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tianjiaoya 小弟最近要构建一个质粒，需要用到Gal4转录因子，有哪位大侠知道Gal4的UAS在那个质粒上？最好是容易买到的质粒啊，我查了好多质粒，都很难买到。或者能把Gal4的UAS的序列告诉我，这个上游激活序列应该不大，我可以去直接人工合成，然后参照别人那些构建成功的质粒的样子，把UAS插入到我的质粒中去，谢谢各位大侠了！！！song333 GAL4/UAS systemThe GAL4-UAS ectopic expres ...

糖嘻嘻 请问在哪个网站可以模拟多肽链蛋白质空间结构？dyykll2011 给你一个课件 好好看哦 蛋白质结构与功能预测（浙江大学沃森基因组科学研究院生信培训课件）dyykll2011 忘了传上去了cyzhgt 非常有用啊！！！modestbird 非常感谢 提供呢本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

kelizi 哪位大侠知道RET原癌基因的结构域，其相应的定位、功能？以及相应蛋白在细胞的定位及功能？如何调节？谢谢！如果有相应的文献资料更佳woxingwosu http://www.genecards.org/cgi-bin/carddisp.pl?gene=RET&search=ret应该比较全了，你在从里面的链接可以找到更多~~kelizi 非常感谢！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法 ...

霍一刀hxs 有没有一种基因数据库，输入癌症类别，即可以预测或查询出与此癌症相关的基因？多谢。吴佰霖 可能要多看综述了霍一刀hxs 吴佰霖 wrote:可能要多看综述了希望以后研究比较深了，可以有人建立这么一个数据库。suiyi223 可以参考美国NCCN指南，或者国内一些癌症相关的基因检测公司的说明书，不是很科研，但是还是可以一读的。例如广州益善公司霍一刀hxs suiyi223 wrote:可以参考美国NCCN指南，或者国内一些癌症 ...

heychristy 各位大侠 像高手请教两个问题，我以前帮过很多别人呢，希望高手们指导一下：一 我想做siRNA方面的实验，想直接合成siRNA，然后用脂质体转染，想请问是不是直接合成 21bp的正义链和反义链互补的siRNA，然后用不用退火使两者形成双链，是直接转染合成的两个单链呢 还是转染退火以后的双链siRNA？二 如果我想重cDNA用PCR获得目的基因，因为CDNA是不含有内含子的，但又含有5，端和3，端得非编码区，那我设计 ...

yangjing87 小妹真心求教：我用尼日利亚菌素配测细胞内pHi的标准溶液，想请教如何配制母液？我查了说明书也问了公司，nigericin溶于乙醇甲醇，完全不溶于水，没有测试过溶不溶于DMSO。因为我做的是活细胞，乙醇甲醇什么的对细胞有影响，都不能用啊。我真心请教这个可以用什么溶啊？多谢各位了everywhere 同问。我也打算用这东西，请高人帮忙。young名 可以溶于DMSO。soluble in chloroform , Alc ...

yongliangwang102 心肌组织中cAMP含量测定，请问哪位同学或老师做过？如何提取心肌组织cAMP？注意事项有哪些？谢谢！meiying3061 我要测细胞培养基内的CAMP，我也不会呢，你知道了，可不可以告诉我啊圆圆痴 楼主有没有找到好方法呀，分享一下拉！！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

clariceerica 笨人多作怪,刚开始试验周围没有师兄师姐的临床菜鸟,请原谅.1,NCBI查到的基因序列应该是cDNA把,有什么办法能以图片或什么易理解的方式显示它在总DNA中占什么位置么?比如之间的intron之类.有文献提到一个叫GRAIL的软件,不过好像过时了,下不到.2,那个cDNA有7k多长,翻译出的肽只900多,是因为翻译前剪切么,又有什么方法能看到cDNA里那些是coding区呢?3,分离外周血T ...

lyingfei 各位同仁：最近浏览了一些最新文献，计划选取某一miRNA 作为研究目标，讨论它与胃肠道肿瘤的关系。但仅有1篇文献简单提到过它在胃肠道肿瘤的表达异常。因此觉得立题是否成功的首要问题是该miRNA在该正常组织和肿瘤组织中表达是否有差异。如在正常和异常组织中均无表达，则该立题无意义。如有差异则故事可继续。因此，我请大家讨论在科研立题中，除了做必要的预实验来证明某一miRNA在正常和异常组织的表达差异，仅根 ...

springhello 转录起始位点是不是第一个外显子的第一个碱基？song333 yes版主zhujoker留言:不清楚不要妄下结论！woxingwosu 我觉得不一样，转录起始位点应该在第一个外显子的第一个碱基的上游。转录起始位点是DNA分子中开始RNA转录的位置，而第一个外显子是经过剪切后留下来的第一个外显子，一般来说，应该在其5’还有一段UTR序列（还是在转录起始位点的下游），因此一般来讲，转录起始位点应该在第一 ...

springhello 请问大家，转录起始位点是如何定位的？谢谢woxingwosu +1是指与新生RNA链第一个核苷酸相对应的DNA链上的碱基，即转录起始位点（TSS），一般都是A或者G开头。目前有一些软件可以预测TSS，网上搜索一下就有了。kongxingxing123 你可以做一下5‘-race实验来确定转录起始位点。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙 ...

xxzjcg 急求OX40基因序列，在gene bank 里没有明确的OX40基因序列woxingwosu 根据你的基因，我查了一下NCBI，上面有多个OX40（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene?term=OX40），我列举了其中一个，TNFRSF4 tumor necrosis factor receptor superfamily, member 4 (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/7293),其CD ...

keimon 要对MUT基因缺失的病进行检查，检测对象是个携带者，怀疑是大片段DNA缺失，求大片段外显子缺失的检查方法？ :Dwoxingwosu 呵呵，虽然不熟悉，我也来说说看法。是否可以通过PCR基因组来判断呢？设计一对引物，其中一个引物要在这个大片段上面，然后从对象提取基因组，做PCR，再与正常的基因组比较得到差异？或者是通过提RNA,RT-PCR,最后在用这一对引物去检测与正常的差别？或者干脆做western来检测蛋 ...

xin1027 如何将一个基因中的某个片段进行缺失呀？不知道用什么方法，具体怎么做？盼高手指点！！woxingwosu 你是希望什么缺失呀？直接从基因组上敲掉？还是在质粒上呀？能不能说清楚呀。。。xin1027 很多术语我不太清楚，就用个比方吧，假设说一段序列ATTGATCGAGGT，是PCR产物，需要将其中的ATCG除掉，只剩ATTGAGGT。这个应该怎么做。woxingwosu 呵呵，如果是这么少的碱基需要去掉，我想直接用点突变 ...

眉眉 有做β-arrestin2的吗？希望跟你学习学习，给我发悄悄话，谢谢！shanshanhu1986 我就在做，悲催amygdala 博士期间的课题就是关于这个的叶子doctor 有做关于β-arrestin2免疫组化的吗？求助本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

MENGSG 请教各位战友单核苷酸多态性（SNP）的含义。如CTLA +49(A/G)，是指一个基因位点碱基A换成了G；那么CTLA +49基因型 AA,是什么意思，是一个基因位点还是两个，还是指A没有换成G，仍然是A？其他如AG，GG是什么意思？很困惑！song333 SNP: "S" means single, one nucleotide, not two.AA: both allele is AAG: one allele is A, another allele is GGG: both allele is GMENGSG ...

daydayupmj 最近做了加入刺激因素后细胞AMPK的激活情况，我选择了0,30min ,60min,120min,240min提取蛋白，结果发现在60min 时总AMPK和P-AMPK表达都很弱，有几点不清楚，信号表达会在某个时间点突然降低，然后再回升吗,非磷酸化的蛋白也会随时间变化而变化吗，再有活化情况该如何比较daydayupmj 还有细胞在加入处理因素前需要同步化处理吗07yhguan daydayupmj wrote: ...

twinkling0 请教一下，我是新手，刚开始做miRNA荧光定量。内参是5sRNA，3个待测miRNA。逆转录用的茎环引物。请教，逆转录的时候，是将4种逆转录引物混合在一起，还是单管逆转录？混合逆转录，之前做预实验的时候，与单管相比差了2-3个CT。但是单管的话，会不会因为每管的逆转录效率不同，荧光PCR时，待测 miRNA和内参失去了可比性？另外，如果可以用混合逆转录的话，有没有什么逆转录酶或者盒子推荐？万分感谢！超马 单管 ...

perpetuity_love 求助关于组蛋白乙酰化的技术，用于RNAa，最好能有相关文献支持，做一个课题需要。54wws 你好！我近期也在做组蛋白乙酰化，买的是Epigentek公司的Epi Quik Tissue Acetyl-Histone H3 ChIP Kit（cat.#P-2012-48）。已经做了两个多月了，用了两个试剂盒，都没有结果，包括input。我用试剂盒提取出来的DNA产物跑胶、进行PCR，都没有结果（引物和体系用其他方法提取的 ...

haina_w 想把卡那基因从pET8b上克隆下来用作其他基因的筛选标记，但是有点儿不明白怎么克隆，引物该从哪个地方开始设计~是从pET8b的图谱上指示的那个kan基因的起始开始吗，那启动子是包含在里面的吗？？doctoryubing 如果新载体上有启动子，应该不需要包含启动子，只需要在kan基因的两端设计引物即可j19s87x 楼上说的没错，但是新载体上要是能启动卡那的启动子！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有 ...