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质谱在肽和蛋白分析中的应用　　质谱已成为肽和蛋白分析的重要工具，主要归功于一些软电离技术的应用，如电喷雾(ESI)和基体辅助激光解吸电离(MALDI)。生物大分子多为极性、难挥发化合物，不易气化，用传统质谱无法测定。但随着新的离子化技术的广泛应用，现已能高效地电离一些完整或片断的大分子生物聚合物，从而进行质谱测定。本文对质谱在肽和蛋白分析的几个领域中的应用进展进行评述。1　软电离技术1.1　电喷雾电离(ESI)　电喷雾电离利用位于一 ...

试剂配制（一）母液1.0mol/L Tris·HCl Tris (MW121.14) 30.29g蒸馏水 200ml溶解后，用浓盐酸调pH至所需点（见下所示），最后用蒸馏水定容至250ml，高温灭菌后室温下保存。 PH HCl7.4 约17ml7.5 约16m7.6 约15ml8.0 约10ml1.74mg/ml (10mmol/L)PMSF PMSF 0.174g异丙醇 100ml溶解后，分装于1.5ml离心管中，-20℃保存。0.2mol/L NaH2PO4 NaH2PO4（MW119.98） 1 ...

欢迎您的到来。如果您是初访本版，希望如下信息对您有帮助：1、本版是丁香园 “实验技术讨论区” 的一员，以讨论蛋白质相关的实验技术为主旨。您可以提出您的实验疑问，讨论实验方法，介绍基础理论等等。您的参与是对蛋白质技术版块最大的支持。2、在本版发贴有如下建议：（1）题目请尽量写清要问的问题，以便网友浏览；（2）问问题尽量写清要问的细节，并注意不要重复发贴；（3）所有丁香园友的劳动都是义务的，请尽量使用文明用语，以感谢网友的帮助；（4）与 ...

Western Blot一．配胶1．注意一定要将玻璃板洗净，最后用ddH2O冲洗，将与胶接触的一面向下倾斜置于干净的纸巾晾干。2．分离胶及浓缩胶均可事先配好（除AP及TEMED外），过滤后作为储存液避光存放于4℃，可至少存放1个月，临用前取出室温平衡（否则凝胶过程产生的热量会使低温时溶解于储存液中的气体析出而导致气泡，有条件者可真空抽吸3分钟），加入10%AP（0.7~0.8:100, 分离胶浓度越高AP浓度越低，15%的分离胶 ...

前段时间，美国赠送给我一个质粒，经联邦快递到达深圳海关，公司通知我要根据货物情况到相关行政职能部门办理入境申请，或者是省卫生厅科学教育处办理《人体物质出入境申请表》或《科研样品出入境申请表》 和《医用特殊物品准出入境证明》，或者是农业厅检疫处办理相关入境申请，然后报送深圳海关，再由海关办理其他清关手续（海关还要请专家审查，非常麻烦）。听起来很简单，等我请本单位出函给卫生厅，卫生厅说不是医学用品不归他们管，到农业厅，农业厅 ...

因版面内无人应助帖比较多，但并不能及时整理出来（一个月整理一次周期太长了），导致大量帖子沉降，好多站友的问题得不到及时的解答，极大打击了新战友的积极性，而且也使版面质量下降。因此本版特招聘无人应助帖整理人员2名。 而且我们会以1分欢迎您的到来！！要求：招聘条件如下：年龄：至少2个月（从注册日期算起）分数：至少10分以上（主要是为了招对论坛操作比较熟练的人）热情度：在本版发帖超过30帖。因整理无人应助帖是一个比较麻烦的事，故 ...

原核表达标准　　目前世界上， pET 系统已成为在大肠杆菌中蛋白表达的首选。该系统成功的一个主要原因是目标基因被克隆到不为大肠杆菌 RNA 聚合酶识别的 T7 启动子之下，因此在加入 T7 RNA 聚合酶之前几乎没有表达发生。克隆到 pET 载体的基因实际上是被关闭的，不会由于产生的蛋白对细胞有毒性而引起质粒不稳定。重组质粒转移到染色体上含有一拷贝由 lacUV5 控制的 T7 RNA 聚合酶基因的表达宿主中，并通过加入 IPTG 诱导表达；也可通过 l CE6 感染原始克隆宿主菌来提供 T7 RNA 聚 ...

由michael 战友上传并编写其简介！资料已转移至:老赵一号航母:/基础医学区/蛋白质技术专业组/pub/ 人物介绍：贺福初老师，中国蛋白质组学绝对的number 1(y)(y)毕业于复旦大学生物系，1985年在军事医学科学院放射医学研究所获硕士学位。现为中国科学院院士、军事医学科学院放射医学研究所所长、研究员、博士生导师，技术4级，大校军衔，同时，为复旦大学生物医学研究院院长。2002年初，作为首席科学家，领衔了在未来5年内资助 ...

1.【求助】有关流式细胞仪http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4532636&sty=1&tpg=14&age=02.求购DEAE Sephadex A 25http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4532181&sty=1&tpg=14&age=03.紧急求助：请教一个蛋白质测序的问题http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4 ...

Western-Blot操作流程试剂配制（一）母液1.0mol/L Tris·HCl Tris (MW121.14) 30.29g蒸馏水 200ml溶解后，用浓盐酸调pH至所需点（见下所示），最后用蒸馏水定容至250ml，高温灭菌后室温下保存。 PH HCl7.4 约17ml7.5 约16m7.6 约15ml8.0 约10ml1.74mg/ml (10mmol/L)PMSF PMSF 0.174g异丙醇 100ml溶解后，分装于1.5ml离心管中，-20℃保存。0.2mol/L NaH2PO4 ...

1 van der waals volume, atom-name-is-C,.....http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=3994250&sty=1&tpg=65&age=02 【求教】请问分子量大小为65kDa的蛋白的Westernblot的反应条件如何？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4000123&sty=1&tpg=65&age=03哪里可以购买正常膀胱组织总 ...

将最近看到一篇较好的文章中的英文翻译并整理如下啦^_^，错误之处请批评指正：一、EMSA反应影响因素：1、DNA探针：探针可以和目的蛋白相结合，但同时也可以被其它蛋白非特异性结合，因此在得到特异性条带时也会有非特异性结合条带、“smear”探针条带或样品滞留不出孔。2、目的蛋白：同理目的蛋白除对其特异性结合的探针结合外，与竞争性反应中的非特异性DNA探针也有不同亲和力的结合，从而可以出现特异性结合条带或者与其它蛋白 ...

蛋白提取：１． 总蛋白提取（胞膜，胞浆，胞核）：组织匀浆后,15000g, 4度, 20分钟后,取上清.Buffer:NP40 750ul, 脱氧胆酸钠0.5克, SDS 0.1克, 加undefinedPBS 至100ml. 再加入PMSF(7.4mg/ml) 0.1ml. (现用现加)7.4mg/ml PMSP异丙醇溶液: 取A mg PMSF 加 A/7.4 ml 异丙醇.工厂-20度储存２．组织膜蛋白提取：所在操作冰上进行（1）取组织，用PBS冲洗干净组织上的血液. 加入 10ml Buffer A , 用剪刀尽可能剪碎组织,于冰上充分匀浆。每次 ...

序：在丁香园快四周岁的时候，特开此帖，让我们大家在一起畅谈《蛋白质技术讨论版 》的过去、现在、将来。在这里，让我们暂时忘记sds－page、忘记层析，质谱、忘记表达，纯化……在这里，让我们缅怀历史、展望未来，说说心里话……一切为了这一段难以割舍的丁香缘！前言：我总以为，人与人之间存在着一些神秘而美好的关联，网络如此之大、之广，在茫茫的人海之中，因为我们所学的专业，因为我们心中共同的追求，穿过许多的必然和偶然，走到一起。使我们相聚在 ...

我是第一次进行核蛋白提取，从文献上查到细胞裂解液和细胞核裂解液的配方如下细胞裂解液A液配方为：1 10mmol/L的Hepes（PH 7.9）2 10mmol/L KCl3 1.5mmol/L MgCl24 0.2%Igepal5 0.5mmo/L EDTA6 0.1mmol/L EGTA7 1mmol/L DTT8 0.25mmol/L PMSF配置细胞核裂解液B液方案：1 20mmol/L的Hepe（PH 7.9）2 420mmol/L NaCl3 1.5mmol/L MgCl24 2%Igepal5 0.5m ...

蛋白质组学精彩PPT历经三年收集整理的，吐血推荐！！在 www.mofile.com里,2.5MAn Introduction to Proteomics.ppt提取玛: 0260240113321679 2005-09-07986KStandards for Proteomics Data .ppt提取玛 3483467556627497 2005-09-07 17:45768.5KQuantitative ProteomicsICAT labeling.ppt提取玛 65 ...

:)刚才在精华版看到一些朋友问到在用MALDI测得肽段分子量后怎么进行数据库搜索的问题，觉得有必要给新手们详细阐明一下，所以贴出了我自己硕士毕业论文中的相关部分与大家共享，也请高手批评指正。我的样品种属是小鼠，我举例的这个SPOT没有鉴定出来，呵呵。2．蛋白斑点PRO2Fig.9 peptide mass fingerprint(PMF) of PRO2 digested by trypsin利用MASCOT程序进行检索输入肽段质量数为：9 ...

Molecular Biology Second EditionMcGraw-Hill Science | undefined*N~I_0072345179_~V_Second_Edition_~F_2002_~V_PDF_~V_880_pages_~V_144_MBMolecular_Biology~E_by_Robert_Weaver~E_is_designed_for_an_introductory_course_in_molecular_biology._The_text_is_geared_not_only_toward_presenting_concepts_of_molecular_biolog_...

标题：Protein-Protein Interactions--Methods and Applications内容：研究蛋白质相互作用的各种方法和应用格式：PDF大小：10Mb（最小不要小于500kb）语种：英文简介：2004年的humana press出版的,为目前有关蛋白质相互作用的方法总结下面是该书的目录Protein–Protein Interactions ：Methods and Applications March 2004Part I. ...

虽然20个标准氨基酸的结构、名称和简写表示随处可见，但是我一直没有找到一份满意的。而且很多是网页形式的，想打印出来随时参考时，还得编辑一下，比较繁琐。这次提供的pdf文档，是直接编辑好的，可以直接打印参考，而且只有1页。最难得的是，文档中对氨基酸的性质和分类做的很好，而且有很精到的注解。就用这个做参考吧！http://www.accessexcellence.org/RC/VL/GG/garland_PDFs/Panel_2 ...