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当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一抗匹配，这一点是非常重要的。比如，如果一抗是兔来源的抗体，二抗一定要用抗兔的二抗来匹配；或一抗是小鼠的IgM一抗，二抗必须是山羊/兔抗 ...

1.　ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质 ...

请规范发贴，谢谢合作。应用改良ELISA法检测某蛋白，购买标准的抗原肽，分子量比较小，直接包被标准的抗原肽，浓度已经达到了100ng/ml水平，过夜后经过洗涤，然后加入一抗，为纯化的IgG，浓度也比较高，为μg/ml水平，按着标准抗原肽和IgG的分子量来计算质量浓度，一抗应当足够和抗原肽结合了。加入一抗后37℃温育2h，洗涤，然后加入标记物（二抗），37℃温育1h，洗涤，再加入TMP底物A和底物B，显色反应20min，加入 ...

Nature Immunology | Article 2011 Mar 27. CXCL12 secretion by bone marrow stromal cells is dependent on cell contact and mediated by connexin-43 and connexin-45 gap junctionsAmir Schajnovitz, et al.1 Department of Immunology, Weizmann Institute of Science, Rehovot, IsraelThe chemoki ...

酶联免疫吸附实验（ELISA）BIOX.CN 2004-9-7 14:41:36来源：生命经纬基本原理1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使 ...

细胞因子的检测细胞因子是由免疫细胞和某些非免疫细胞经刺激而合成、分泌的一类生物活性物质分泌的蛋白质,在体内广泛参与免疫调节及炎症反应、组织修复、刺激造血系统、刺激细胞的增殖与凋亡等重要生理活动,在抵抗外来病原及维持机体内环境平衡中均起重要作用。某些刺激因子也可导致一些细胞因子超量表达,或表达减少,从而参与疾病的发病及病理过程。故细胞因子的检测无论是对免疫学、分子生物学的基础研究,还是对阐明某些疾病的发病机理, ...

免疫检验的自动化华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科---吴健民　　随着免疫学的不断发展,新的免疫学技术不断出现,如化学发光技术、时间分辨荧光免疫测定技术、荧光偏振免疫分析测定技术等。促进了免疫检测的自动化,一大批先进的自动化免疫分析仪应运而生,它们的出现不仅减轻了工作人员的劳动强度,而且缩短了分析流程,提高了实验结果的精确度和准确性,灵敏度更是达到rlg甚至pg水平,在内分泌激素、血浆特种蛋白、肿瘤标志物、维生素、 ...

石蜡切片免疫组化染色步骤· 石蜡切片免疫组化染色步骤·· 1、载玻片的处理：抗原修复过程中，由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。为保证试验的正常进行，可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂，对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下：1.1 APES：现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中，停留20~30秒钟， ...

我做的是大鼠肾脏MMP-9和PAI-1的免疫组化染色。MMP-9为山羊抗鼠的，PAI-1为兔抗鼠的，均为中山公司产品。选用中山公司相应的二抗试剂盒。反复做了好几批片子可结果总是不尽如人意，背景颜色比较深，难以判断阳性结果。具体步骤如下：1、石蜡包埋组织切片4μm，用的是中山公司的多聚赖氨酸防脱片的玻片，捞片后置60℃烤箱烤片2-4小时。2、半月后，脱蜡水化3、PBS液冲洗，3分钟×3；4、切片置于1％triton-x-100 ...

　　免疫组化技术是在抗原抗体特异反应存在的前提下，借助于免疫细胞化学的手段，检测抗原（或抗体）在组织细胞内存在部位的一门新技术。其原理是利用免疫的核心——用标记的抗体（或抗原）对细胞或组织内的相应抗原（或抗体）进行定性、定位或定量检测。，近20年来，由于单克隆抗体生产技术的不断进步，检测系统的改进以及抗原修复方法，特别是热处理方法在福马林固定的石蜡切片上的应用，免疫组化技术有了飞跃性的进展。加上近年来在应用方面积累的经验 ...

作者：Nanci Donacki 转自www.bioon.comFormalin Fixed Cell Plates1. Trypsinize confluent flasks2. Pool and count cells3. Centrifuge at 1500 rpm for 10 minutes4. Resuspend to the appropriate concentration in complete medium4 x 105 cells/ml for epithelial cells2 x 105 cells/ml for fibrobl ...

今天做了小鼠股骨的免疫荧光，好几张片子上出现这个东西，不知道是啥，请大侠指点下。还有下面这些片子为什么都是这样的，好像每个通道都有颜色，哪位大侠做过类似的么？

本内容需要回复后才能下载！ 本书版权归作者所有，请于下载后24小时内删除ELISA指南（高清英文版）The ELISA Guidebook名称The ELISA GuidebookMethods in Molecular Biology第 第 149 卷 卷Springer protocols编者J. R. Crowther版本插图版出版商Humana Press, 2001ISBN0896037282, 9780896037281页数421 页

Nature 452, 764-767 (10 April 2008)The earliest thymic progenitors for T cells possess myeloid lineage potentialJ. Jeremiah Bell1 & Avinash Bhandoola1Abstract:There exists controversy over the nature of haematopoietic progenitors of T cells. Most T cells develop in the thymus, but t ...

A human memory T cell subset with stem cell–like propertiesLuca Gattinoni，Enrico Lugli, Yun Ji et al.nature medicine 2011;17(10):1290-1298Immunological memory is thought to depend on a stem cell–like, self-renewing population of lymphocytes capable ofdifferentiating into ef ...

PB缓冲液配制0.2M NaH2PO4溶液：NaH2PO4·2H2O 31.2克或NaH2PO4 27.6克，溶于1000毫升蒸馏水中。0.2M Na2HPO4溶液：Na2HPO4·12H2O 71.6克，溶于1000毫升蒸馏水中。0.2M的PB缓冲液（PH 5.7～8.0）PH0.2M NaH2PO4溶液(mL)0.2M Na2HPO4溶液(mL)5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.5 ...

11月份ELISA讨论区http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id=4780852&sty=1&tpg=6&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id=4784574&sty=1&tpg=6&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id=4828275&sty=1&tpg=5&age=0http://www.dxy.cn ...

Bromodeoxyuridine (BrdU) uses nucleotide substitution to replace thymidine with uridine in the DNA structure of dividing cells both in vitro and in vivo (Gage, 2000). BrdU has been utilised in a number of in vitro and in vivo studies to label a variety of cellular sources from human olfactory epithe ...

Book DescriptionAntibodies are an indispensable tool in the study of biology and medicine. Making and Using Antibodies: A Practical Handbook presents techniques in a single, comprehensive source for the production and use of antibodies. It enables researchers to immediately access ...

最近接到流式细胞仪检测巨噬细胞吞噬荧光微球试验这么个活，既不熟悉流式也不熟悉吞噬细胞，彻底茫然状态。连该买哪种微球都搞不清，微球好贵又不敢乱试。苦找了很久在一些微球公司的网页找到一点自认很有用的文件，拿出来共享，希望与我遇到同样麻烦的同仁看了能有帮助。———————————————————部分引用——————————————————Synthetic polymeric particles have been used extensively to study phagocy ...