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guaiguainiehui 采用双报告基因，我和一位师兄做不同的寡核苷酸跟不同的基因的3‘utr作用。比如mir-1 and pmir-report-A3'UTRmir-1 and pmir-report-B3'UTR为什么我按照师兄的各个量转染，renilla的数值我们差不多，但是目的的数值，我的是overload,师兄的却比较小呢？难道跟构建进去的3’UTR有很大关系吗？谢谢！另外，附带问一下，3；UTR采用合成几十bp的寡核苷酸， ...

daydayupmj 请教个问题，最近接触了一些脂联素的文章，有些混乱，1----血清中脂联素形式有球形还有全长型，还有的这样分即高分子量多聚体（HMW)，六聚体，三聚体，还有的这样写HMW,MMW,LMW.是不是MMW就是六聚体，LMW就是三聚体。还有说球形结构域是三聚体，是什么意思？有些混乱。2-----关于脂联素到底是抗炎的，还是一种炎症反应的标志物，是一种炎症因子。看了一篇关于脂联素的英文Adiponectin and infl ...

zhangxiaoli728 请教分子生物高手：gap-opening和gap-extension是什么意思呢，怎么理解？非常感谢！freecell Gap opening penalty：空格罚分设置，增加一个空格就罚相应的分值，增加这一分值会降低空格出现的频率。Gap extension penalty：空格扩展罚分，就是根据空格的长度来罚分，增加这一分值会使空格变短，末端空格不计入罚分。参考： http://abc.cbi.pku.edu. ...

rongshenghao 哪位知道由GTP或者ATP或者carbachol引起细胞内钙离子浓度升高确切的信号转导途径谢谢！！！rongshenghao 下面是我查到 的资料ATP(或者GTP)和carbachol都可以通过G蛋白偶联的途径使IP3增多，然后导致钙离子升高各位战友能够再具体详细说明下比如在这个通路中哪个蛋白激酶起作用？比如磷脂酶 (PLC)，水解磷脂酰肌醇二磷酸产生脂甘油(DAG)和IP3,那IP3是如何使内质 ...

lijl810 请大家帮帮忙，我现在需要使用DNAMAN的全套软件分析工具，希望大家能帮帮我，在此先谢谢大家了，需要英文版的。freecell http://www.lynnon.com/往事随风而去 我这儿就一个DNAman软件 何谓全套？下载见附件往事随风而去 下载见附件 2-2lijl810 谢谢大家的热心帮忙啊，非常感谢！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号： ...

Amanda1983 请教一下，genome-wide screenings是什么技术啊，翻译成中文是什么意思啊freecell 这个不是什么“技术”，而是一种研究基因与表型相关性的一种方式，即基因组规模上的筛查。比如说，想分析A疾病的发生机理，然后采用一定的手段，在整个基因组上“扫描”，但哪些基因与此疾病发生相关。你参考这篇文献：http://scholar.ilib.cn/A-ykyj200604026.html如果你对我的解答 ...

琼琼qiongqiong 小女子在这里多谢大家的帮忙了，:)freecell cDNA是单链DNA分子cRNA是单链RNA分子。cRNA是cDNA体外转录的产物，其本质的意义是体外扩增mRNA，采用cRNA的主要原因是，cRNA与DNA的杂交结合力远大于cDNA与DNA的结合，使检测结果更加稳定可靠。lmnsmu cDNA是指“complementary DNA”，翻译为“互补DNA”，是由逆转录酶催化，以RNA为模板合成的、与 ...

wings_008 如题，如果我用一种干预方式使A基因的表达水平上调或下调，那其的受体B，也会随着相应上调或下调吗？B是A的唯一受体望赐教！freecell 个人意见：不会。A上调或者下调，只能说明结合B的A多了或者少了。一个基因的表达是和其上游事件相关的。zjubell freecell wrote:个人意见：不会。A上调或者下调，只能说明结合B的A多了或者少了。一个基因的表达是和其上游事件相关的。我的观点是不一定：就如你所说， ...

cameron 有什么功能吗?谢谢!!!freecell Miscellaneous RNA：是一类庞杂的小RNA分子。# Miscellaneous Small RNA: serves a variety of functions, including some enzyme-like catalysis; many are involved in processing RNA after it is formed; the remaining 2% of RNundefined Recent evidence suggests that some of these sm ...

xjoak 比如我们用非特异性的筛选方法筛到一个与肿瘤细胞相结合而与正常细胞不结合的抗体，但我们不知道该抗体的靶蛋白是什么，那么可以用一些什么技术筛到该抗体的靶蛋白呢？多谢！freecell 酵母双杂交、免疫共沉淀，应该都可以吧。xjoak 多谢，酵母双杂交应该可以，免疫共沉淀可能不行，因为靶蛋白是未知啊！还有其他方法吗，？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 ...

treesea 我想用western blot的方法，研究临床的手术切除的脑组织病理标本中Ras-MAPK信号通路的表达变化的情况。请问具体要研究哪些指标呢？在标本处理的时候需要注意哪些方面？谢谢~~treesea 期待中~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~michaelmichael 首先，你要保证样本蛋白不被降解；第二，要正确匀浆组织样本与蛋白定量，这样才胡保证一样的量是一致的；第三，你要选择磷酸化的抗体来研究该通路，同时还要观察总 ...

mrliuw 提问：一个蛋白单体没活性（或者说很低），发挥作用需要形成同源二聚体并发生自体磷酸化，但是在对照和实验组之间没有发现有统计学意义的表达量差异，请问做过类似研究的同行，应该如何开展研究？（比如从定位，修饰变化等等）mrliuw 这个是已有文献报道的，在细胞内完成。如果能得到天然的二聚体体，下面要如何开展研究呢？freecell 如果能得到天然的二聚体体,你的研究目的是什么呢？只有知道了研究目的，才能探讨研究手段吧？m ...

tianjinny 各位大侠，你们好！我现在有一问题需要请教各位,我目前研究的是 miR-451（微小RNA-451），由于目前研究此RNA的文献很少，本人未查到其在人肿瘤细胞中的靶点，不知这样的网站网址是什么。还有一问题，就是癌基因AKT1 、C-MYC与miR-451的靶序列有无互补序列，具体结果是怎样的？盼回复！！谢谢！！freecell 自己看看文献吧，怎么会很少呢。http://scholar.google.com/scholar ...

michaelhwp10 买了sigma公司的药，用来干预细胞。药粉用DMSO溶解后我把它放在四度冰箱，但是DMSO在四度时候会冻住。做一次实验我就拿出来融化一次，请问多次冻融会对这药的药效有影响吗？sosorunning 说不准有些反复冻融很稳定，也有些很不稳定，所以下次做的时候要分装。michaelmichael 分成小份放在-20度保存吧，不要放在4度。DMSO在低温时会凝固，但不影响药物的活性。至于可以反复冻融多少 ...

qazwsx2357 各位高手我在做IL-24基因克隆的时候构建了一个质粒，测序后发现在信号肽的碱基处有一个突变，对于这个很是迷惑。不知道是实验中出的问题还是PCR突变，有没有可能是实验对象本身的信号肽出现突变？出现这种情况是该继续往下做还是追究这个碱基？继续往下做这个改变会有问题吗？望各位高手给我指点一下，急求，急求！这个问题已经困扰我一段时间了，我还等这继续往下做，急求急求啊zhujoker 其实这种问题很简单，你 ...

wulab22 如题:帽子的糖环与核糖核酸链之间是-p-p-p-连接，而核糖核酸链之间的糖环之间是-p-连接，合成酶能识别-p-p-p-吗，能够以帽子结构为模板，在第一链cDNA的3'末端合成c吗？谢谢！wangxiaotong999@163.comdnazyme 5’-RACE技术的意义：可以精确定位转录起始位点。但是定位转录起始位点又有什么意义呢？以RNA聚合酶Ⅱ为例，启动子区一般位于转录起始位点上游200-300bp的范围内， ...

三七家园 呵呵，希望大侠们，大牛们，前辈们不吝赐教。。。。:Plicanming 可以讲具体一点吗？三七家园 谢谢楼上的关心，我现在要检测pkc三个亚基δ,ε,ζ在用0.2uM的PMA（pkc的激动剂）后如何被激活？（是被磷酸化呢？还是蛋白量表达增加？或者别的什么？）怎样检测这种激活？（如果是前两个，我想用western blot因为我现在只会这个技术）ffyy8888 哈哈，技术很多呢，WB是经典金标准，但是现在还有很多新的方法，哈哈哈哈，其中 ...

sunshijie12345 各位大虾：我今天看文章遇到些问题想请教下：我在很多篇文章里看到 Human Muscle Phosphofructokinase Gene(PFKM)都说位于1号染色体上，但是我在NCBI里查询，该基因却在12号染色体上，请问我该怎么解决这一矛盾，应该相信文章还是该相信NCBI?freecell 写信给作者。From NCBI, we know that...However, .... in your paper.作者肯定要给你一个答复的。c ...

every366 什么是歧化基因？多谢！iscience 王琳芳《医学分子生物学原理》上面说到了这个概念。具体怎样的，不记得了。小舟儿 iscience wrote:王琳芳《医学分子生物学原理》上面说到了这个概念。具体怎样的，不记得了。依据王琳芳《医学分子生物学原理》：歧化基因即为假基因！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

orgachem 各位哥哥姐姐，大家好！我想请教一个很简单的问题，但是我确实不知道，让大家见笑了。问题如下：蛋白和蛋白质是同一种物质吗？如果不是的话，二者主要有什么区别 ？:)谢谢各位！阳光海岛 关键看这个“蛋白”是指什么东西了。蛋白质是由氨基酸组成的大分子，其水溶液在冻干除水之后，留下的固体粉末就是了蛋白质。“蛋白”呢，意思很多，如果说指的是鸡蛋的“蛋清”的话，那基本就是一个蛋白质的水溶液吧，煮熟只是蛋白质变性了，凝固了。（没做过实验 ...