【求助】关于靶蛋白预测
丁香园论坛
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采用双报告基因，
我和一位师兄做不同的寡核苷酸跟不同的基因的3‘utr作用。
比如mir-1 and pmir-report-A3'UTR
mir-1 and pmir-report-B3'UTR
为什么我按照师兄的各个量转染，renilla的数值我们差不多，但是目的的数值，我的是overload,师兄的却比较小呢？
难道跟构建进去的3’UTR有很大关系吗？
谢谢！
另外，附带问一下，3；UTR采用合成几十bp的寡核苷酸，然后2条退火，包含作用位点，跟直接pcr3'utr甚至是全长3'UTR，，哪一个好？
我和一位师兄做不同的寡核苷酸跟不同的基因的3‘utr作用。
比如mir-1 and pmir-report-A3'UTR
mir-1 and pmir-report-B3'UTR
为什么我按照师兄的各个量转染，renilla的数值我们差不多，但是目的的数值，我的是overload,师兄的却比较小呢？
难道跟构建进去的3’UTR有很大关系吗？
谢谢！
另外，附带问一下，3；UTR采用合成几十bp的寡核苷酸，然后2条退火，包含作用位点，跟直接pcr3'utr甚至是全长3'UTR，，哪一个好？
你的实验组相对于对照组是阳性反应吗，是的话，就没必要强求检测值的差异，因为荧光酶报告基因检测本来就是存在较大的偏差的，不然干嘛倡导要做荧光素酶双报告基因呢:P
而且还要多次重复计荧光数值，与多次重复转染实验呢，取统计意义的数值呢:)
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师兄微信号：shixiongcoming
