在细胞培养实验过程中,大家是不是总会好奇别人家的实验总是做的又快又好,而自己做的实验又慢又难得做出自己满意的结果,搞得一天到晚也挺忙的,心想:我也很努力很认真啊,为啥效率总提不起来呢?其实,有时候并不是自己不努力,只是没有找对方法。做实验可不能光是埋头苦干,还要学会运用合适的检测试剂盒,这样就能事半功倍。如果你还在用 MTT,那就真的 OUT 了,MTT 花 4 小时才能得到的结果用 CCK-8 只需 1 小时,CCK-8 可用于细胞增殖和毒性分析,同 MTT 法相比 ...
前段时间,国务院办公厅发布了《关于进一步加强科研诚信建设的若干意见》,声明将重点改革,严打学术不端,建立水刊黑名单,打造学术不端档案库,详见:最严学术打假:终身追责、一票否决、刑事制裁,你还敢造假吗?近日,Nature 整理了国内外专家的看法,对此作出了如下专业解读和高度评价。 1 水刊黑名单科技部还将建立「劣质」期刊黑名单,也就是我们常提及的水刊、掠夺性期刊,这包括国内期刊和国际期刊。四大水刊 PlosOne、Scientific Rep ...
北京时间 2018 年 10 月 1 日,诺贝尔官方委员会宣布,James P Allison、Tasuku Honjo 共同获得今年的诺贝尔生理学奖及医学奖,以表彰他们在癌症免疫学领域的杰出贡献。・・・学者简介詹姆斯 · 艾利森,美国免疫学家,美国科学院院士,美国德克萨斯大学安德森癌症中心免疫学系教授兼主任。其在德州大学奥斯汀分校获得微生物学学士学位,后又获生命科学博士学位。其研究方向主要针对 T 细胞的发展和活动机制,和肿瘤免疫治疗的新策略的发展。艾利森发现了一种 ...
坊间女博士常被戏称为「第三类人」、「灭绝师太」,如此标签贴在靠超常毅力获得世界上最高学历的女生身上,可谓哑巴吃黄连,有苦说不出。由于普通大众对女博士了解不多,难免有刻板印象,想当然地认为女博士工作风格强势,生活里更加强势,所以才有「不敢娶女博士」之怪象。然而,事实真是如此吗?那些娶了女博士的男同胞们如今过得怎么样呢,今天我们来说说那些娶了生物女博士的男人们。01娶了女博士,有了坚强的后盾好莱坞 A 级导演、获得过两届奥斯卡最佳 ...
养细胞是一件扎心的事,可以让你提前有种为人父母的感觉,你要像照顾小孩一样仔细对待,爱护她,呵护她,给她温暖。除此之外,你还要有足够的技巧去驾驭她。比如,想要长期持有一个细胞系,最佳的策略是进行低温保存。这可以有效防止因污染或技术原因导致的细胞损失。而低温保存对于维持细胞株的遗传特性也极为重要。看似简单的冻存细胞,如果操作不当,将导致长期培养的细胞付之东流。作为一个吃过亏的人,告诉你细胞冻存是否成功取决于以下四个关 ...
10 月 11 日 21:43 ,2016 级浙大化工博士侯某发了最后一个朋友圈,欲投钱塘江寻短见,10 月 14 日上午 10:15,在钱塘江上发现了侯某的罹难遗体。网上流传的失踪学生发布的朋友圈讲真,大部分的博士不是为实验绞尽脑汁,就是为未来忧心忡忡。读博的压力越来越大,抑郁的博士越来越常见。图片来源:Nature德克萨斯大学圣安东尼奥分校健康科学中心的神经学家 Teresa Evans 做了一份心理学研究,她分析了全球 26 个国家的 2,279 名学生发现,超过 40% 的学生有 ...
最近大伙讨论的医学专博扩招好不热闹,咱们来看看各大官网的招生补录情况吧。 1 中山大学说的是教育部要求,中山大学扩招 200 名专业型医学博士,分数线下调真的蛮高:外语 40 分,业务课 50 分,总分 155 分。好后悔今年没报考,明年中山大学要变大大大热门吗? 2 四川大学四川大学扩招了 50 名临床专博,20 名口腔专博,以及 19 名国家重点实验室的生物医药专博。口腔不愧是华西的王牌专科,包揽了近四分之一的专博名额。 3 上海交通大学上海交大扩招临床专博 90 名,步子迈得也不小,但毕竟 ...
前段时间,小编的一位朋友为了升职称,辛辛苦苦写了第一篇英文,准备投篇SCI,说是印度的某个杂志,有去年的影响因子,接受率很高。小编听到后,赶快检索了下,却发现该杂志近期已被 SCI 数据库剔除,还好及时制止了那位朋友。 1 为此,小编特地查询并整理了过去的 12 个月里,已被 SCI 数据库动态剔除或停止检索的杂志,共37本!包括:生物医学类 19 本,工程技术类 8 本,化学类 2 本,物理类 1 本,数学类 4 本,综合类 1 本等。 2 那么,杂志被剔除 SCI 的原因,通常有哪些呢?① 自引率过高,40% 以上:高达 5 分的《 ...
实验室常见靶基因表达水平检测方法主要集中于在基因转录前调控、转录水平和转录后 mRNA 加工及修饰等过程,合成后靶蛋白质也存在修饰。成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析有多种检测手段,其中最经典和广泛为业界认可是蛋白质免疫印迹杂交实验(Western blotting), 也是论文中最常见的数据呈现形式。蛋白质免疫印迹杂交实验原理是将已分离的总蛋白在 β 巯基乙醇等存在时,高温破坏其三维空间结构充分暴露出抗原结合位点,使针对靶蛋白的抗 ...
我做 western 的时候,发现目前的资料都很老,网上的资料也大多互相传抄,说法各异,于是综合了目前网上所能找到的资料和个人实际经验,编辑了这份 western blot 操作步骤,内容包括主要操作步骤和所需要注意的有用的细节,并附上参考文献。我按下文的步骤操作已经做出来了稳定可重复的、背景干净的 western 条带了,所以相信你也行。背景蛋白质印迹的发明者是斯坦福大学 George Stark。Neal Burnette 于 1981 年所著的 Analyt ...
有不少人询问如何查询基因序列、如何进行引物设计、如何使用 BLAST 进行序列比对...... 其实这些问题在 NCBI 上都可以方便的找到答案。我将结合我自己使用 NCBI 的一些经历跟大家交流一下 NCBI 的使用。主要有以下四部分内容:如何查找基因序列、mRNA、Promoter如何查找连续的 mRNA、cDNA、蛋白序列运用 STS 查找已经公布的引物序列如何运用 BLAST 进行序列比对、检验引物特异性今天我们就先讲第一部分:如何查找基因序列、mRNA、Pro ...
养细胞是一件戳心戳肺的事。你要像照顾小孩一样仔细对待,爱护她,呵护她。上篇提到细胞培养的注意事项(点此蓝色字体查看),反响热烈,这次就来讲讲细胞培养常见问题的原因及对策。1 培养液 pH 值变化太快 原因CO2 张力不对培养瓶盖拧得太紧NaHCO3 缓冲系统缓冲力不足培养液中盐浓度不正确细菌、酵母或真菌污染 对策按培养液中 NaHCO3 浓度增加或减少培养箱内 CO2 浓度,2.0 g/L 到 3.7 g/L 浓度 NaHCO3 对应 CO2 浓度为 5% 到 10%。或者改用不依赖 CO2 培养液松开瓶盖 1/4 圈加 H ...
在免疫荧光染色过程中单染和共染是常用的两种方式,除此之外我们还可能会用到远红外进行染色标记。这相对于前两者实验操作上处理方法是一致的,唯独在样品处理上有所不同,而导致荧光定位标记的颜色增多,相对而言变得复杂。免疫荧光技术主要是通过抗体与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。那么接下来,我们重点来介绍免疫荧光操作方法以及注意事项。操作步骤:1. 首先,在常温下将组织切片用免疫组化笔进行画圈 ...
刚开始做 Western blot 的同学们想必都大多都是研究生,虽然科研经历还不是特别丰富,但情感经历一定都比较丰富吧。同学们想想自己刚谈恋爱的时候,你刚喜欢一个人却还没表白之前,是不是每天都要想尽一切办法了解他 / 她的爱好,他 / 她的习惯,他 / 她每天的路线等等,等你心里有数之后再开始考虑如何表白?做实验也一样,在开始 Western 之前,尽可能多的了解你的目的蛋白,这和谈恋爱一样,这样表白成功的概率才会大大增加。当然,表白失败也很正常,我们之 ...
今天组会后师妹很不开心,因为老板看了她的 western blot 的结果图后一脸严肃的说:你这个差异不明显啊。师妹说怎么就差异不明显了,我觉得挺明显的啊,她凑近电脑屏幕看了看后,又后仰身体拉大了距离进行观察,就差拿尺子来测量条带的长宽了。我被我这可爱的师妹给萌化了,但又不忍心看她愁眉苦脸的样子,于是轻抚摸师妹的秀发,深情的说到:妹妹,给你安利一款软件,轻松搞定 WB 结果表达差异。好了,下面就奉上使用 Gel-Pro Analyzer 对 WB 结果 ...
果蝇,最最经典的模式动物之一,摩尔根爷爷的萌宠。毫不夸张的说,假如没有果蝇的存在,生命科学的研究很难取得现在这样的成就。△ 图片来源:站酷今天生物学霸想和大家聊聊那些有趣的果蝇基因命名。你印象中的基因名字是不是一堆字母和数字不知所云的组合?那么今天了解的这些有趣的基因名字一定会让你感叹:原来科学家也可以这么有意思!・・・ hedgehog为什么叫 hedgehog (刺猬)呢?是因为敲出这个基因后,果蝇胚胎会长出类似毛刺的东西,和 ...
统计图,和科研领域里的大多数图像数据伴生,是一种大家喜闻乐见的,直观表现数据结果的形式。周围的 Lab 不管是做免疫,还是发育,或者肿瘤,都涉及到要做免疫荧光(Immunofluorescence, IF)或者免疫组化(Immunohistochemistry, IHC),而在拍完了图之后,直接给老板 show 漂亮的 images 时并不能让 TA 百分百满意,总是想要一个 bar 图,那就需要统计了。而手动点数细胞太费时,所以向大家介绍一个有用的软件 IMARIS ...
前几天学霸平台有一篇推文《这才是科研狗脱贫的王道》,开篇用一组气势磅礴的排比句道破生物科研狗脱贫的天机 ---- 生物信息学。的确有师姐靠生物信息学发高分文章,也有师兄毕业进华大、博奥、华因康,持股分红薪资强,摇身一变,从此走上人生巅峰。可是,作为科研狗,想要走上人生巅峰,首先你得能毕业。说到生物信息学(bioinformatics),通常在处理高通量数据的过程中,我们往往需要借助一些表达谱信息进行比对分析,通过不同类型样本之 ...
做了 5 年的 MTT 实验 ,耗费了上万块 96 孔板。有成功的喜悦,有失败的沮丧,有好多话要对各位实验同仁说。在这之前,我们先回顾一下 MTT 的原理及操作步骤。实验原理MTT 是一种接受氢离子的染料,可作用于活细胞线粒体中的呼吸链,在琥珀酸脱氢酶和细胞色素 C 的作用下,生成蓝色的 formazan 结晶。formazan 结晶的生成量仅与活细胞数目成正比(死细胞中琥珀酸脱氢酶消失,不能将 MTT 还原,无法形成结晶),且该结晶溶解于 DMSO。利用酶标仪测定波长 490 nm 处的光密度 OD ...
师姐说:师妹啊,你帮我找几个基因的 qPCR 引物吧。你问怎么找?师姐说查文献啊!于是你一头雾水的开始查文献:打开 Pubmed,输入基因名,ATG7,enter,哇,有几万条记录,点下 best match,再选下近 5 年的文献,筛选一下,哇,还有几万篇相关文章。好吧,那就选第一篇看吧,点进去,找全文,往下拖,找到材料和方法,找啊找,终于找到了,那就 copy。还挺幸运的,可是,一看时间,半个小时过去了,这才查了一个基因的,还有好几个,一个晚上又没了,心里 ...