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做过病理实验的人都知道，实验看似容易，但真想把它做好，还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。我从事病理实验已有 6 年多了，在这段时间里，我做过许许多多病理相关实验，刚开始啥也不懂，一味按照网上操作流程来做，但做的结果往往并不是十分理想，最终结果未能达到预期的效果。经过一段时间的浏览和学习，在论坛内学习、请教，并结合实践操作，我经历了初级——查找资料和摸索方法；中级——问题求助和不断总结；高级——难题解答和经验分享这三个阶段 ...

做了很久的 WB（western blot），走了很多弯路，其实发现 WB 想要做好并不难，总结了 WB 实验中可能会遇到的问题，分析了可能的原因及对应的解决方案，希望能成为你实验成功的基石。问题 1：转膜不充分(1) 膜没有完全均匀湿透使用 100% methanol 浸透膜。(2) 靶蛋白分子量小于 10 000选择小孔径的膜，缩短转移时间。(3) 靶蛋白等电点等于或接近转移缓冲液 pH 值可尝试使用其他缓冲液如 CAPS 缓冲液（pH 10.5) 或使用低 pH 值缓冲液如乙酸缓冲液。(4) 甲醇浓度过高过高 ...

生物界有一种说法，女博士，学名：学霸；花名：李莫愁。为何呢？且看图。论学历，论经验，论内涵，论...... 小胜！论年龄，论长相..... 完败..... 对年轻妹纸的热情这一点来看，男人是专一的。旺旺：霸霸，张博士不行，要不要考虑.....霸霸：滚！我的 Jack 你不懂。其实，女博士也可以很淑女，不是传说中的李莫愁，那都是黑我们。女博士也很细腻，尤其生命学科的，对生命比别人多一份理解，也多一份感动。女博士的感情道路：道路是曲折的，只要最后结局是幸福的，曲折又怎样？好 ...

在茫茫人海中找到文献不容易，没有早一步，也没有晚一步，正好找到了，那真是运气加努力的结果，且看丁香园中级站友及版主总结的文献搜索要点，助你早日找到对的文献。要充分分利用各种文献资源, 尤其是免费资源。收费数据库中最佳的非 Web of Science 莫属了，免费数据库当然以 PubMed 最为出名。文献检索的其他免费资源将另外介绍；2. 要掌握各个数据库对检索表达式的书写要求，虽大同小异，但常不通用。具体要求在此不作介绍，可阅读数据库的帮助文件 ...

小林子属于后知后觉的实验室生物，不，应该是实验室苦力。但要一个临床医来做科研，结果就总是是这么苦逼。小林子的课题总是慢半拍，查了大半天找了个基因 A 准备做，但灭 high 王李莫愁博士查了下，前两天刚有人已经发过文章了。小林子又找了基因 B 准备大显身手，但又被李博告知两年前已经被做过了。这次他学得聪明了点，一下子找了俩基因，C 和 D，但也被全歼……追研究的文章啊，咋就这么难么？「文献啊，你咋就这么白富美呢，叫老衲怎么来追你啊？！」小林子发自内心地 ...

学生物，自然就离不开各种生物软件，掌握这些软件的使用是基础。使用过程中，难免会遇到各式各样的问题，如何针对不同软件的特点，择优选用以事半功倍解决问题？鉴于此，特整理此帖，希望对新手有用。Q1：怎么查找序列保守区？A1：很多人查找序列保守区，一般通过序列多重比对后，肉眼判断序列保守区，但此法难免太主观，不具重复性，且选择的保守区无法受统计上的显著性检验。其实，实现这一目的，可以使用DnaSP-- 「Analysis」 --「Cons ...

Uhrf1（或者被称为 Np95）是一个 DNA 甲基化和组蛋白泛素化的调控因子，在胚胎发育（embryogenesis）以及肿瘤发生（tumorigenesis）过程中有着重要作用。近日，上海中科院生化细胞所刘小龙课题组联合上海科技大学以及中国科学与技术大学在国际权威期刊 Cell 子刊 Cell Reports 上发表题为 Uhrf1 Controls iNKT Cell Survival and Differentiation through the Akt-mTOR Axis ...

Q：SDS－PAGE 电泳的基本原理？A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进 SDS（十二烷基硫酸钠）， SDS 会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合 SDS 的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此 SDS 多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与 1.4 g 去污剂结合。当分子量在 15KD 到 200KD 之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K ...

《生化危机》系列电影中原本用于军事目的研发的 T 病毒缘何将大多数人类感染为「丧尸」而女主角不但安然无恙而且获得超能力？究竟这背后蕴含了什么生命科学原理？ T 病毒，全称为「Tyrant」（暴君）。是一种新型的 RNA 病毒，是以早期发现的始祖病毒为基础产生的变异体。强化了重新组合生物遗传因子的特性，以开发生物兵器为目的而诞生的恶魔产品。但是一部分的人类无法适应它的突变性而成为恐怖的丧尸。而且它所造成的二次感染竟产生了各种生物的变异。什 ...

为什么你不介意其他人握着你妻子无毛的手掌，但介意他人摸她有毛的手背？这当然违背我国俗话「手心、手背都是肉」所强调的手掌和手背无差别，俗话流行乃因我们知识有限。要验证手心手背有无差别，可以「以手试法」：在握手掌时抚摸对方的手背几次，看看对方和旁观者会如何反应，如果当场不遭暴力，可能人家以后也怕与你交往。手掌、手背有何区别？为什么可以通过抚摸安慰人和动物？昨天出版的学术刊物《神经元》发表的文章，对此方面有迄今最详细的述评。 ...

三年博士研究生生活，有很多感触，希望这些经历和想法能对大家有一点点的帮助。一、 有关文献阅读和检索对于刚刚进实验室的我们来说，检索和阅读文献是首先必须要认真做好的，这是整个研究生学习阶段最重要的一步。老师在实验室所推行的 weekly report 是非常好的培养方法，如果每一位新进实验室的研究生在整个学习阶段都能够这样执行，收获将是非常大的。下面是一些具体的做法。1、 中文文献：刚进实验室的时候，很多人都会感到很茫然，内心里有很 ...

又到一年毕业季，找工作的同学也是几家欢喜几家愁，国内生物是产业支撑的专业，很多人求职坎坷路上，有逆袭成功，也有一路溃败，不管如何，读之前要想清楚，读了也别太泄气，一个专业毁不了一个人，你学到的也可能在其他地方用得到。本文梳理了饶毅教授在北大的《生物研究生出路何在》讲座上的内容，不论现在在读或将读生物，对你都有参考意义。你如何看现在的生物研究生？1、现在很多生物实验室的条件太好了。国家的研究经费以每年 20% 的幅度增长，仪器 ...

英语谓语动词时态共有 16 种，在英文科技论文中用得较为频繁的主要有三种：即一般现在时、一般过去时和将来时。正确地使用动词时态是科研写作的基本功，我们在撰写英文论文时，如不能正确选用时态，常常会改变文章所要表达的意思，从而影响评审专家与读者的理解。一篇典型的科技论文有一个基本的框架结构：Abstract （综述科研背景，提出研究的问题和假设 （hypothesis）），Materials and Methods （描述自己的研究方法），Re ...

读科研论文是一件很简单、但也很深奥的事情。一般的学生常常满足于读懂、读透一篇好的论文，优秀的学生则会举一反三、通过查找 references 纵深了解整个领域的历史、现状，并展望该领域未来的可能进展。可是要这样并不容易，哪怕是大牛科学家一开始也做不到阅读专业英文文章游刃有余，那该如何养成和提高呢？以下 8 条建议来自施一公院士，供各位参考。1．每周关注《科学》和《自然》（生命科学界的学生还应该留心《细胞》）。如果时间有限，每周花一个小时 ...

来了？请不要问我是不是狗的主人，也不要问我是不是大夫，这是很粗鲁很伤感情的。文章有点长，麻烦耐心看完，如果觉得好，分享就是对我最大的鼓励。你熟知的抗生素不治感冒感冒是一种上呼吸道感染，是由病毒引起的，所以只能杀灭细菌的抗生素（见维基百科）对感冒不起作用。在治疗单纯的感冒中使用抗生素起不到任何治疗作用，而且可能增加不良反应和肠道细菌的耐药情况，有害无利。即使在患感冒的同时发生了细菌感染，需要使用抗生素，也必须由医生决 ...

小明是一名苦逼的实验室管理员，他每天都要被这样那样的问题逼疯：「小明，你不是才买了一批 75 cm 的细胞培养瓶，怎么又要买？」「小明，我刚发现上回买的一批药剂都还没拆封都过期了，怎么回事？」「小明，这个月的经费花费又要超标了，你怎么都不控制下？」「老板，这个…我…我也不太清楚」。「你是管家，怎么能不知道？心思都花哪里去了？」每每面对 BOSS 的质疑和追问，小明只能委屈地低下头，不言语。一个人要管几百上千种试剂耗材，就算记忆力再好也没办法做到全都 ...

pubmed 检索到文章，有的并未给出全文下载链接，此时我们就有必要了解该文章是收录于哪个期刊，以及这个期刊的出版商等信息。由此我们可以了解该文章被收录于哪个期刊，这个期刊又收录于哪个综合数据库当中。经过摸索，最近又发现一种更好的便捷操作查找文献收录期刊详情的办法。例如，要了解 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8815566# 这个文章被收录于哪个期刊，及期刊的具体信息，可按下图所示操作：从中 ...

俄罗斯新西伯利亚细胞学和遗传学研究所为纪念生物学研究的无名英雄——实验鼠，建立一个纪念碑。该雕塑由艺术家 Andrew Kharkevich 设计而成，描绘了一只鼠科学家正在编织一个 DNA 链。许多学校及研究所内也有不少类似的雕塑、墓碑，纪念的同时也是在链接那些实验岁月。看到实验鼠，会不会想起手刃过的小白鼠、兔子？会不会想起满实验室抓老鼠的日子？会不会想起乌拉的味道、酒精消毒的味道？不管实验是否已离你远去，只要做过，再读到，总会有似 ...

Western Blot 操作步骤多，每一步的失误都会造成全盘失败。抗体的选择对于国内的大多数实验室来讲，做 western blot 实验，选择抗体是个头疼的问题。原因很简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区的实验者而言，感触尤深。在这五年的 western blot 实验历程里，我先后用过进口抗体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。进口抗体一般不会出现闪失：abcam 品种全，质量过硬，但价高（3 ...

每一个做过分子克隆的人，都会经历过对条带、对转化子望眼欲穿的时刻，除了攒人品，每一步的细节也很重要。PCR 引物的设计通俗地说，很多人用了很多软件设计来设计去，又是考虑发夹结构，又是考虑二聚体，又是考虑 Tm 值，折腾来折腾去，但其实没那么复杂。首先保证你要的基因是正确的，这个可以从 NCBI 中找到，大部分是没问题的，然后再找到起始密码子，从那开始大概上游取 20-27bp，加上酶切位点，加上保护碱基（一般 3 个）就是上游引物，取后 20-27bp 碱基， ...