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他们说:能管好实验室的方式只有这一种

小明是一名苦逼的实验室管理员,他每天都要被这样那样的问题逼疯:「小明,你不是才买了一批 75 cm 的细胞培养瓶,怎么又要买?」「小明,我刚发现上回买的一批药剂都还没拆封都过期了,怎么回事?」「小明,这个月的经费花费又要超标了,你怎么都不控制下?」「老板,这个…我…我也不太清楚」。「你是管家,怎么能不知道?心思都花哪里去了?」每每面对 BOSS 的质疑和追问,小明只能委屈地低下头,不言语。一个人要管几百上千种试剂耗材,就算记忆力再好也没办法做到全都 ...

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pubmed 中查文献全文收录期刊信息的简洁方法

pubmed 检索到文章,有的并未给出全文下载链接,此时我们就有必要了解该文章是收录于哪个期刊,以及这个期刊的出版商等信息。由此我们可以了解该文章被收录于哪个期刊,这个期刊又收录于哪个综合数据库当中。经过摸索,最近又发现一种更好的便捷操作查找文献收录期刊详情的办法。例如,要了解 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8815566# 这个文章被收录于哪个期刊,及期刊的具体信息,可按下图所示操作:从中 ...

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八一八我和实验的故事

俄罗斯新西伯利亚细胞学和遗传学研究所为纪念生物学研究的无名英雄——实验鼠,建立一个纪念碑。该雕塑由艺术家 Andrew Kharkevich 设计而成,描绘了一只鼠科学家正在编织一个 DNA 链。许多学校及研究所内也有不少类似的雕塑、墓碑,纪念的同时也是在链接那些实验岁月。看到实验鼠,会不会想起手刃过的小白鼠、兔子?会不会想起满实验室抓老鼠的日子?会不会想起乌拉的味道、酒精消毒的味道?不管实验是否已离你远去,只要做过,再读到,总会有似 ...

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穷人的劳斯莱斯—五年 western blot 体会

Western Blot 操作步骤多,每一步的失误都会造成全盘失败。抗体的选择对于国内的大多数实验室来讲,做 western blot 实验,选择抗体是个头疼的问题。原因很简单,买进口抗体捉襟见肘,买国产抗体得需要大无畏的勇气,对于我所在的兰州地区的实验者而言,感触尤深。在这五年的 western blot 实验历程里,我先后用过进口抗体,进口抗体国内分装包装,国产抗体,质量良莠不齐。进口抗体一般不会出现闪失:abcam 品种全,质量过硬,但价高(3 ...

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7 年分子克隆经验总结

每一个做过分子克隆的人,都会经历过对条带、对转化子望眼欲穿的时刻,除了攒人品,每一步的细节也很重要。PCR 引物的设计通俗地说,很多人用了很多软件设计来设计去,又是考虑发夹结构,又是考虑二聚体,又是考虑 Tm 值,折腾来折腾去,但其实没那么复杂。首先保证你要的基因是正确的,这个可以从 NCBI 中找到,大部分是没问题的,然后再找到起始密码子,从那开始大概上游取 20-27bp,加上酶切位点,加上保护碱基(一般 3 个)就是上游引物,取后 20-27bp 碱基, ...

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你身边有毒有害的试剂

我们大部分人都知道无机酸和无机碱的腐蚀性,并能够有意识地加以防护; 通常情况下,也并不会发生误食的事件,因此我们着重提醒经呼吸道吸收和皮肤接触吸收的毒性物质。其中部分操作,除了手套,还要戴上护目镜。没有列出并不一定说明该物质是安全的,因为目前我们所能够了解的还很有限。● 苯甲基磺酰氟(PMSF):是一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂。它对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常大的破坏性。可因吸入、咽下或皮肤吸收而致命。戴合适的手套和安全 ...

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如何拯救被污染的细胞?

夏天到了,细胞更容易被污染,很多养细胞的朋友在这方面困惑颇多,今天针对贴壁生长的细胞谈谈。 在讨论之前,大家首先要有一个概念,即洁净区,并不是没有细菌,而是细菌的数量非常少,国家标准 100 级的洁净标准是浮游菌数不得超过 5 个每立方米,沉降菌数不得超过 1 个每培养皿,而国外的标准比我国的还要高一点,要求的数量更少。 所以在我们的洁净操作台里,并不是真正一个细菌都没有的,所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌 ...

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如何倒平板?

在生物实验中相信大家都经常要倒平板,细菌培养,分子生物学实验等等。医药企业中倒平板更是家常便饭,环境监测、水监测、微生物检查等,初学者往往都倒不好,我们总结几点小技巧供大家参考。一、防止倒皿时的冷凝有经验的都知道,手心不烫手背烫,这是一个经验数据,此时的温度在 45 度左右,最适合倒平板。如果要连续倒多个皿,尤其是在冬天往往容易凝固,一旦凝固则需要再加热到较高温度才能融化(玻璃体的特性)。所以建议此时有个 50 度的恒温水浴开着,随 ...

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SCI-HUB 使用指南

首先键入sci-hub.io进入主页,发现其搜文模式和其他引擎有点不一样,它可以通过URL(源网址)、DOI(如国际期刊号)、PMID、字符搜索。ps:用某度搜“Sci-hub”可能会有点复杂,直接键入网址:sci-hub.io进入主页检索。先用大家熟悉的关键词搜索,这儿管叫字符搜索,搜索关键词mapk咦!转到谷歌学术了然后就顺手点了第一条,Paper就到碗里来了!然后就打算试试UCL(网址)和DOI(编号)。进入Nature ...

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致青春:研究不死,只是延毕

熊掌和鱼肉不可兼得也努力吧,骚年!观世音菩萨,玉皇大帝,如来佛祖,上帝,圣母玛利亚,春哥......保佑我考上你是电 你是光 你是唯一的神话 我只爱你 YOU ARE MY SUPERSTAR!!啦啦啦~~~.春眠不觉晓,睡眠质量好我要做实验!!师兄师姐,舍不得你了啊~~~呜呜(窃喜)我是超人我怕谁?!刀尖上舞蹈,那绝对要的是心理素质时时刻刻为你转个不停呜呜呜呜暴漫上很屌的样子好吧,我承认我是暴漫粉丝!

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其实没那么复杂:疑难样本核酸提取指南

相信大家在研究过程中总会遇到一些「奇葩」样本,他们就像拦路虎一样,总是在找我们的麻烦。DNA 提取得率低,RNA 提出总是降解,这些样本躲又躲不开,绕又绕不过,提还提不出来简直就是烦死个人!其实没那么复杂,静下心来仔细思考一下提取过程就能理出一条线索,解决这个问题。首先是样本的裂解或者破碎,很多疑难样本在这一步就已经挡在了我们的面前,比如某些植物的根部以及较为坚韧的茎部等。这些样本破碎起来特别困难,尤其是当大量样品需要处 ...

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基于抗体标记的病毒快速定量系统

病毒既危害人类健康,但也可以作为一种工具(如病毒疫苗)治疗疾病,因此近年来对病毒的研究越来越受到重视。然而,科学家们遇到了不少挑战,其中最主要的就是一直缺乏实时的、在线的分析方法,用于以病毒为直接产物或者病毒为载体的蛋白表达系统的研发和生产中。现在,我们找到了一种检测病毒的新方法,应用 ViroTag 检测系统,只需要标记粗制或纯化后的样品,用 Virus Counter3100 6 min 即可获得高精度的病毒定量结果。快速追踪生产体系 ...

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别说爱情不靠谱,她靠的是激素

苯基乙胺结构式苯基乙胺——让你坠入爱河PEA 诱发爱情,当你对某人「来电」时,就是血液中 PEA 增加的结果。它实际上是一种人体自然合成的一种兴奋剂,让人产生兴奋感,使人觉得心情愉悦、精力充沛和勇敢自信。在 PEA 的作用下,心跳和呼吸都开始加速,手心出汗,脸红,瞳孔放大。在面临危险和恐惧时,PEA 也会大量分泌,这就是男孩喜欢约女孩看恐怖片的道理了。虽然 PEA 是在下丘脑中自然合成的,巧克力中也含有不少 PEA,可以说是 PEA 含量最丰富的食物了,怪不得巧 ...

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人靠衣装,文章靠包装

很多人研究工作做得很棒,却呈现不好,让原本辛辛苦苦得来的结果没有得到应有的表现。仔细分析 C-N-S 系列的大牛文章,不难发现,这些高水平论文的图表质量也高人一筹。因此,合理的「包装」自己的实验结果非常重要。本文重点介绍图和表的包装,更多包装技巧见原文。一、图1. 首先对文章中图片的逻辑关系要十分清楚,针对 results 部分排好序,而且开始的时候要多准备一点图片,挑出几张拍摄效果好的,在投稿的时候,除了你认为最好的那张图以外,还可以放 ...

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手把手教你如何查找质粒图谱

方法一:使用 Vector NT 软件invitrogen 公司的这款软件绝对是分子生物学虫子们的福音,要想对质粒图谱了解更直观,安装这款软件是非常必要的。这款软件的软件包里面会包括 invitrogen 公司的所有质粒图谱信息和其他比较常见和经典的质粒图谱。方法二:查找质粒图谱的网站1.Vector Database(addgene)地址:http://www.addgene.org/这个网站很页面很人性化,直入主题,以前叫做 lablife, ...

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无表面活性剂的膜蛋白提取方法

膜蛋白具有许多重要的细胞功能,对生物体存在至关重要。他们具有超过 60% 的药物靶点,占细胞总蛋白的 20%-30%。膜蛋白包括完整的膜蛋白,跨膜蛋白和外周膜蛋白。膜蛋白或者附着在脂质双分子层上或者通过疏水,离子或其他非共价与膜周边的完整蛋白结合。 使用表面活性剂进行质膜蛋白分离有可能破坏蛋白质-蛋白质相互作用,改变膜蛋白的拓扑结构。在一些下游应用中,例如膜蛋白 IP,Co-IP,酶检测,质谱分析实验,使用无表面活性剂的方法分离质膜蛋白 ...

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如何从脂肪组织中提取总蛋白?

从培养的细胞和组织中提取总蛋白是实验室非常常见的实验步骤,从大多数类型的细胞和组织中提取总蛋白比较容易,但是从脂肪组织中提取高质量和高浓度蛋白质是非常困难的。脂肪组织有白色和棕色脂肪两种类型,被称为白色脂肪组织(WAT)和棕色脂肪组织(BAT)。脂肪组织中含有许多脂滴,蛋白质含量小于细胞总数的 2%。低蛋白含量使得从脂肪中分离高浓度蛋白极具挑战性。以下是几种从脂肪组织中提取蛋白的方法:A.RIPA 缓冲液提取法:脂肪组织 ...

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WB 或 IP 样品制备的技术指导

在 WB 和 IP 实验中,破碎细胞或组织与选择和配制裂解液一样重要。比起一些更软的组织(如脑组织),在准备 WB 或 IP 的样品时,紧密的纤维组织(如肌肉组织)需要更剧烈的方法;对于培养的原代细胞或细胞系,在准备 WB 和 IP 的样品时需要一定的机械搅拌去提取蛋白。机械破碎样品常规的方法和设备如下:组织高速匀浆仪通常破碎体积大的植物或者动物组织需要用可旋转、带有刀片的匀浆仪或者搅拌器 .这些仪器通常通过一个电动的马达带动不锈钢可旋转切割刀片,可以从顶部或者 ...

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投稿有关信件的写法

一、投稿信1. Dear Dr. Defendi ML:I am sending a manuscript entitled “” by – which I should like to submit for possible publication in the journal of - .Yours sincerely2. Dear Dr. A:Enclosed is a manuscript entitled “” by sb, which we are submitting for publication in the journal of - . We have chosen this journal because it ...

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