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在ELISA实验结束后，我们得到的是经酶标仪得出的标准品以及样本的OD值。其中，标准品的浓度已知，我们可以利用标准品的OD值及其相对应的浓度，以 OD值为横坐标，浓度为纵坐标，做一条标准曲线，并用公式表示出来。这样，我们把样本的OD值以X值代入，便可求出Y值，即样本浓度。1、首先，将数据整理好输入Excel，分别为经酶标仪读出标准品的OD值及其对应的浓度值。2、拖动鼠标选取完成的数据区，并点击图表向导，在图表类型中选“X ...

Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。深圳子科生物技术部主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术：一、 原理与 Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二 ...

就在上周末，我曾经就读的 6201 实验室大聚会，有幸见到了实验室里的大师兄大师姐们。他们中，有从国外回来，也有从祖国各个角落赶回来。师兄师姐介绍了他们目前从事的工作以及自己的人生感悟。我一边仔细听，一边记录。我发现有 1/3 的人最后留在了高校，有 1/3 的人去了企业做科研，还有 1/3 的人转行或待业。他们在讲述的时候，脸上都洋溢着幸福的笑容，丝毫看不出他们对生物有多大的抱怨。其中有多个师姐多次表达了：越努力越幸运。任何一种经历都是财富。少想 ...

细胞制作

1. 细胞污染的种类细胞污染一般可分为微生物污染和真核生物污染。其中微生物污染包括真菌和酵母、细菌、支原体等。而真核生物一般是细胞系间的交叉污染。细菌、真菌或酵母的污染很容易辨识，直接可通过培养基颜色变化、显微镜下观察便可判断。如细菌污染后细胞培养基变黄色，而且镜下有小黑点，且有规律的运动。而酵母污染后培养基变紫色，镜下可见透明、且连成一串的圆形。但如果是支原体污染的话，由于最开始支原体生长缓慢，而且显微镜下难以看出， ...

作者：聊城市第三人民医院 吴怀英连续几年消毒剂消毒后的物表监测、使用中消毒剂染菌量监测均提示无菌生长，真做的这么好吗？非也！真实情况是没有加入相应中和剂，中和剂起什么作用呢？下面为你梳理。 本文来自 中和剂—在微生物杀灭试验中，用以消除实验微生物与消毒剂的混悬液中，以及微生物表面上残留的消毒剂，使其失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂。那么为什么一定要加入中和剂？ 对消毒效果进行监测时，在抽样的同时会将连同残余消毒剂一起被采集到样 ...

做细胞生物学实验，细胞铺板大概是最常见的一个实验了。但是有很多人不是很得要领，铺得不是均匀： 要么中间密周围稀，要么周围密中间秃顶。现分享我的实验技巧。一般 96 孔板我每孔是加 100 微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部加入。加完半边板后，将未加的细胞悬液混一下，再继续加剩余的半边板子。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘。注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时 ...

三年博士研究生生活，有很多感触，希望我的一些经历和想法能对大家有一点点的帮助。1.有关文献阅读和检索对于刚刚进实验室的我们来说，检索和阅读文献是首先必须要认真做好的，这是整个研究生学习阶段最重要的一步。老师在实验室所推行的 weekly report 是非常好的培养方法，如果每一位新进实验室的研究生在整个学习阶段都能够这样执行，收获将是非常大的。下面是一些具体的做法。中文文献刚进实验室的时候，很多人都会感到很茫然，内心里 ...

国内杂志对图片的要求低，国外杂志尤其是影响因子较高（IF3）对图片要求比较高。按杂志要求保存实验结果图非常重要，今天就随我一起看看。图片保存的格式常见的图片格式有：TIFF、JPG、PCD、PSD、PCX、EPS、GIF、BMP 等，其中 TIFF 彩色、黑白位图，EPS 矢量图为印刷前输出软件常用图形格式，图片尽量采用这三种格式。文章被接收后杂志对图片的要求：主流要求图片格式为 EPS 和 TIFF 等。第 1 次投稿的时候对图片的要求（即审稿阶段）：在投稿 ...

面对着忙碌的实验、海量文献、高难度的撰写与发表论文和激烈的职位竞争时，年轻科学家可能对未来的职业发展有所畏惧。《科学》职业专栏 2015 年 5 月 12 日发表一篇来自西班牙巴斯克地区大学 Pedro Miguel Echenique 教授的演讲稿，值得年轻科学家参考。Echenique 教授认为，在激烈竞争环境中以及职业前景不明朗的情况下，容易让年轻科学家忘记选择科研的初衷，对职业生涯过分焦虑更强化了这一趋势，因为这容易让科学家失去科学的乐趣，减少 ...

科研思路来自哪里？大多数研究人员是来自阅读文献，如果没有自己的研究基础，甚至没有基本的研究积累，从文献中找思路几乎是开玩笑。比较理想的方法是立足于一个阵地，放眼国际进展，从宏观上去把握研究热点，借鉴其他领域的进展，走出自己的特色。最理想的是通过自己的研究，经常在研究中会发现一些意外，这些结果或者是因为操作失误，或者潜藏着本质的东西，把这些意外转化为自己的新发现，就是比较好的思路。如果仅仅是为晋升或锻炼一下自己的科 ...

每次讲这个都能体会老年人教导年轻人人生经验时候的心情。眼看着年轻人要重蹈覆辙，可就是不听老夫用血泪换来的人生经验，也罢，年轻人是有资本走弯路的。原则一：先读 Protocol。专业术语叫做 RTFM：Read The Fucking Manual。商业化的试剂都有成熟的 Protocol，在第一次使用之前，先把自己脑子里关于这个产品的知识全扔掉，认真读一次 Protocol。注意我说的是认真读，一字一字读。按照 Protocol 说的做，不要相信自 ...

根据自己的实验体会，总结做好 WB 的一些心得，希望对你实验有帮助。围绕着实验的每个步骤展开叙述，这样可能更具体更好理解。配胶该部分较为重要的是配制凝胶时要充分混匀，此外应保证试剂的新鲜。常出现的问题有：A. 凝胶出现花纹：此时应检查原料中过硫酸铵（AP）粉末是否受潮。B. 凝胶聚合时间较长：聚合时间由 AP 以及 TEMED 决定，通常在 30 min 左右，AP 不新鲜会导致聚合变慢。此外还需注意环境的温度也很重要，气温较低时胶是会凝得慢一些，必要时可适当增加 AP ...

最近热播的《左耳》里有一段话戳中了很多刚研究生或博士生毕业的童鞋，它是这样说的：对一个男人来说，最无能为力的事儿就是在最没有物质能力的年纪，碰见了最想照顾一生的姑娘。对一个女人来说，最遗憾的莫过于在最好的年纪遇到了等不起的人。其实，女人还有更无奈的是在等不起的年龄遇到了无能为力的男人。而男人更悲催的是在拥有物质的时候却没有了单纯真心想和你过一辈子的好女人。写在前面是为序。且看汪老师支招给广大硕博毕业生，暂时不说 ...

鉴于你未来可能会成为一名伟大的科学家，我得和你认真谈谈怎么做实验记录。文章翻译自《Laboratory record keeping: Keeping a propernotebook is critical to establishing yourself as the inventor》，如果你想看原文，可以与我联系。要有一本可以装订并有编号的记录本。在首页列出各实验题目的索引。所有条目须用永久性墨水笔进行书写，最好只用一种颜色。更改必需签名，并署上日期。简 ...

qPCR 的数据相对定量分析其实很简单。我做了很多的 qPCR 实验，也看了很多的资料，包括 Nature protocol，AB 官方的分析教程，MIQE，甚至包括一些商业化软件使用的教程及教程里面记述的原理。我在这里跟大家分享一下自己的经验，最常用、最普遍的相对定量方法就是 2^-△△Ct 法。首先将一次实验的所有基因 Ct 值整理好，之后用每一组样本自身的目的基因 Ct 值减去自身内参基因 Ct 值，得到的数就是 △Ct。换成公式就是：△Ct=Ct（目的基因）-Ct（内参基 ...

肿瘤标志物在1978年就被发现了，它是指在血液、体液及组织中可检测到的与肿瘤相关的物质，达到一定水平时，可反映某些肿瘤的存在。 血清肿瘤标志物分类： 一个最广谱的指标：癌胚抗原（CEA）1965年发现的CEA可谓是最广谱的指标，它的升高可见于结/直肠癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫及子宫颈癌、泌尿系肿瘤等，其他恶性肿瘤也有不同程度的阳性率。总之，腺癌中CEA最容易升高，其次是鳞癌和低分化癌。肿瘤分期晚、瘤体负荷大、肿 ...

作者：张剑波 徐三男 龚国富 鄂州市中心医院(湖北鄂州436000)【摘要】目的探讨用全自动生化分析仪测定ALT和AST结果失真的原因以及解决的方法。方法 全自动生化分析仪7600速率法检测ALT和AST。结果有一些ALT和AST测定结果太低甚至为负值，反应曲线异常，经过稀释后测定，其结果与稀释前相差甚远。结论遇到过低的结果要寻找原因，经常察看反应曲线，避免报告结果与临床不符。【关键词】ALT AST 全自动生化分析仪速率法 血清丙氨酸氨基 ...

在生化分析测量中，酶的测定比较复杂，要求条件较高，测试比较困难。一般生化分析仪只要酶的测定准确，重复性好，其它项目的测定一般都会没有问题。现就生化分析仪酶分析中常见的测试不准确、重复性差的几点原因进行分析，以供使用者和维修工程师参考。生化分析仪酶的测定一般用动力学法进行测试，其原理是在酶反应的最适条件下，用物理、化学或酶促反应的分析方法，在反应速度恒定期（零级反应期）来连续观察和记录一定反应时间内底物或产物量的变 ...

实验室里有很多非常容易学会并且不太被重视的小技巧，可以提高你的科研效率。霸霸会定期推荐 10 条，千万不要走开，锁住生物学霸频道。1. 封口膜剪了以后直接拉伸使用（保护纸会在拉开后分离），这样就不需要抠开了。实验室内请带手套操作，以上是为了拍照才未使用手套。2. 鱼缸潜水泵做回流冷凝的循环水泵，加氧泵用来做过柱的加压泵。这个过柱指的是硅胶/氧化铝柱层析，不是指葡聚糖柱等其他类型的柱子。3. 带验钞功能的手电筒可以用来过染料（便宜、比便携 ...