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Western－blotting：SDS-PAGE和免疫印迹一：蛋白质的提取1、取出细胞，倒去培养液，用PBS洗涤细胞一次，充分除去PBS液体，把细胞置于冰上。配置细胞裂解液，细胞裂解液用灭菌水配置，然后按照1：100比例加入PMSF混匀，然后按照细胞的多少加入裂解液于培养瓶中，在冰上放置20min。在此期间每隔3-5min摇晃培养瓶，让其充分裂解细胞。2、裂解结束后，吸取裂解液于另一只1.5ml离心管中，于4℃1300 ...

一．开机程序1．检查稳压器电源，打开电源，稳定5分钟。2．打开储液箱，倒掉废液, 并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀，取出鞘液桶，将鞘液桶加至4/5满（一般可用三蒸水，做分选必须用PBS或FACSFlow），合上压力阀。确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。3．将FACSCalibur开关打开，此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY，预热5－10分钟。排出过滤器内的气泡。4．如果需要打印，打开打印机电源。5． ...

一原理：考马斯亮蓝G—250法于1976年由Bradform建立。考马斯亮蓝G—250具有红色和蓝色两种色调，在酸性溶液中，其以游离态存在呈棕红色，当它与蛋白质通过疏水作用结合后，变为蓝色。色素对可见光谱的最大吸收值从465nm转移到595nm处。蛋白质和色素的结合反应很快速，约在2分钟左右的时间内达到平衡，在室温1小时之内是稳定的。在0．01一1.0mg蛋白质／m1范围内，蛋白质含量与A 595值呈正比。二、染液配制 ...

免疫胶体金技术的基本原理胶体金是一种常用的标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。　　1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学，此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法，在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra- ...

单克隆抗体制备技术Burnef（1957）细胞系群选择学说（clonal selection theory）认为，每一个淋巴细胞只具备单一的受体特异性，受到刺激后，只能产生一种针对其可识别的抗原决定簇的抗体；抗体的多样性是由机体遗传存在着能与众多抗原决定簇起反应的淋巴细胞系而决定的；一个祖先抗体形成细胞分裂繁殖而成的细胞系（克隆clone或无性繁殖细胞系）产生的抗体具有完全相同的分子结构和性状；从一个克隆细胞系产生的 ...

一、植物组织蛋白质提取方法1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜，样品制备完成。蛋白质提取液：300ml1、1Mtris-HCl（PH8） 45ml2、甘油（Glycerol）75ml3、聚乙烯吡咯烷酮（Poly ...

Enzymes: A Practical Introduction to Structure, Mechanism, and Data AnalysisBy Robert A. CopelandPublisher: Wiley-VCHNumber Of Pages: 397Publication Date: 2000-03-15Sales Rank: 449250ISBN / ASIN: 0471359297EAN: 9780471359296Binding: HardcoverTotal Reviews: 5Book ...

在蛋白版学习了这么长时间，很感谢各位战友的指导，今天发本书，搜了艘园子里好像没有，也算回报园子里的战友了。书名：Electrophoresis in Practice 4th edition出版公司：WILEY 2005书在56的共享里。邮箱号是：ronan0625@56.com内容：本人水平有限，把目录发一下，最近自己也在看，学习中。感觉这本书内容很全。还有就是这本书很大的特色在于正文旁边都有实验过程的文献出处及疑难解释，很方便。P ...

在园子里讨论RIPA的很多，但仅仅只有最终物质的量浓度，要具体配制时还要换算成质量单位，十分不便。我在网上搜到了相应的改良RIPA的具体配法，希望能够有用。下面的内容将RIPA的基本配方、蛋白酶抑制剂配方以及磷酸酶抑制剂配方分开，对于有机会直接买蛋白酶抑制剂cocktail以及做磷酸化的战友而言十分方便。那样的话只需配制基本配方即可。Preparation of Modifed Radioimmunoprecipita ...

一、《Molecular Cloning 3》英文版，主要介绍分子克隆的基本实验技术操作，新手如果看不明白此版，可以自己买一本军科院翻译的中文版。Table of ContentsChapter 1: Plasmids and Their Usefulness in Molecular CloningChapter 2: Bacteriophage and Its VectorsChapter 3: Working with Bacteriophage M13 VectorsChapter 4: Work ...

好多版块都有无人应助区,但是蛋白版由于各位斑竹较忙,没有开这个帖子,为了减轻他们的负担,我花了点时间,将10-11月份无人应助贴整理了出来,欢迎各位战友来应助!如果斑竹认为不妥的话,请删!11月份无人应助贴http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1989587&sty=1&tpg=5&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1987976& ...

抗体的的保存方法，虽然简单，但是真正知道方法和机理的人可能不多！Tips and hints for the storage of antibodies1.Storage of lyophilized antibodiesAll our products are shipped lyophilized (freeze-dried). Unlabeled antibodies are stable without loss of quality at ambient temperatures for several wee ...

http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=7416901&sty=1&tpg=21&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=7416748&sty=1&tpg=21&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=7414278&sty=1&tpg=21&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/ ...

中文名称：基因八英文名称：GENES VIII发行时间：2004年地区：美国语言：英语共64.1 MB下载地址：http://www.biosunny.com/xiabiaoxiangxi4.asp?ID=12简介：本书适用于分子生物学、分子遗传学及相关课程，是从事生物遗传学、生物化学、细胞生物学、基础医学等专业人员进行科学研究的重要参考书。20年前Benjamin Lewin 的Genes一书从根本上改变了当时分子生物学和分子遗传学 ...

David Whitford, «Proteins: Structure and Function»Wiley | ISBN: 0471498947 | 2005-05-20 | 542 pages | PDF | 31 MbThis text provides a superb introduction to the study of proteins, focusing on their structure and function. It covers the importance of proteins in biochemistry and introduces the co ...

2006诺贝尔生理医学奖授予发现RNA干扰（RNA interference ，RNAi)的Andrew Fire（ Stanford University in Palo Alto, CA）和Craig Mello （University of Massachusetts Medical School）。国际知名杂志Science和 Nature 10月2日同时报道了这一重大消息。Science报道见下连接http://sciencenow.sciencemag.org/br ...

在Youtube上查找的几个WB视频，共享一下，有要做的战友可以参考一下：http://www.youtube.com/watch?v=iUrK9FuMAgs&feature=relatedhttp://www.youtube.com/watch?v=nqspgMGNsrU&feature=related原理讲解http://www.youtube.com/watch?v=SahgDkDSutk Western Blot (1/2)http:/ ...

Genetic Modification of Hematopoietic Stem Cells: Methods and ProtocolsBy Christopher BaumPublisher: Humana PressNumber Of Pages: 490Publication Date: 2008-12-19ISBN-10 / ASIN: 1588299805ISBN-13 / EAN: 9781588299802Binding: HardcoverProduct Description:With ...

蛋白质结构功能区查询与分析：Pfam数据库下面的内容是从Pfam主页直接转贴过来的，大家可能都知道了，做蛋白研究的应该去看看。Pfam is a large collection of multiple sequence alignments and hidden Markov models covering many common protein domains and families. For each family in Pfam you can:1. Look at multiple alignments2. View ...

Wiley ebooks for biotechnologyProtein Crystallography in Drug Discoveryhttp://rapidshare.com/files/56066269/Protein_Crystallography_in_Drug_Discovery.pdfProtein microarray technologyhttp://rapidshare.com/files/56066804/Protein_m ...