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为了保持细胞结构的自然状态和组织性形式，通常要经过化学固定来中止细胞中的酶及其他的代谢活动，使其尽可能的保持原有状态。而有些常用的固定剂用得不恰当，往往会造成假象或信号丧失，非特异性信号增高等。我总结了一下常见几种固定剂的特点与各位战友分享常见固定剂的特点比较---------------------------------------------------------------------------------------------------戊二醛 甲醛 冷甲醇/丙酮------------------------------- ...

转自生物谷网站免疫细胞化学技术的某些新进展免疫细胞化学技术在继续改进和完善中，新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外，80年代，新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章　叙述，本节　仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。　　【半抗原交联抗体法（Hapten –Coupled techniques）】　　近年来，为提高敏感 ...

【分享】柱层析极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统极性较大的用甲醇：氯仿系统极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸硅胶柱层析下面介绍我现在惯用的方法：匀浆法。1。称量。200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。2。搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/ ...

荧光素标记抗体技术撰稿　金伯泉、赵宁--------------------------------------------------------------------------------　　(一)　原理　　目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合，标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧光灯源紫外线或兰紫光 ...

做个小测验,看看下面您从下面文章中能得到什么?(仅涉及技术及操作方面)几年前的春天，我移民来到温哥华。同年夏天来到一家生物技术公司工作。在国内作了多年_究员的我，在这家公司的职位是技术员。刚进入实验室没几天，我就发现这个实验室的管理不够规范。举几个例子：实验室的工作人员配少量缓冲液时使用方瓶而不是使用带刻度的量筒。由于大家都那么做，量筒的需求就不大。这样一来，要想找到配液必用的量筒，倒不那么容易了。更使我惊讶的是胶 ...

抗海带多糖单克隆抗体的制备一 实验目的利用单克隆抗体的制备原理和技术，将纯化的重组钙网蛋白片段（CRT39-272）和海带多糖（laminarin）偶联作为抗原免疫小鼠，增强海带多糖的免疫原性，制备抗海带多糖（LAM）的单克隆抗体。 二 实验原理骨髓瘤细胞在体外培养时能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体，而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲 ...

基因组水平的免疫系统=======================================================很久以前就想和大家讨论一下这个话题！我相信有许多人一看到这个题目就会有同感的！早在1990年,Jorgensen在矮牵牛中发现的一种转基因同时抑制相应内源基因及自身表达的基因沉默现象。后来发现在线虫、果蝇等动物中也存在这一现象。这一现象现在称之为共抑制（co-suppression)！1994年由Macino和Cogoni在粗糙脉孢 ...

免疫扩散l 单向免疫扩散（single immunodiffusion）1．取一块玻璃板，用水冲洗干净后，再用少量75%乙醇冲洗，晾干后置于水平台备用。2．将1% 琼脂糖（agarose）融化，56℃水浴中保温。3．取15ml 琼脂糖加到56℃预热玻璃管中，加入适量抗血清（约200μl），充分混匀后铺于玻璃板上。4．待凝胶凝固后打孔（直径3mm）。5．将系列稀释的标准抗原和待检抗原分别加到凝胶孔中，每孔5μl。6．将凝胶板置于湿盒内，室温过夜（ ...

试剂 剂型 13059143940/13380091861第一页重组人Activin A冻干粉 标准品 5 units / ampoule人甲胎蛋白冻干粉 标准品 100,000 IU / ampoule.氨基羟丁基卡那霉素冻干粉 标准品 50,600 IU / ampoule两性霉素B冻干粉 标准品 . 940 IU / mg（含约50mg两性霉素B）Ancrod冻干粉 标准品 55 IU / ampoule炭疽芽孢疫苗，34F2菌链孢子悬液冻干粉 1 IU / ampoule人抗A型血清冻干粉 标准品 470 IU / ampoule人抗A型血清冻 ...

[专业技术人员创业与职业规划（1） 评论(1)发表时间：2006年11月24日 9时31分 一、 定义生命科学专业技术人员的属性 是不是一见这个标题感觉就像是上课？ 生命科学专业技术人员，就是在读或完成了生命科学基本学历教育的人，他们将来或正在从事与生命科学相关的实验、开发、生产、项目管理、技术管理等工作，而不是那些具有生命科学背景而从事市场、销售、人力资源、财务、行政管理等工作的人员。如此界定，下面还有用。 专业技术人员的共性：接受过较系统的生命科学教育，对实验研究有一定了解，相比对人和事的关注更热衷对技术的钻研，思维逻辑性强，务实，唯物。但也有很多不足：过分强调技术在任务中的重要性，不了解资源在任务中的作用，因此易于偏离方向，缺乏团队意识，在团队中角色不明确，沟通能力普遍不强，甚至于害怕与人沟通，缺乏领导力，往往以技压人，对自己持有的技术设置神秘感，对技术以外的知识非常缺乏。 综合来讲，专业技术人员，在业务上的能力和成绩是值得肯定的，但在处事、协调、领导等方面还有很大不足，当然这方面也是因人而异的，只是希望大家能对照自己，找到自身的不足，这才是立业的根本。 因为我们，包括我自己，在

我现在准备做大鼠心肌组织的冰冻切片（研究心肌细胞膜上的钾离子通道蛋白），按照丁香园学友的帮忙，取标本后先放在液氮中，随后4％多聚甲醛磷酸缓冲液后固定标本后，再放入20％蔗糖PB液，直至组织块沉底。本打算今天高高兴兴去做冰冻切片免疫组化（SP法），但是帮我做切片的病理科技术员说：蔗糖泡过的标本非常软，均无法切片，以前他也遇到过类似的问题。具体原因他也解答不清。不知哪位学友帮忙解答？1 是否我们医院病理科冰冻切片机比较不好， ...

cAMP/cGMP（环磷酸腺苷/环磷酸鸟苷）是一种环状核苷酸，以微量存在于动植物细胞和微生物中。有人称其为细胞内的第二信使，而称激素为“第一信使”。cAMP（或cGMP）由腺苷酸（或鸟苷酸）环化酶产生，而被磷酸二酯酶降解，因此激活腺苷酸（或鸟苷酸）环化酶或者抑制磷酸二酯酶可以提高细胞内cAMP（或cGMP）的含量。研究发现，cAMP（或cGMP）特异性磷酸二酯酶的抑制剂可用于人类疾病的治疗。如cAMP的封闭剂，增强β肾上腺 ...

酗酒引起人类肥大细胞的凋亡1.背景：目前认为酗酒可导致免疫功能抑制，而增加感染的机率，但是确切的机制不明。肥大细胞（mast cell，MC）属于固有免疫系统，可抵御细菌和寄生虫的感染。本文章主要研究了乙醇及其代谢产物乙醛对肥大细胞生存能力、增殖能力和凋亡的影响。2.方法：采用3种细胞系，分别是人类肥大细胞系（HMC-1）、小鼠骨髓干细胞诱导的肥大细胞系（mBMMC）和人类外周血诱导的肥大细胞（HuMC）。用H3掺入法、台酚 ...

溶血空斑形成试验是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法，故又称体外抗体形成细胞(Plaque Forming Cell, PFC)测定技术。此项技术不仅可以作为免疫基本理论研究的有力工具，广泛地用于检测产生IgM类型(包括其它各类免疫球蛋白及其亚类)的抗体形成细胞，它还可作为临床筛选抗肿瘤新药以及研究中药对抗体免疫功能影响的免疫学指标。一、原理：　　溶血空斑形成试验的基本原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊 ...

书本上经常会提到：“病毒感染白细胞可以不升高，白细胞分类以淋巴细胞升高为主，白细胞升高考虑细菌感染为主，且中性粒细胞升高为主。” 同样经过非特异性免疫反应和特异性免疫反应，为什么病毒感染是以淋巴细胞计数增高为主，而细菌感染是以中性计数增高为主？搜索园中战友帖子，找到如下帖子：病毒感染初期：WBC（白细胞）可轻度升高，但N（中性粒细胞）多不高。细菌：一般二者均高，但有三种情况：　　A、WBC升高，N不高；　　B、WBC正常/稍低，N升高----- ...

我现在做elisa，目的是利用此法来检测我样品中蛋白的浓度，我用的是改良的双抗体夹心法，就是包被鼠单抗，加标准品和待测样品，再加兔多抗，再加山羊抗兔的酶标二抗，TMB显色。我现在的问题是摸索单抗和多抗的稀释度，所以就将多抗稀释了三个浓度1:5000,1:10000,1:15000,1:20000，单抗 包被稀释度是1:15000，标准品都是五倍稀释即：25μg/mL , 5μg/mL , 1μg/mL , 0.2μg/mL , 0.04μg/mL 酶标二抗是1:5 ...

免疫学专家孔宪涛教授将在检验版讲座,欢迎参加!http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=131&id=9355051&sty=1&tpg=1&age=0孔教授简介孔宪涛教授于1932年11月12日出生于山东泗水县，1946年12月参加八路军，1950年参加中国**、1962毕业于第二军医大学，教授、博士生导师。　　现任：第二军医大学专家组成员、中国免疫学会常务理事、临床免疫专业委员会主任委员、上海检验学 ...

液相芯片技术及在中国的应用前景讨论！Lumniex™100 Liquid Array液相芯片分析平台Luminex™100是一个多功能的液相芯片分析平台，通常用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究。Luminex™100有机地整和了有色微球（color-coded microsphere or bead）、激光技术、应用流体学、最新的高速数字信号处理器和计算机运算法则，造就了Luminex™100无与伦比的检测特 ...

由于牛血清白蛋白(BSA)具有多种产品样式，可满足不同种的应用。目前网上的信息大多模棱两可，有牛血清白蛋白，也有牛血清白蛋白v组分等，很多 供货商对其区别也是不清楚的；另外，市场上还提供无蛋白酶、无DNase及无RNase、无脂肪酸、微生物级、试剂级、诊断分析级等不同等BSA粉末，因 此如何选择合适的BSA产品是很重要的前提。一般来说，普通的BSA粉末或者第五组分适合于细胞和组织培养，也可以用于一些蛋白补充物；而其它无蛋白酶、 ...

用DNA分子佐剂增强DNA疫苗免疫效应的研究进展李再新 张富春（新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室 乌鲁木齐 830046）自Wolff等1990年发现DNA能够刺激机体产生免疫效应以来,在全世界范围内迅速掀起了一股DNA疫苗研究热。在近十年的时间里,科学工作者在鼠、鸡、猪、牛、猫、猴和黑猩猩等动物中进行了广泛深入的抗病毒、抗细菌、抗寄生虫、抗肿瘤及免疫不育的DNA疫苗研究。由于DNA疫苗能诱导机体产生体液免疫 ...