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njustzyy1283 极端一点讲，能不能说所有的疾病都是基因病呢？当然感冒发烧之类的细菌病毒引起的免疫反应应该明显不是了吧。没有分子生物学之前，什么肿瘤高血压糖尿病啥啥的，都是传统方法治疗。分子生物学兴起之后，这些疾病都能或多或少往基因突变上靠，能靠上的就说是单基因病，靠不上的就说是多基因病，因为变量太多所以确定不了相关基因。那哪些疾病是哪些不是呢？像肿瘤，引起机体翻天覆地的变化，一两个基因突变肯定是难免的啦。 ...

syn2767 各位师兄，小弟做miRNA 的microdowm，但realtime检测antisence转染后，miRNA的表达并没用下调，问试剂公司的人说 antisence不能下调目的miRNA的表达，只有上调的质粒才能影响miRNA的表达，是这样吗，多谢！！slytjiaofei 我个人认为公司说的不太准确。利用反义核酸或siRNA抑制microRNA表达是一个很成熟的技术，当然效果如何取决于当初反义核酸或siRN ...

伽利略 我一直都不太明白，请达人解释下，谢谢bigbang_0_0 蛋白质功能上的变化包括质变和量变两种，所以要检测总的p32蛋白水平。George2 测总P38是为了了解P38的表达背景，以估测激活的P38占总量的比例。伽利略 我是这样想的，请问有何问题P38磷酸化水平若增高不论是否P38总量变化，都能说明P38活跃或者激活，不测P38总量也可以。我看到不少刊物测试某些蛋白功能变化时只测了磷酸化水平，而未曾测该蛋白总量。侠骨 ...

xiaoxiaoyu0329 查了很多资料都没有查出来，请您赐教，谢谢bigbang_0_0 帮顶：）jiajin 叫5'UTR，5'非翻译区song333 5' Un-Translated Regionpro2004 5'UTRxiaoxiaoyu0329 好的 谢谢各位的回复bigbang_0_0 不客气。zhuhoushun KAZARK吧吴佰霖 我想称为 转录非翻译区 更确切UTR的含义比较含糊，也可以指5'promoter 调控不转录的序列，也可以指转录了 但不翻译的 ...

lim1896 现在基因敲除技术里好多用的都是同源重组的方法！！！但是，为什么同源就会重组呢？看了好多书还没悟出来原因，而且，基因敲除过程中会有二次重组，这又是为什么呢？？？求解！！！bigbang_0_0 二次重组是Cre-依赖的条件性基因敲出范畴George2 下面的材料对理解同源重组很有帮助，供你参考1、概念基因敲除（geneknockout），是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将该基因去除，或用其它顺 ...

jiuzili123456 手里有一个说明，但是没说多序列的。说的也不是很清楚希望知道的请指教，谢谢freecell 将所有序列按FASTA格式填好，放到一个记事本文件里。例如： DNA1AGGCTTTGAAAAGGGGGGGGGGGGGCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCTTTTTTTTTTTT然后在editseq中，file-import,导入这个记事本文件。然后软件就在这个记事本的存放位置，生成DNASTAR ...

mnidr 我现在在做基因敲除，用的是red重组系统，pKD46质粒上携带有敲除所需的蛋白。pKD46质粒上有两个复制起始点Origin of Replication：repA101ts & oriR101 ；repA101ts是温度敏感型复制起始点。有几个问题请教：1.大家有用过这个pKD46的吗？oriR101是温度敏感型复制子还是条件诱导型复制子啊，我在网上查到它是温度敏感型复制起始点，我很不理解，为什么已经有一个温度敏感性 ...

science_sky 各位前辈，我接下来的实验要检测NFkB通路的活化状况，现在在订购抗体时遇到了问题：我准备订购IκB Antibody 和Phospho-IκB来反映NFkB通路的活化状况，发现Cell Signaling Technology提供了IκBα ，IκBβ ，IκBε和IκB-ζ和相应的磷酸化抗体，我应该订购那种亚型的抗体呢？希望前辈给于指点。00501101 你看你要做什么检测IκB抑制的是NF-kB哪两个亚基了。比如 ...

magichunter 我的药物本来是可以促进细胞凋亡的，后来想研究一下自噬和药物促进凋亡之间的关系。所以分别用自噬抑制剂3MA和促进剂Rapamycin与药物共同作用细胞。结果发现，无论是促进自噬还是抑制自噬，均导致细胞的死亡率比原来药物单独作用还要高，这应该怎么解释呢？为什么促进自噬和抑制自噬均增加了细胞的死亡？组别 存活率（1）正常细胞 100%（2）药物处理 57%（3）药物+3MA 36%（4）药物+Rapamycin 38%mag ...

cpubio 如题。当时把器官取了放在-20度，由于有别的事情，一直没有做，不知现在处理还行不行？谢谢！song333 of coursemaomao030119 应该没得问题的cpubio 谢谢楼上两位回答。我赶紧开展工作，争取俩星期内完成这个工作。maomao030119 看来你又拖了一天jerryri -20度RNA一般能稳定1个月,现在放了3个月了,降解比较严重zhcosa 够呛了吧。。。。。lim1896 RNA不好说！！！本文由丁香园论坛提 ...

霍一刀hxs 不同的miRNAs可以靶定同一个基因，或同一位点或不同位点，那么，他们之间存在竞争性结合吗？弱弱地问一下，各位大侠。song333 possible, but the possibility is really low.each miRNA has its own target sequences, that mostly can be considered as sequence-specific targeting.maomao030119 应该会吧，个人观点本文由丁香园论坛提供， ...

zybaby1008 请教各位，我用酵母分泌表达GFP融合蛋白，酵母中可以直接在荧光显微镜下观察到绿色荧光吗，我曾经观察过，但是，野生酵母也能看到类似绿色荧光，还想请问怎么区分背景和真正的荧光呢，感谢大家的帮助！侠骨仁医 应该是可以直接观察到的，强度肯定是有区别的，野生型的应该只能看见一点轮廓，而不是真正的绿色荧光，还有就是应该可以利用流式定量检测。zybaby1008 非常感谢楼上的战友，恩呢，照片现在不在手头上，今天上传 ...

zw051202109 最近因实验，需要检测组织中的过氧化硝酸盐（NO与超氧化物反应，对细胞产生损伤），请问哪位做过这方面实验的战友，怎么检测，是否有商业化的检测试剂盒，万分谢谢zfyyzz00 目前已经明确的是过氧化硝酸盐为NO与超氧阴离子反应的产物，是一种强氧化剂，它可以是氨基酸发生硝基化，从而对细胞膜、线粒体等造成损伤。因此硝酸酪氨酸是目前过氧化硝酸盐的一个公认的标志物（maker）。建议使用免疫组化方法检测硝基酪 ...

月亮欣 AFP甲胎蛋白的受体作用机理以及如何证明体内存在其受体最近复习时，遇到的一个历年考题，请各位高手帮助解答，万分感谢！月亮欣 自己顶啊月亮欣 没有人帮忙啊，有专家吗，恳请解答！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

ellen_hu 作为这方面的白痴，实在一团雾水，有没有高手指点一二，把其中的一般流程讲述一下，是我能够形成一个整体的印象，谢谢！！！！！急切！！！chenlinjie686 上nature或者annualreview 查GRK的综述文献...chenlinjie686 丝氨酸苏氨酸的点突变咯本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

为家为她 关于重亚硫酸盐测序后表述甲基化情况的“黑白圈图”是用什么软件做的？附件是从某文章中的截图，就是类似于该图的样子，多谢战友指点！slytjiaofei 这个似乎不需要专门的软件,也没有相关的软件,直接从word里面画就可以,我们所都是这样做的,也有相关SCI文章发表.为家为她 多谢，关于这个问题咨询过很多人，还是丁香园的力量大！非常感谢！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都 ...

sunyong_97 ① 证明A对B具有具有调控（上调）作用。② 构建B全长及系列缺失载体，寻找顺式反应元件。③ EMSA实验确定与顺式反应元件相结合的转录因子。④ 若转录因子为已知蛋白，通过CHIP实验在体内验证转录因子与顺式反应元件相结合。⑤ 通过RNA干扰与过表达转录因子进一步验证其对B表达的影响。(实验至此可结束)⑥ 若转录因子为未知蛋白，上接步骤③，进行蛋白质谱分析、氨基酸测序、分子量分析等。吴佰霖 不错，挺合理的了不过，要在预测方面要把握好 ...

andyzhoucang 本人想预测某一microRNA的靶标，通过targetscan，pictar 以及microrna这三个网站，每个网站预测出来靶标都有200多个，我想把其中共有的找出来，一定要一个一个对过去吗？有没现成的网站或软件可以把这三者的交集弄出来？吴佰霖 据我所知，是可以的。在DAINA这个网站里，楼主可以找一下onlove001 同问这个问题 请求指点。。谢谢。。。。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的 ...

dnazyme Sumoylation and human disease pathogenesis.Sarge KD, Park-Sarge OK.Trends Biochem Sci. 2009 Apr;34(4):200-5. Epub 2009 Mar 11. Review.PMID: 19282183翻译后修饰相对较新的一种。freecell Small ubiquitin-like modifier (SUMO) 蛋白的修饰及结合於调控细胞及病毒功能之研究：SUMO是近年来被发现的数种与ubi ...

zhl068 各位仁兄，小弟最近实验研究某基因在某种肿瘤中的表达情况，需要进行细胞系内RNAi，查阅文献，已经有人将该基因在别的器官的细胞系作过，那小弟在我要研究的细胞系中再做说明的问题能有意义吗，是否是重复实验，因实验数据将来要发SCI，特向各位求助，望赐教！！！先谢过了zhl068 freecell斑竹，谢谢你，但还是不太明白，能得出的结论无非也就是说这个基因在我要做的器官中是个癌基因或抑癌基因，和别人的结果一样，那 ...