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在实验过程中，药物干预往往需要配置不同浓度梯度，配置的溶液浓度包括质量浓度、摩尔浓度、百分浓度等等。对于一个数学计算不太好的医学科研汪来说，往往拿起笔在纸上算就是大半天，还总是算错，算得直挠头，那么有没有一个好用的网站可以输入相关参数，直接算出浓度和稀释液体量呢？我在这里给大家分享一个十分实用的网站 —— PhysiologyWeb (网址：http://www.physiologyweb.com/)，这其实是一个分享生理学相关 ...

（来自丁香园站友 @dxy_690ndnz4） 妇产科吧好就业但是累，内科吧现在很多都招男生不招女生，读个研究生出来怕还找不到工作，纠结。@水月泠儿：妇产就算就业好也千万别选… 是个完全的把女人逼成汉子的地方。我念本科的时候也算是个娇滴滴话少的内向型少女，进了妇产科 8 年说话快的跟连珠炮一样，走路步速连男人都追不上我…………@巧乐兹 w：我是专硕研一第一年，妇产科学专业，我室友目前在妇科轮转，每天都饿得不行，因为主任、主治不去吃饭，你也不好意 ...

质粒构建是分子生物学研究中最常用的实验技术。原理依赖于限制性核酸内切酶，DNA 连接酶和其他修饰酶的作用，分别对目的基因和载体 DNA 进行适当切割和修饰后，将二者连接在一起，再导入宿主细胞，实现目的基因在宿主细胞内的正确表达。质粒构建方式多样，常规的 T4 连接酶，以及最近更受欢迎的重组酶方式。下面小编就总结一下 T4 连接酶与重组酶构建质粒方法，通过比较，其最大的不同点可能在于目的基因的设计以及连接体系。壹一. T4 DNA Ligase 即 T4 DNA 连接 ...

「亚细胞定位」已是高水平期刊对 lncRNA 研究的基本要求。一提到 lncRNA 定位，马上想到 FISH 的小伙伴肯定是学霸。今天推荐一个检索 LncRNA 亚细胞定位信息的专门网站。不卖关子，直接上链接，lncATLAS：http://lncatlas.crg.eu/。目前该网站已收集了经 GENCODE 注释的 6 700 余种 lncRNA，涵盖在人体 15 种细胞系中的定位信息。网站搜索很简单，刚一接触这个网站时，发现返回的图形化结果不好懂。我就 email 网站开发者，表达 ...

说起基础实验操作，移液一定是基本功中的基本功，学霸君记得第一次操作移液还是在大一的无机化学实验上。但「谁也不是生下来就会做实验的啊...」，移液虽然简单，也会不小心手一抖，忽略了小细节的操作导致失败重来，比如：移液之前要先润洗规范操作是在移液之前用待取溶液对移液管进行 2-3 次润洗，这一要求是为了提高移液的精度。润洗过程可以将移液管中的残留的蒸馏水洗净，避免对待取溶液的稀释，确保移取溶液的浓度保持不变。取液时浸入距离应为 1 c ...

在数据统计中不仅仅只有 t 检验！！多数同学们区分不清各路检验大神（只能怪自己统计没学好），我们本次将各种检验一次性区分清，同时手把手教大家如何采用 SPSS 检测各项检验。初级篇（两样本比较，u 检验和 t 检验）u 检验（Mann-Whitney U）情况 1： 当总体方差 σ2 已知，无论样本是大样本（n≥30）还是小样本（n

对于每一位医生而言，夜班是心中难言的隐痛。我热爱工作，也热爱黑夜给我的黑色眼睛。可是，我实在痛恨熬夜的痛苦啊！让我们看看医生的夜班都是怎么度过的？（来自丁香园站友@lkjhg518）@雪海小不点儿： 急诊科 天天夜班那小心脏激动的都没心情睡觉！@dxy_cdblsbf6： 我们科的夜班是急诊病房、一分钟都闲不下来。@青春迷彩 90： 妇产科哭晕在厕所。。。@sagamage： 运气好的时候一夜安稳，运气差的时候仰卧起坐！！！@wkywtz：10 点逛一圈 ...

1 准备1. 电泳：RNA 专用 0.5×TBE 缓冲液、DEPC 水2. 超净工作台：无 RNA 酶污染的枪头及 EP 管（1.5、0.2 ml）、镊子、1.5 ml EP 管架、离心管架、0.2 ml PCR 管架（200 μL 枪头盒代替）污物缸。一次性薄膜手套和橡胶手套、卫生纸、75% 乙醇、RNase Free 水、15 ml 离心管。2 样品处理：RNA 提取前的步骤☞ 悬浮细胞每 1 ml Trizol 可裂解 5×106 动物、植物或酵母细胞，或 107 细胞。☞ 贴壁细胞1. 从培养箱取出细胞融合率达到 100% 的 T25 细胞培养瓶，弃去培养基。2. 用弯头滴管将残余液体给吸去3. 一个 ...

很多牛人，当博士或博后的时候发一流的文章，自力更生时却只能在二流杂志上灌灌水，这在中国好像是很常见的现象。请各位谈谈自己的看法？@lillu6667：老板天天想我超越他，不过到现在尽管我已经毕业 5 年多，我还天天在仰视。要超越，谈何容易？！老板是一条线的做下来，我们只是其中线上的一环而已，如果按老板给的研究思路做下去，不可能超越，如果另辟蹊径，科研经费又成问题，不过，有句话我倒是很有体会：科研，就是在巨人的肩上再往上一步。@z ...

最近，丁香园站友@想不好名字啊 发帖求助：想写英文论文，真的需要去看一百篇文献么？广大站友们是这么说的：@wangchinapsy： 一百篇可能有点少吧。@医学大海清风： 个人觉得搜索关键词，快速阅读之后 get 一个好的 idea 才是最重要的吧，跟读多少文献关系不大。@Timberwolves33： 看你怎么定义「看」了，完完整整，逐字逐句的话，100 篇对于写一篇文章肯定多了。粗略看，只看摘要，只看结果图片，只看思路，只借用其中一两个句子，100 篇偏少了。 ...

各位生物学的学霸们一定对中心法则都不陌生，最简化的中心法则是 DNA 经过转录成为 RNA，RNA 经过翻译成为蛋白质，由于蛋白质组学（简称蛋白组）关心的是翻译成为蛋白质后发生的事情，因此这里就不赘述诸如逆转录，转录后调控等过程了。研究什么那么蛋白组究竟研究的是什么呢？简单的说呢，就是高通量或者说大规模地研究蛋白质的科学。具体来说主要是三大块：第一，蛋白质定性，或者说大规模检测某些蛋白质是否存在于样品当中；第二，蛋白质定量，也就 ...

近日，2018 年度高等学校科学研究优秀成果奖(科学技术)拟授奖项目公示。共对拟授予奖励的 300 项通用项目（其中，自然科学奖 132 项，技术发明奖 47 项，科技进步奖 121 项）及 10 名个人（青年科学奖）予以公示，拟授予奖励的 8 项专用项目（其中，技术发明奖 7 项，科技进步奖 1 项）在有关高校内部公示。通用项目各奖项具体数量如下：以下为各高校通用项目拟授奖项目统计结果（仅统计第一完成单位）：高等学校科学研究优秀成果奖（科学技术）面向全国高等院校，每年评审一次，分设自然 ...

Linux 系统是生物信息分析中必不可少的工具，它的作用就像 Windows 系统对于我们的日常工作那样：不需要深入到成为系统专家，但是基本操作必不可少。所以对于生物信息学的新手来说，没必要把《鸟叔的 Linux 私房菜》完全学完，那些用不着的部分完全可以跳过。以下就对生信分析中的 Linux 操作做一个简单的入门指导，告诉你这条路该如何走，入门技术需要掌握哪些内容。01 生信的 Linux 之路要怎么走？生信的 Linux 之路大概分为三个阶段：1. 流畅使用； ...

刚开始做 Western blot 的同学们想必都大多都是研究生，虽然科研经历还不是特别丰富，但情感经历一定都比较丰富吧。同学们想想自己刚谈恋爱的时候，你刚喜欢一个人却还没表白之前，是不是每天都要想尽一切办法了解他/她的爱好，他/她的习惯，他/她每天的路线等等，等你心里有数之后再开始考虑如何表白？做实验也一样，在开始 Western 之前，尽可能多的了解你的目的蛋白，这和谈恋爱一样，这样表白成功的概率才会大大增加。当然，表白失败也很正 ...

9 月 8 日，2018 第五届诺贝尔奖获得者医学峰会在海南海口正式开幕。2004 年诺贝尔化学奖获得者阿龙 · 切哈诺沃（Aaron Ciechanover）、1979 年诺贝尔物理学奖获得者谢尔顿 · 李 · 格拉肖（Sheldon Glashow）、2003 年诺贝尔化学奖得主彼得 · 阿格雷（Peter Agre）、2009 年诺贝尔化学奖获得者阿达 · 约纳特（Ada E. Yonath）、2012 年诺贝尔生理学或医学奖获得者约翰 · 格登（John B. Gurdon）等五位诺贝尔奖得主，与多位中外院士共同出席。 ...

我的课题涉及 Transwell 侵袭实验，因此在这里和大家分享 Transwell 侵袭实验。实验用品01Transwell 小室我用的是 ECM554，用完后擦去基质胶，再用胰酶和 75% 酒精泡，可以把膜洗得很干净，用前用紫外里外都照 30 min。处理方法：用棉签轻轻擦去胶和反面细胞，清水冲洗，超声清洗，低档，30 min，清水 3×5 min，蒸馏水 3×5 min，室温凉干，用前紫外线小室正面 3 h，反面 6 h，微波，低火 10 min×2。因为我买的是铺好胶的，所以没买 Matrigel，二 ...

今天收到了南京医科大学在职博士录取通知书，心里还是很高兴的，第一次考博，一路经历很多，结果很满意，也很幸运，把这次考博经历记录一下，希望对后来人有一定帮助。先说一下自己的情况，我 2014 年哈尔滨医科大学硕士毕业，毕业后去了苏南一家三甲医院，刚来医院科室实力比较弱，当时很想辞职，尝试两次考博，结果毕业工作了才发现没有静下心来认真准备考博的心情，两次报考上海交大博士都没有参加考试，后来就不了了之。后面科室换了一个主任，主任 ...

有点儿惊悚？别担心，下面要讲述的不是一个恐怖故事，而是在每个人身上每天都发生的故事——自噬（Autophagy）。细胞自噬简单来说就是细胞自己吃自己，通过消化自己内部的垃圾，维持内环境的稳定。看似自取灭亡，实则釜底抽薪。自噬作为细胞重要机制，与个体成长、发育、分化、衰老密切相关，其功能的紊乱往往会导致肿瘤、神经退行性疾病、微生物感染、炎症等疾病的发生。然而，这一重要的现象直到 2016 年日本细胞生物学家大隅良典获得诺贝尔奖才 ...

一般情况下，瞬时转染是将 DNA 导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中，重组 DNA 导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的 DNA 不必整合到宿主染色体，可在比稳定转染较短时间内（最多一周左右）收获转染的细胞，并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。如果过表达基因用质粒，如果敲降用的是 siRNA(在 microRNA 实验中，过表达用的是 mimics，敲降用的是 inhibitor)。通过瞬时转染，将目的基因敲降或者过表达（gain ...

免疫荧光技术（Immunofluorescence technique）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。实验材料1.　细胞样品2. 试剂、试剂盒多聚甲醛 70% 甲醇 丙酮 PBS Triton BSA DAPI 染液 DABCO Tris 甘油3. 仪器、耗材玻片实验步骤第一天1. 在培养板中 ...