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做实验熬夜，暂时只能整理这么些了。：）浅谈分子伴侣与蛋白质折叠http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=451813&sty=1&tpg=3&age=0蛋白一级结构预测三级结构的软件或网站http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=701140&sty=1&tpg=5&age=0《Protein Structure,Stability, and Folding》http:/ ...

版子上最近有好几位朋友提供了不错的双向电泳的凝胶分析软件手册等内容(感谢merlynhuang兄以及czlong2008兄)，我把他们归纳一下，欢迎各位补充使用感受:)I. 软件与使用手册下载1. BIORAD公司出品PDQuest V7.3.1 下载PDQuest V7.3.1英文使用手册PDQuest中文讲义（感谢merlynhuang兄提供）2. Amersham公司出品ImageMaster V5.0版下载ImageMaster V5. ...

第二十一章 原核表达及其表达载体——【蛋白质技术版】第二十三章 蛋白电泳——【蛋白质技术版】已有BeetleHead报名编写初稿，请及时更新！第二十四章 Western——【蛋白质技术版】已有drake015报名编写初稿，请及时更新！第二十五章 表达蛋白的分离与纯化——【蛋白质技术版】已有princessann 报名编写初稿，请及时奉上！第二十六章 表达蛋白的生物学活性的检测——【蛋白质技术版】注：对蛋白质方面感兴趣的战友请到此跟贴！请申请的战友及 ...

包涵体的出现可能是很多朋友最头疼和无奈的事情了，我在这里将过去的一些知识和经验总结如下，希望我和大家都能从中受益！如何溶解包涵体http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=720959&sty=3&keywords=%B0%FC%BA%AD%CC%E5http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1877293&sty=3&keywords=%B0%FC%BA%AD ...

蛋白质的检测与分析——Western blot一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质（或酶）。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除ELISA法外，也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。前两法有“南”和“北”之意，故本法遂被延伸称为Western（西）印迹法，该法能用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上并与第一 ...

选择材料及预处理　　以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析，有机溶剂提取，层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力场的作用使各组分分配于 ...

我上个月做了 mating （酵母双杂交的一种办法）。现在已经做到了，X-gal assay。从230多个克隆里 第一次选出了68个蓝色克隆。第二次 挑选出了74个蓝色克隆。可是，对比发现重复变蓝的只有 11个。What can I do for it NEXT~我的具体步骤是。一 ：文库建立1. mammalian cell total RNA -- Poly A RNA -- dsRNA -- 提纯 dsRNA。2. 将提纯的dsRNA 转染到AH109细胞株,涂在 150ㅠ待 3~5天克隆出现 并长势饱满.3. 每个150ㅠ， 放入5ml fre ...

http://www.ab-mart.com.cn/content400102.aspx一、样品制备对于Western Blotting实验而言，样品处理是关键步骤之一，获得的蛋白样品必须均质、可溶，并解离成单个多肽亚基，且尽量减少相互间的聚集，使其最终仅依赖本身的分子量大小进行分离。当目标蛋白的含量很低时，需要选取目标蛋白含量较高的组织或细胞器（如核抽提物），或者通过免疫沉淀等方式进行富集。通常样品有重组蛋白、细胞和组织等 ...

这是我整理得生物化学资料，今年考北大生物化学考绩不错。希望斑竹加精。张迺衡编著的（北京医科大学，第二版)§§§蛋白质的化学1.用紫外吸收法测定溶液中蛋白质含量时，波长是多少？用此波长的依据是什么？色氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸在280nm附近有最大吸收，多数蛋白含有这tyr， trp残基。所以在紫外分光中用280nm对它们进行检测。2.氨基酸有哪些成色反应？哪些是肽，蛋白质共有的？各有什么用途？氨基酸的成色反应有茚三酮反应，丹磺 ...

电泳是蛋白质技术的一个重要方面，也是问题教多的方面，我整理了我们的相关内容，便于解决相关问题！内容较多：(求教）做蛋白质表达差别分析（双向凝胶电泳/MS）的费用（求助）2D胶能用普通的单向垂直电泳装置跑吗？（求助）蛋白电泳**求蛋白质毛细管电泳试剂配方以及各项参数蛋白电泳各带为什么总连成一条线？聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳的一些问题中文双向电泳手册【讨论】2D电泳Tricine－SDS-PAGE体系电泳中的问题？2D电泳求助 ...

1. 按照新的《ftp资源讨论版》管理办法，FTP上传账号由各专业版负责发放。请按格式在《FTP资源区》子版跟贴申请上传，原则上应有5名以上战友支持上传。符合规定的申请，上传账号通过PM（或email）发送。 站友应在发放上传账号后尽快完成上传（暂定1周内），未完成上传的帖子，不予以加分，并会被锁帖不在接受申请。收到上传账号的战友必须保证不能向任何第三方透露该账号，也不能利用该账号上传其他未经大家支持同意的文件，如果发现，立即 ...

【推荐指数】★★★ ★【文章来源】D. Zielinska, F. Gnad, J. Wisniewski, M. Mann. Precision Mapping of an In Vivo N-Glycoproteome Reveals Rigid Topological and Sequence Constraints.Cell, May 28, 2010.http://www.cell.com/abstract/S0092-8674%2810%2900386-7【内容简介】N-连接的糖基化是一种具有重要生物学意义的翻 ...

版内常看到WB内参问题，看到一篇文章，觉得不错，转帖在此。http://blog.bioon.com/user3/23049/archives/2007/137682.shtmlWestern Blot 内参选择　作者:明日百傲要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺 ...

在得不到足够信息的情况下，往往比较难以分析，大家多是在假定一些信息来回答问题，这样有时候碰巧符合了，但也有推断错误的时候。这样对解决问题是不利的。如果不涉及到技术保密问题，关于蛋白质纯化问题都建议按下列信息来提问。1、建议贴张SDS-PAGE图来分析一下，最好包括：Marker，胶浓度，变性还是非变性诱导前诱导后破菌上清破菌沉淀沉淀洗涤上清变性溶解上清变性溶解沉淀柱纯化前柱纯化穿透柱洗脱等各个样品。标上mark ...

做了五个月的ＷＢ，有一点点小心得，给新手点经验．蛋白提取：１．总蛋白提取（胞膜，胞浆，胞核）：组织匀浆后,15000g, 4度, 20分钟后,取上清.Buffer:NP40 750ul, 脱氧胆酸钠0.5克, SDS 0.1克, 加undefinedPBS 至100ml. 再加入PMSF(7.4mg/ml) 0.1ml. (现用现加)7.4mg/ml PMSP异丙醇溶液: 取A mg PMSF 加 A/7.4 ml 异丙醇.工厂-20度储存２．组织膜蛋白提取：所在操作冰上进行（1）取组织，用PBS冲洗干净组织上的血液. 加入 10ml B ...

膜蛋白的种类繁多，约占总蛋白的30%，同时赋予细胞膜非常重要的生物学功能，但是由于其特殊的性质和结构特点，我们获得膜蛋白相比较其他蛋白来说要困难得多，因此如何获得大量有生物学活性的质膜蛋白对我们显得非常的重要，本人曾经试图获得一肿瘤组织中的p-gp,也许是由于实验室条件的限制，费了九牛二虎之力也未能获得一个比较理想的结果，如果大家有什么好的分离膜蛋白的经验不妨贴出来，供大家一起分享，共同学习，共同进步。以下是我 ...

最近需要购买试剂，人家介绍什么santa-cruz，BD，DAKO，newmark 公司，结果回来上网查找时 直接输入这些公司名字还是不能直接到达公司网站，四处搜搜，发现有些朋友提供了一些常用公司的网站，现贴出来一起分享，其他朋友继续补充。。。试剂公司网站毕龙—毕特博商务网http://www.bilong.com中国科学器材网http://www.sciequip.com.cn/鼎国生物http://www.dingguo.com/生 ...

我收集了些资料，希望大家喜欢与传统方式相似，重组蛋白的分离纯化也是利用其物理和化学性质的差异，即以分子的大小，形状，溶解度，等电点，亲疏水性以及与其它分子的亲和性等性质建立起来的。与此相对应的分离纯化方法参见表1。从表1可看出，当前蛋白质的纯化主要是依靠层析和电泳技术。由于重组蛋白在组织和细胞中仍以复杂混合物的形式存在，因此到目前为止还没有一个单独或一整套现成的方法把任何一种蛋白质从复杂的混合物中分离出来，而 ...

◇◇新语丝(www.xys.org)(xys.dxiong.com)(xys.3322.org)(xys.xlogit.com)◇◇　　对于多糖研究的一些看法　　天山童姥　　（本文纯属学术争鸣，不针对某个人或者某个研究单位）　　近几年来，多糖的研究很热门，尤其是各大院校的食品专业科研人员纷纷涉足于此领域，翻看一些国内食品科学杂志，基本上每期都有多糖的研究，有时甚至一期有好几篇。来源更是五花八门，真菌多糖，枸杞多糖，茶多糖，等等。对于多糖的研究，我有一些 ...

整理了一下2005年12月份蛋白版的无人应助贴，以支持版主的工作已被锁、被扣分、标题为空以及不符合发贴格式的无人应助贴不在此列应助战友请到积分申诉区给出链接，谢谢哪位用过quantityone软件用quantityone软件进行WB的条带处理。哪位用过的朋友稍微讲讲啊http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4994642&sty=1&tpg=22&age=0 跨膜蛋白分析及做图软 ...