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IMPACT™-TWIN 蛋白纯化系统(蛋白单柱亲和纯化、标记及连接)E6950S pdf下载概述:NEB在世界上最早开展内含肽（intein）技术的开发(1)。IMPACTTM 系统是一种新型的蛋白融合表达及纯化系统，能应用到蛋白质工程的许多重要领域(1-11)。IMPACTTM 表达的目的蛋白与蛋白自剪接元件（称为"内含肽"，intein）及几丁质结合蛋白形成融合蛋白, 通过几丁质柱亲和纯化融合蛋白。然后诱导内含肽的肽键裂解活性，在几丁 ...

HPLC培训教程我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表：方法项目数量1985年版1990年版1995年版2000年版HPLC法鉴别934150检查1240160含量测定760117387鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。I．概论一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(statio ...

微板考马斯亮蓝蛋白定量法1. 0.01%考马斯亮蓝液的准备称取10 mg考马斯亮蓝（coomassie brilliant blue，CBB）G-250溶于5 ml 95%的乙醇中，加入85%的磷酸10ml，混匀，作为储存液保存于4℃。使用时取此母液每1.5 ml用双蒸水稀释至10ml即为工作液，应避光保存，一月内用完。若有不溶沉渣宜滤纸过滤后使用。2. 制作标准曲线表1 组织匀浆液蛋白含量测定中标准曲线的制作试管编号 1 2 3 4 5 6 7BSA Conc 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1（mg/ ...

题目： A Dataset of Human Liver Proteins Identified by Protein Profiling via Isotope Coded Affinity Tag (ICAT) and Tandem Mass Spectrometry类别：蛋白质组／表达谱出处：MCP Papers in Press. Published on July 21, 2004 as Manuscript D400001-MCP200主要观点、创新点及学术、技术意义：• 文章以Huh7人肝癌细胞代表转化细胞，以人胎肝原代 ...

蛋白质结构预测 1蛋白质结构预测的方法蛋白质结构预测的目的是利用已知的一级序列来构建出蛋白质的立体结构模型，对蛋白质进行结构预测需要具体问题具体分析，在不同的已知条件下对于不同的蛋白质采取不同的策略，目前预测蛋白质空间结构的方法可以分为两大类：2.1.1分子动力学方法这类方法采用分子力学、分子动力学的方法，根据物理化学的基本原理，从理论上计算蛋白质分子的空间结构，这类理论计算方法依据一个基本热力学假定：一个蛋白 ...

可与SNP相媲美的另一遗传变异指标—CNV(转载)8D（发现这是一个新东西，发上来大家共享）2月9日《Science》一篇文章公布的新发现，将加速人类疾病相关基因的研究。此报道首次在基因组范围内，观测了个体独特的遗传变异导致独特的基因活动形态的机制。文章题目为《Relative Impact of Nucleotide and Copy Number Variation on Gene Expression Phenotypes》。探究变异和疾病的一大挑 ...

摘要 要在一种宿主表达系统中成功表达外源蛋白并获得较高产量，必须要较为全面地了解影响其表达的诸多因素。影响外源基因在巴氏毕赤酵母中表达的因素主要包括：外源基因的特性、表达框的染色体整合位点和方式、宿主菌的甲醇利用表型、基因剂量、分泌信号、产物稳定性和翻译后修饰等。本文就这些因素进行分析，并提出一定的对策和建议。酵母菌是单细胞真核生物，具有生长快、易于遗传操作、能对外源蛋白进行翻译后加工和修饰、不产生有毒产物等特点，被 ...

经本版热心战友提醒，应该给关心本版的战友一个小小的奖励，请进入发帖、得分排行榜的战友跟帖领分，本版版主除外-skykiller。===2009年度本版人气最旺（点击量最多）的前10个帖子===标题: 【原创】western blot问题解答URL: http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=14134558点击: 37460作者: fangweibin119发帖时间: 2009-03-13 09:53:34标题: 【求助】谁 ...

PCR 引物设计及软件使用技巧摘要：本文旨在介绍使用软件设计PCR 引物的技巧。在PCR 引物设计原则的基础上，详细介绍了两种常用引物设计软件的基本使用方法，并对其各自的优缺点进行了比较。一般性引物自动搜索可采用“Premier Primer 5”软件，而引物的评价分析则可采用“Oligo 6”软件。关键词：PCR；引物设计中图分类号：Q524 文献标识码： 文章编号：1自从1985 年Karny Mullis 发明了聚合酶链式反应以来，PCR 技术已成为分子 ...

Western－blotting：SDS-PAGE和免疫印迹一：蛋白质的提取1、取出细胞，倒去培养液，用PBS洗涤细胞一次，充分除去PBS液体，把细胞置于冰上。配置细胞裂解液，细胞裂解液用灭菌水配置，然后按照1：100比例加入PMSF混匀，然后按照细胞的多少加入裂解液于培养瓶中，在冰上放置20min。在此期间每隔3-5min摇晃培养瓶，让其充分裂解细胞。2、裂解结束后，吸取裂解液于另一只1.5ml离心管中，于4℃1300 ...

一．开机程序1．检查稳压器电源，打开电源，稳定5分钟。2．打开储液箱，倒掉废液, 并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀，取出鞘液桶，将鞘液桶加至4/5满（一般可用三蒸水，做分选必须用PBS或FACSFlow），合上压力阀。确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。3．将FACSCalibur开关打开，此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY，预热5－10分钟。排出过滤器内的气泡。4．如果需要打印，打开打印机电源。5． ...

一原理：考马斯亮蓝G—250法于1976年由Bradform建立。考马斯亮蓝G—250具有红色和蓝色两种色调，在酸性溶液中，其以游离态存在呈棕红色，当它与蛋白质通过疏水作用结合后，变为蓝色。色素对可见光谱的最大吸收值从465nm转移到595nm处。蛋白质和色素的结合反应很快速，约在2分钟左右的时间内达到平衡，在室温1小时之内是稳定的。在0．01一1.0mg蛋白质／m1范围内，蛋白质含量与A 595值呈正比。二、染液配制 ...

免疫胶体金技术的基本原理胶体金是一种常用的标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。　　1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学，此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法，在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra- ...

单克隆抗体制备技术Burnef（1957）细胞系群选择学说（clonal selection theory）认为，每一个淋巴细胞只具备单一的受体特异性，受到刺激后，只能产生一种针对其可识别的抗原决定簇的抗体；抗体的多样性是由机体遗传存在着能与众多抗原决定簇起反应的淋巴细胞系而决定的；一个祖先抗体形成细胞分裂繁殖而成的细胞系（克隆clone或无性繁殖细胞系）产生的抗体具有完全相同的分子结构和性状；从一个克隆细胞系产生的 ...

一、植物组织蛋白质提取方法1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜，样品制备完成。蛋白质提取液：300ml1、1Mtris-HCl（PH8） 45ml2、甘油（Glycerol）75ml3、聚乙烯吡咯烷酮（Poly ...

Enzymes: A Practical Introduction to Structure, Mechanism, and Data AnalysisBy Robert A. CopelandPublisher: Wiley-VCHNumber Of Pages: 397Publication Date: 2000-03-15Sales Rank: 449250ISBN / ASIN: 0471359297EAN: 9780471359296Binding: HardcoverTotal Reviews: 5Book ...

在蛋白版学习了这么长时间，很感谢各位战友的指导，今天发本书，搜了艘园子里好像没有，也算回报园子里的战友了。书名：Electrophoresis in Practice 4th edition出版公司：WILEY 2005书在56的共享里。邮箱号是：ronan0625@56.com内容：本人水平有限，把目录发一下，最近自己也在看，学习中。感觉这本书内容很全。还有就是这本书很大的特色在于正文旁边都有实验过程的文献出处及疑难解释，很方便。P ...

在园子里讨论RIPA的很多，但仅仅只有最终物质的量浓度，要具体配制时还要换算成质量单位，十分不便。我在网上搜到了相应的改良RIPA的具体配法，希望能够有用。下面的内容将RIPA的基本配方、蛋白酶抑制剂配方以及磷酸酶抑制剂配方分开，对于有机会直接买蛋白酶抑制剂cocktail以及做磷酸化的战友而言十分方便。那样的话只需配制基本配方即可。Preparation of Modifed Radioimmunoprecipita ...

一、《Molecular Cloning 3》英文版，主要介绍分子克隆的基本实验技术操作，新手如果看不明白此版，可以自己买一本军科院翻译的中文版。Table of ContentsChapter 1: Plasmids and Their Usefulness in Molecular CloningChapter 2: Bacteriophage and Its VectorsChapter 3: Working with Bacteriophage M13 VectorsChapter 4: Work ...

好多版块都有无人应助区,但是蛋白版由于各位斑竹较忙,没有开这个帖子,为了减轻他们的负担,我花了点时间,将10-11月份无人应助贴整理了出来,欢迎各位战友来应助!如果斑竹认为不妥的话,请删!11月份无人应助贴http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1989587&sty=1&tpg=5&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1987976& ...