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co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞，PMSF（Amresco，cat:329-98-6），cocktail（上海晶莱生物），脱脂奶粉（cat:66196131T），β-actin（上海晶莱生物）。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime)，细胞刮，4 度离心机（eppendorf，centr ...

1. CRISPR/Cas 简介CRISPR-Cas 是细菌和古细菌在自然界生物长期的进化过程中，演化出了一种独特的适应性免疫系统。在该系统中，一种称之为 Cas 的限制性内切酶能在短链 RNA 的引导下，靶向降解外来入侵的 DNA 或 RNA，人们将这一系统命名为 CRISPR-Cas，即成簇规律间隔的短回文重复序列及其相关基因 （Clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associ ...

清醒动物大脑神经递质的提取和在线检测分析--------微透析-高效液相-电化学（MD-HPLC-ECD）微透析技术基本原理1微透析技术是一种在体微量化学采样与检测技术，由西班牙之 Delgado 及瑞典之 Ungerstedt 等人于 1972 年自更早的压抽导管（push-pull cannula）改进而来。 基本原理：选择具有一定截留分子量的纤维半透膜制成的探针埋入待测的组织区域，以恒定速度向探头内灌注与组织液成分相近的等渗灌流液，当灌流液流经 ...

一、研究背景在脑科学基础研究领域中，脑内给药已经成为大多数动物实验的重要环节，比如注射病毒、细胞、蛋白分子、药物、标记染料探针等，根据实验设计，常见有两种给药方式：单次注射给药和多次反复给药（慢性给药），前者通常采用微量注射器（如下图，左），后者采用套管（如下图，右）来实现。无论哪一种方式，均具有操作简单、动物微创（或无创）、注射精准等优点。二、套管微量给药系统本文主要介绍多次反复给药方式—套管。功能用途：用于小鼠、大鼠、猴等实 ...

基本介绍有机体的生命过程是物质、信息和能量三者有组织、有秩序的活动，具体表现为生物个体内各器官、组织细胞之间，物质、信息和能量的传递。在这个过程中，由微动脉、微静脉、毛细血管和动静脉吻合支组成的微循环起着至关重要的作用，直接给细胞供血、供氧、供能量及有关的营养物质，同时还排出对人体有害的代谢产物，是人体的内环境，是生命的最基本的保证。任何器官，任何部位（包括心脏在内）都必须要有一个正常的健康的微循环，否则就会出现相应 ...

2016 年里约奥运会的开幕式上，超模吉赛尔·邦臣一袭银衣气场全开的走秀震撼了全世界，吉娘娘美得让人窒息！一日，某小博对着吉娘娘的时尚硬照冒「星星眼」时，突然想——我的免疫荧光样本如何拍的像吉娘娘一样 「美艳不可方物」呢？小博同学仔细回顾了以前做过的片子，闭关参悟苦心求索，终于顿悟：免疫荧光要拍好，模 (yàng) 特 (běn) 颜 (zhuàng) 值 (tài) 是诀窍。先天得有好容貌，后 (miǎn) 天 (yì) 化 (rǎn) 妆 (sè) 更重要！通过免疫荧光对样本进行染色，整个流 ...

染色质免疫沉淀（Chromatin Immunoprecipitation, ChIP）是研究细胞内 DNA 与蛋白质相互作用的经典技术，特别是经常用于研究某些转录因子与特定基因组区域（如启动子或其它 DNA 结合位点）的结合，或者用来评价基因组特定位点的组蛋白修饰水平。CST 推出的 SimpleChIP® 酶解法试剂盒有 9002，9003，9004 和 9005均含有标准 ChIP 流程所需的整套试剂、阳性对照组蛋白 H3 抗体、阴性对照 IgG、人和鼠 RPL30 阳性引物引物和 ...

编首语：这篇文章详细分析了 ChIP 操作的关键步骤和操作细节，让您的染色质免疫沉淀（ChIP）实验变轻松。小板凳备好、小零食备好、阿猫阿狗管好……对面有一大波干货袭来，请摆好姿势准备迎接！华丽丽的分割线……一、ChIP 实验的基本原理和主要应用？真核生物的基因组 DNA 以染色质（Chromatin）的形式存在。因此，研究蛋白质与 DNA 在染色质环境中的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径，而染色质免疫共沉淀（Chromatinim ...

免疫组化方法（石蜡切片）重要提示：参考抗体说明书选用合适的抗体稀释液和抗原修复处理方法。IHC 方法：抗原修复缓冲液/抗体稀释液A. 所需溶液和试剂1. 二甲苯2. 无水乙醇（100% 和 95%，变性无水乙醇，组织学级）3. 去离子水（dH2O）4. 苏木精（可选）5. 漂洗（缓冲）液： 1X TBS/0.1% Tween-20 (1X TBST)：配制时，取 100 ml 10X TBS 加 900 ml 水稀释至 1 升。加入 1 ml Tween-20，混匀。 10X Tris 缓冲盐水 (10X TBS)：在 800 ml 蒸馏水中加入 24.2 g 三羟甲基氨基甲烷（Tr ...

最近，接到前线战报，上海生科院320大院的马同学正在使用CST的PD-L2抗体（#82723）在多种人组织上进行免疫组化实验。然而，多次实验均无法得到结果，切片上的细胞「团灭」而归。CST技术人员闻悉后，决定进行实地探访，与科研人员一起，找到问题所在。前期准备在经过前期与马同学的讨论后，决定在这次测试中，对原 protocol 进行如下重大调整：1. 测试时增加阳性/阴性对照片（Control slides：SignalSlide® PD- ...

董太师门下的弟子最近耗费大量元神得了一批老鼠，又跑去他族求得一批圣物——人类标本，本以为离飞升上仙仅一步之遥，却在忙活了数天、耗费了三魂三魄，在 DAB 显色液滴在载玻片上的 N 刹那后，听到了自四海八荒传来的轰轰天雷——切片上的腊肉竟然毫无反应！弟子此次的天劫惊到了正在闭关的董太师，他放下正在研读的他山典籍《CNS》，走出山洞，细细端详了一番，缓缓说道：「你只学到了这门功夫的『形』，但『神』还缺些火候，现下，为师将把组化大法中需要提升的 ...

刚入师门的呆萌·王最近悲喜交加。师傅董太师看他骨骼清奇颜值高，便给了他「镇组之宝」——一块尚方宝肉，并拍拍他的肩膀，「小王，拿着这个好好做，稍微做出点东西，你就能顺利拿上学位，当上小 PI，迎娶白富美，走向人生巅峰！」小王兴高采烈拿着这沉甸甸的宝肉，但左右思量都觉无从下手呀！便去请教大湿兄傲娇·李，「师兄，师傅给了我一块宝肉，让我做点东西，你说我是油炸、清蒸还是红烧好呀？我寻思，我可能还做不过门口的黑料大爷呢，咋办？」傲娇·李听了，噗 ...

细胞在肿瘤、病毒、细菌、寄生虫、移植组织、过敏原、甚至自身抗原的适应性免疫应答中都发挥着重要的调节作用。大部分 T 淋巴细胞在其细胞表面表达单一的、高度特异性的抗原受体（TCR），与 MHC-抗原肽复合物相结合并识别其中特异的抗原肽，启动获得性/特异性免疫应答机制，比如 T 细胞介导的细胞免疫和 B 细胞介导的体液免疫。由于 TCR 与 MHC-抗原肽复合物之间的亲和力低，半衰期短，相互结合后容易快速脱落，重组的可溶性 MHC-抗原肽复合物单体并不适合用于抗原 ...

在写论文的时候，难免碰到表格的编辑，平常我们看到论文中的表格基本是这样的三线表：但是我们通过 SPSS 软件统计分析出的结果却是这样的：如果将这些数据一一录入，太浪费时间，影响写作效率，那如何快速的将表格绘制成符合论文发表要求的三线表呢？本文就从一组 SPSS 数据库出发，实例操作如何实现符合论文发表要求的三线表。首先，这是一个 SPSS 数据库：Analyze → Compare Means → Independent-Samples T Test：看到下图界 ...

经常看到广告上穿白大褂的「科学家」在举起试管看来看去之类的。那么实际做科研的人平时的生活是怎样的呢？前排已经备好瓜子板凳，请坐。据说能中 40 条以上的人都看哭了......

近日浏览 Lancet 网页，其主页放了一篇关于儿童克罗恩病（Crohn's Disease，CD）的队列研究，笔者并非消化内科相关，而是呼吸内科一年级研究生，抱着建模方式或许可以借鉴到老师的临床研究项目中的心态入了坑。图一，3 月 15 日 Lancet 的主页截图本文针对儿童克罗恩病并发症预测的多中心的队列研究，来自于 RISK Study。现在大多数 SCI 杂志对于临床研究接稿都要求试验开展前已进行临床试验注册，收完病人再去补是无济于事的。图二，临床 ...

实践篇——知其然扎细胞的基本操作步骤：配好 ACSF 充氧（tip：氧要饱和！根据实验对象、目的、课题设计等各种主客观情况选用合适的方法技术）打开各种仪器。基本就是循环灌流系统（简单地说就是蠕动泵，使脑片记录槽中氧饱和的人工脑脊液不断更换，可防止脑片细菌滋生）、显微观察系统（tip：Olympus、Zeiss 等官网可以了解很多相关知识）、记录采集系统三大模块。（tip：在记录槽充满溶液的时候再打开加热器，干烧容易把电阻烧坏；先开硬件 ...

如何寻找一个基因的启动子并预测转录因子在其上的结合位点是一个不小的工程，原因有二：1. 网络上有海量的寻找启动子的教程，各执一词，常常会让小白不知所措；2. 同理，转录因子的数据库也有很多，而且不少已经鲜有维护，数据陈旧，使用起来很不方便。有没有一个数据库能完美地一次解决这两个问题呢？有的！今天给大家介绍的 LASAGNA-Search 2.0 便是一款十分让你省心的在线分析数据库。一、首先，打开数据库的网址：http://biogrid- ...

本文讲述一篇 SCI 论文的标题如何书写。SCI 论文的标题应该以最恰当、最简明的词语来反映论文中最重要的特定内容，因此，必须用心斟酌选定。SCI 论文的标题（Title）又称为「题目」、「题名」或「文题」，是该论文的重要组成部分。有的标题还包括副标题或引题 。一篇 SCI 论文一般还有若干段落标题，也称为层次标题或小标题 。一般而言，写好 SCI 论文的标题还是很难的。但是实际上很多人写论文标题时，并不很重视，往往写得不准确、不恰当，从而影响整个论文的形象 ...

大家都在说 qRT-PCR 实验原理、引物设计、结果解读等，而我觉得我应该和大家分享一下 qRT-PCR 的实验操作事项。虽小，但是关乎结果。在做 qRT-PCR 之前，我们需要对自己的 RNA 以及操作方法有清楚的了解，毕竟我们的努力是希望得到结果的，而不是简单的练练手。所以在做 qRT-PCR 之前，我们需要确定以下问题（部分内容仅适用于 SYBR）。你确定你的 RNA 没有降解吗？NanoDrop 2000 只能检测 RNA 的浓度以及纯度，而对于 RNA 的完整性是没法检测的。RNA（ ...