛋白样品的提取:1.弃去旧培养基,用PBS清洗2次2.加入胰酶消化,待细胞消化完成后,加入少量培养基终止消化反应3.吸取细胞至离心管中,尽可能完全收集,离心,2500rpm,5min4.弃上清,加1ml PBS清洗,将其移入EP管中,再次离心,2500rpm(13000rpm也可),5min,将残液吸取完全(-80℃冰箱内放置过夜,也可长期保存)5.向每个EP管中加入适量IP裂解液(蛋白酶 ...
中国蛋白质组学第二届学术大会为了迎接第三届国际蛋白质组学大会10月25-28日在我国北京召开,也为了促进我国蛋白质组学研究的向纵深发展,中国生物化学与分子生物学会蛋白质组学专业委员会(筹)和中国人类蛋白质组组织(CHUPO)(筹)会同中国科学院大连化学物理研究所于2004年8月10-12日在辽宁省大连市联合主办中国蛋白质组学第二届学术大会。一、会议安排: 学术大会设有大会报告和分会报告二种形式、大会将邀请有关院士、 ...
一、Western Blot成功要素 与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第 ...
分子伴侣与疾病刘慧萍 柴玉波 陈苏民(第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,西安,710032)摘 要 近十年来,由于分子伴侣的发现和深入研究,使经典的蛋白质折叠“自组装”学说受到挑战。越来越多的研究证实,“辅助性组装学说”更加符合体内蛋白质折叠的特点和途径:即蛋白质多肽链的正确折叠和组装需要其他蛋白质分子的帮助,分子伴侣与折叠酶一起,构成了两种重要的辅助折叠分子。这为揭示生理或病理条件下蛋白质的折叠机理提供了新的研究思路,因 ...
Western blot的原理、操作及注意事项原理:通过电泳区分不同的组分,并转移至固相支持物,通过特异性试剂(抗体)作为探针,对靶物质进行检测,蛋白质的Western印迹技术结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定的特异敏感等多种特点,可检测到低至1~5ng(最低可到10-100pg)中等大小的靶蛋白。一、抗原的选择和制备A:样品的制备1 组织:组织的处理方法:组织洗涤后加入3倍体积预冷的PBS,0℃研磨,加入5×STOP buf ...
Western blot实验是目前进行蛋白质分析最流行和成熟的技术之一,其原理是经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。West ...
蛋白质研究相关技术旧帖整理蛋白质药品冷冻干燥技术研究进展http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=2546179&sty=1&tpg=1&age=0肽电泳资料http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=2597696&sty=1&tpg=1&age=0armersham公司的蛋白质纯化手册http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=6 ...
DNA序列测定技术序列测定的技术和策略Sanger双脱氧链终止法Maxam-Gilbert DNA化学降解法测序策略 目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭,但这两种方法都是同样生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸,每组寡核苷酸都有固定的起点,但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA上的每一个碱 ...
国内做western的实验室现在很多,但是western因为是历时比较长,试剂多,总是出现各种各样的问题,园子里帖子很多,讲述经验的,在这发帖主要是想让大家抒发一些做western的感受以及感觉实验的key point是什么,最容易犯的错误是什么,希望大家踊跃发音,其中附一篇网上及园子里流传很广的一篇文章,希望大家多多跟帖,发表自己的感想这是园子里的一篇帖子,非常欣赏,转过来,希望大家多写写,主要是1 key point 2最 ...
其实研究王晓东的科研思路,发现这个规律是相当明显的,他自己也曾在讲课时提到科研的三板斧,其中的两板斧肯定是:建立体外生化检测系统,用这个系统跟踪蛋白纯化过程。他的过人之处就在于他的实验室能用 100升的细胞,过5,6个column最终纯化得到单一的生化组分。这个毅力有点像那个从几十万个猪脑提取某个激素的故事,他的实验比提激素可能要简单,但是他提取的不是一个,而可能是几个,这几个将细胞调亡线粒体途径阐述得相当干净明了 ...
作者: 圭多·格兰迪出版社: 化学工业出版社出版年: 2006-7页数: 236定价: 40.00元ISBN: 9787502584887内容简介 · · · · · · 疫苗开发是首先得益于基因组学、蛋白质组学和生物信息学等高新技术的诸多领域之一。目前已获得了很多细菌的全基因组序列,并逐步了解了其致病性菌株(与非致病菌株比照)的作用机理,由此研制出的现代疫苗可以针对传统疫苗不能发现的特殊基因产物。本书阐述了疫苗开发领域的最新进展,结合实例详述了研制新型疫苗的不同 ...
蛋白酶抑制剂类生化试剂 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。 PMSF 1 ...
蛋白的复性是一个世界性的难题,没有通用的方法,甚至没有靠得住的规律,只能试。可以参考以下文章。该文出处已经忘了,如果有人知道原创作者或网上出处,请补充。包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性包涵体:包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。包涵体的组成与特性:一般含有50%以上的重组蛋白,其余为核糖体元件、RNA聚合酶、外膜蛋白ompC、ompF和ompA等,环状或缺口的质粒DNA,以及脂体、 ...