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hysong 配制PBST时必须要用分子级别的吗？如果用的吐温-20是普通的化学纯的会对结果有影响吗？woxingwosu 个人觉得应该影响不大吧。lijingxin198506 应该影响不大。rencuiping 配制PBST时所用试剂如：NaCl 、Na2HPO4、KH2PO4、KCl均应为分析纯，所用吐温-20是普通的化学纯不会对实验结果有影响，只是需要注意 吐温-20的浓度不同，洗涤效果不同。一般我们实验室用0.1%的。江边的麦 ...

onlylittleghost 同标题，有遇到过这方面问题的同学吗？体内是camp-pka通路，体外（原代培养）是ERK1/2zaiju512 这个问题很值得思考holywater 恭喜你，可以发两篇文章如果找出为什么不同就是3篇本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

mushuixiaotaozi 想找一下Western blot 做的比较好的公司xhjggl 可以买个试剂盒，自己做，这样可以增加实践机会，上海生工就有。flyeryeung http://protein.dxy.cn/bbs/topic/18102961看看这个丁香园战友写的总结吧，很有帮助。mushuixiaotaozi O(∩_∩)O谢谢啦mushuixiaotaozi O(∩_∩)O谢谢本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资 ...

霍一刀hxs 各位战友，谁知道哪些网站或者软件可以预测RNA的二级结构？谢谢。吴佰霖 Mfold这个网站霍一刀hxs 吴佰霖 wrote:Mfold这个网站谢谢。投你一票。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

走过去 因为最近在查阅压力相关信号转导通路的文献，粗略的看了一下，似乎相关的文献不多，而且压力相关信号转导通路在听毛细胞的研究稍多一些，不知道哪位高手可以回答一下关于压力相关信号转导通路的研究，例如在充溢性尿失禁当中的进展等均可？谢谢，请拨冗指点。走过去 自己顶一下，再求助。zaiju512 我帮你顶一下本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shi ...

mushuixiaotaozi 麻烦问一下大家，如何分析real time PCR的结果，用的是SYBR Green的方法，做相对表达量的分析。结果怎么作图怎么描述？升高或者降低的倍数达到多少才有意义呢？wangke80 这个问题你查两篇国内或国外文献就知道了，或者直接百度一下。简单说就就是运用2-deltadeltaCT运算最后的结果和作图。不在于升高或降低多少倍数才有意义，而是统计是不是有意义。mushuixiaotaozi 我 ...

kakaxuan1984 寻找掌握microRNA慢病毒包装技术的科研人员合作，由于本人课题需要，需要构建microRNA慢病毒载体，因为是大鼠系统性用药，所以用量较大，您只需提供病毒包装即可，其他由我们来做，研究成果分享形式，有意者可邮件交流kakaxuan1984@126.comdujinghua 请问楼主慢病毒让公司包装的话，大鼠系统用药需要很大的病毒量，所有都让公司包装的吗？shylook dujinghua wro ...

gaoyongxin 请问谁有mir-21在癌症术后升高的文献或者其他miRNA升高的相关文献zhidan1728 我看到过miRNA21在癌症方法的综述，也看到过其在心血管方法的文献，不过你可以在pubmed上搜搜，应该就找得到。gaoyongxin 这一方面的文章我也看了很多 都是miR-21术后下调的 没有看到过上调的 但是我现在需要的是上调的文献的支持 其他miRNA术后上调的也可以dnazyme Upregulation of mi ...

crystalilixu 请教各位老师：关于真菌的问题，我用抗真菌药物处理后，真菌生长收到了抑制，电镜下真菌形态发生了变化，但是下一步的为了探索其可能的作用机制，从分子生物学领域可以作哪方面的工作啊？阳光海岛 这个问题的关键是你的“抗真菌药物”是什么，不是说他是什么名字什么结构，而是指它是一个化学合成新药，仿制药，还是中药提取物，又或者是其他物质。来源不同，研究的方法就不太一样。对于化学合成的新药，一般来说现在都是靶向药物 ...

yaojun2006whu 有些公司的一抗介绍明确注明可以用于“流式检测”某蛋白磷酸化或某磷酸化蛋白表达水平，但用流式细胞术检测细胞内某蛋白磷酸化或某磷酸化蛋白表达水平对一抗有特殊要求吗？是不是未标明可用于流式检测的一抗，就不能用于流式检测呢？请教园中兄弟姐妹，比较急，谢谢！kern6549 流式检测胞内磷酸化蛋白一种抗体就够了，就是荧光素偶联的该磷酸化蛋白的抗体，不需要一抗、二抗、三抗什么的。yaojun2006whu ...

sophie777 请教下！有谁知道蛋白酶抑制剂是和刺激因子一起加到细胞里还在加刺激因子之前加？kern6549 刺激前1小时加。zhaozhuozhao 请教楼上，抑制剂在刺激前1小时加后，再单独加刺激还是抑制剂与刺激同时再刺激啊？谢谢kern6549 1小时后直接加刺激剂就可以了。不要换液。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongc ...

jingyue777 我最近做了变形链球菌超声提取上清蛋白的实验，离心后取上清，测定蛋白浓度为0.81mg/ml，我想请问有没有哪位做过类似的实验，如何判断超声破壁是否成功？一般提取的上清蛋白浓度为多少是正常的？谢谢woxingwosu 没有做过变形链球菌，只做过大肠杆菌的，不知道是不是一样的道理。在大肠杆菌中，只要超声到看起来超声液黏着（效果好可能会澄清）就算是可以。不过这个浓度是不是有点低？或者你的超声液加得比较多所 ...

allenylq 各位战友，最近投了一篇文章，reviewer的提了一个意见：“Antibodies to GPCRs are notoriously unreliable, and this data would be strengthened by further demonstrating presence of the receptor message in this cells , and/or showing specificity of the antibody used.”我是用western blot检测该受体的 ...

zitong1983 如题，近期可能研究某基因3’-UTR对mRNA稳定性的影响，有没有软件或者在线工具可以预测与3‘-UTR结合的protein？谢谢freecell 参考此文： http://www.springerlink.com/content/q877h6000762p0h2/#section=794249&page=1zitong1983 freecell wrote:参考此文： http://www.springerlink.com/ ...

cdduanshui 谢谢斑竹和各位老师一直以来的帮助，在你们的帮助下我少走了很多弯路，还是提一个可能内行人会觉得很傻的问题：ras通路激活后最终是作用在哪里?就如这张图片上，如果是激活抑凋亡，那细胞是通过什么方法来抑制凋亡的？书上只讲了细胞质机构的改变，不是很明白。就比如说会不会最终作用于微丝或是微管等细胞骨架的?或者还有那些所谓的细胞质机构？麻烦老师讲一下，谢谢吴佰霖 的确，目前很多信号通路图能把一个完整的关键分 ...

已寒 我现在在做beta-catenin的western blot，用的是ABCAM的抗体,但是做出来的beta-catenin总是有两条条带，想请教一下各位，beta-catenin有分不同亚型么？或者有磷酸化或非磷酸化之分么？还是有别的原因？感激不尽！！zqm1115 请问你是在做干细胞相关研究吗？已寒 不是干细胞，是一株肿瘤细胞keavin521 不是高手， 说说我的看法1。 2个bands 出来也没关系， 在你要的分子量（85kd？)的地方的有 ...

zcx7792 哪些人和小鼠的肿瘤细胞系表达TLR4,MYD88,TBK1？哪位高手知道？不甚感激。zcx7792 自己顶一下lagopsis SKOV3livelyding 胰腺癌细胞株zcx7792 非常感谢二位本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

amei19872010 紧急咨询请哪位大虾帮我区分一下这几个词肿瘤标记物基因诊断标记物探针标记物woxingwosu 肿瘤标记物：肿瘤细胞产生和释放的某种物质，常以抗原、酶、激素等代谢产物的形式存在于肿瘤细胞内或宿主体液中，根据其生化或免疫特性可以识别或诊断肿瘤。肿瘤细胞的生物化学性质及其代谢异常，因此在肿瘤病人的体液、排除物及组织中出现质或量上改变的物质，这些就是肿瘤标记物。包括甲胎蛋白（AFP），癌胚抗原（CEA） ...

zoufly 初步实验知道了药物对细胞的增殖有抑制作用，接下来如何知道药物对细胞的这种作用是通过信号转导的哪一条通路发生作用的？是不是先用通路的信号转导的工具药先实验的？然后再做磷酸化蛋白的表达？如何是这样的话，哪里可以找到比较全的工具药名字？（是不是要激动剂和拮抗剂一起使用）。zoufly 怎么没有人回复，指点我一下？ronaldo_zj 楼主您好，我也是做药物对肿瘤细胞的增殖抑制作用的，对于您的问题，我有以下理解：1.既 ...

baibai17 今天开题，导师问了个问题：ki67为什么叫ki67？当场傻住······恳请各位老师指教！谢谢。keavin521 The Ki-67 protein was originally defined by the prototype monoclonal antibody Ki-67 (Gerdes et al., 1983),which was generated by immunizing mice with nucleiof the Hodgkin lymphoma cell line L428. The name is de ...