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包涵体蛋白的复性

概要对于基因工程技术构建的重组蛋白,通常分为可溶性重组蛋白和不溶性重组蛋白,可溶性的重组蛋白一般常常存在于细胞质内、细胞分泌到培养基、分泌到周质间隙中等。不可溶性的蛋白主要是由于表达系统的高效表达,在细胞内形成了包涵体。E.coli是应用最为广泛的重组蛋白质表达系统,但是表达的外源性蛋白多以包涵体的形式存在,为了重新获得生物活性,需要对包涵体蛋白质进行体外变复性操作。蛋白质复性模型根据对蛋白质折叠过程的研究, ...

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热议!南方医科大学一次性清退 16 名医学研究生,现在学医更难了!

近年来,研究生「延期毕业,超期清退」已成为一种新的教育现象,大家并不陌生。去年近30所高校包括清华大学、华中科技大学、武汉大学等给予1300多名研究生清退处理,清退理由大都是「在学校规定的最长学习年限内未完成学业」。显然,高等教育「严进宽出」已成为历史,严进严出将成为新常态。图片来源:南方医科大学研究生院官网最近又传出重磅消息8 月 3 日南方医科大学发布一则退学处理公示通知,对包括 11 名医学博士研究生和 5 名硕士研究生在内的共 16 名研究生 ...

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免疫疗法治疗阿尔茨海默病的新见解

阿尔茨海默病(AD)是美国老年痴呆症的主要病因,目前有多达500万美国人被诊断出痴呆症。病人和护理人员的费用以数十亿美元计,并将在未来几十年内增加。随着人口老龄化,开发有效的AD治疗方法将变得更加重要。研究人员试图治疗这种疾病的方法之一,是针对病人大脑中形成的病变。AD主要有两种类型的病变,由淀粉样β肽组成的细胞外斑块和由高度磷酸化的tau蛋白组成的细胞内神经纤维缠结。大部分的焦点都集中在淀粉样斑块上;然而,研 ...

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高阶菌群标志物怎么筛选?试试「多组学联合标志物+验证实验」!

目前肠道菌群研究可以大致分为五个方向其中疾病标志物筛找是一个非常重要的研究方向,也具有十分重要的临床意义。本文将从两篇“结直肠癌疾病标志物筛找”的案例中,探讨胃肠道疾病领域的疾病标志物筛找研究如何进行实验设计和结果分析。首先,可从下图中了解肠道菌群疾病标志物的筛找通用流程。疾病标志物筛找通用实验设计流程案例1大规模独立宏基因组+代谢组实验筛找疾病不同时期标志物研究内容:宏基因组和代谢组分析揭示肠道菌群明显的 ...

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Cell 子刊:郭尚勤团队报道荧光计时器,可实时监测活细胞周期速度

细胞的分裂与增殖是细胞生命活动的基本过程之一。无论是在发育过程中的细胞分化、再生、重编程,还是在许多疾病,包括癌症的发生过程中,细胞周期的快慢都有可能发生改变。 因此,测定细胞分裂周期的速度或长度,尤其是在组织甚至体内对细胞分裂的周期进行测定,能够帮助我们更好地理解发育过程和疾病的发生过程,在基础研究中有着重要的意义。然而现有的细胞周期测定技术有其局限性,在活体内实时监测细胞周期的动态变化仍存挑战。2020 年 6 月 23 日,来自 ...

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Science:保护好你的肝,运动让大脑更年轻的奥秘在这里!

人口老龄化已经成为全球性公共卫生问题。随着人类寿命的增长,越来越多的人受到年龄相关疾病的困扰,各种老年退行性病变的预防和治疗日益受到重视。运动让大脑保持年轻,但是衰老导致的体质下降,以及少数人群不适宜进行运动,那么能不能解析运动是如何带来认知改善,让人们不运动也能够获得同样的益处呢?近日,来自美国加州大学旧金山分校 (UCSF) 的 Saul A. Villeda 研究团队在 Science 发表题为:Blood factors transfer be ...

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人体肠道病毒组学

人体肠道病毒组组成复杂,并且存在显著的个体差异。人体肠道病毒组90%以上为原核病毒即噬菌体。这些病毒以DNA病毒为主,伴有少数RNA病毒。噬菌体、真核病毒和植物源病毒与共生细菌和肠道屏障相互作用,促进肠道健康所必需的重要功能(图1)。图1肠道病毒的主要角色和功能(Lopetuso LR, et al, 2016)人体肠道病毒组中,温和噬菌体(temperate phage)占绝大多数。温和噬菌体也称溶原性噬菌体(lysogenic phag ...

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抗体从头测序简述

网上搜索“抗体从头测序”,搜索结果会展示一长串的资源和服务。关于该技术的描述太多了,有很多描述都大同小异。小编想借此文给大家说说我们为什么需要抗体从头测序以及如何进行抗体从头测序。抗体从头测序的分类抗体从头测序是根据抗体样品种类进行区分的。我们通常根据抗体的“克隆性”(clonality)来描述抗体样品。克隆性是指样品中存在的不同抗体序列或遗传系谱的数量。单克隆:样品中包含具有相同序列的抗体。单克隆性是进行抗体从 ...

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Cell Reports | 熊波课题组研发逆转老龄动物卵子质量新方法

雌性哺乳动物随着年龄的增长,个体机能和卵巢功能逐渐衰退,卵子的数量和质量也大幅下降。研究表明女性最佳生育年龄为 30 岁之前,35 岁后生育能力开始迅速下降,同时伴随不孕、流产、胚胎死亡和先天性出生缺陷等发病率显著升高。作为老龄雌性哺乳动物普遍存在的一个难以克服的问题,卵子质量低下是造成生育力丧失的主要原因,成为当今人类生殖和动物繁殖面临的最大挑战。卵子质量低下表现为纺锤体组装检验点系统受损、减数分裂染色体分离异常、线粒 ...

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「神药对决癌王」医科院赵玉沛院士/吴晨教授/林东昕院士团队揭示二甲双胍抑制胰腺癌转移新机制

胰腺癌是一种恶性程度极高,诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤。在全球范围内,胰腺癌的发病率与死亡率几乎相同,5 年生存率仅为 8%,被誉为「癌中之王」,著名的苹果创始人乔布斯便是因患胰腺癌病逝。二甲双胍是 Ⅱ 型糖尿病的一线治疗药物,但最近几年大量的研究发现二甲双胍的能力远远超乎人们的想象,除了能减肥、抗衰老、改善认知,越来越多的研究表明,二甲双胍还能抗癌!2020 年 7 月 31 日,中国医学科学院北京协和医学院的赵玉沛院士、吴晨教授、林东昕院士团 ...

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徐春亮等人 Immunity 重磅发现,心理压力危害有多大,肠道微生物说了算!

现代人无时无刻不在遭受着各种心理压力的折磨。从上级的督促,到「死线」(deadline)的临近,亦或是即将到来的人生大考,都或多或少的给当事人带来心理压力。 我们身体中的生理反应也经常受到这些精神上的变化的左右。正如丁香学术此前报道的心理压力能够直接影响人体的体温一样(见推荐阅读),一些过激的心理变化甚至会导致免疫疾病的发生。 尽管此前有一些研究报道心理压力能够激活特定的神经通路来诱发炎症,但其中的奥秘还未被完全揭开。2 ...

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一篇 Nature = 一家 5000 万美元的初创公司!蛋白靶向降解技术新秀,LYTAC 能否经受住时间考验

靶向蛋白降解技术(Proteolysis TArgeting Chimeras, PROTAC) 乃是继小分子抑制剂(small molecule inhibitors, SMI)和单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb)药物后的新兴热门药物研发领域。与后两者相比,PROTAC 具有独到的优势,能够靶向众多的以前认为「不可成药」的蛋白分子。迄今已有上百种 PROTAC 分子已经或者正在研制当中,众多的新兴创业公司也是顺势崛起。然而,这种 PRO ...

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暗恋姑娘未果,他差点心碎自尽,却阴差阳错发了篇 Nature 子刊......

作为一个母胎 Solo 长达近三十年的名贵科研犬,总是能依靠敏锐嗅觉,发现在实验室、办公室、朋友圈无处不在弥漫着夏季荷尔蒙的味道。根据笔者多年的经验判断,在七夕这个浪(有)漫(毒)的节日来临之际的一个月内,想必会有一大波狗粮前仆后继、无孔不入的袭来……如果你还未拥有爱情,我们不妨一起来追随那些前辈们的脚步,去感受恋爱中的酸甜苦辣,汲取养分与教训。暗恋隔壁姑娘,他成了「痴汉」人生有三大幻觉:有人敲门;手机震动;TA 喜欢我。但作为国际 ...

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Nature:p53 突变抗癌or促癌, 肠道菌群说了算

食品中抗氧化剂对健康的益处已在大量科学文献中得到证明。 然而最近的一项新的研究表明,有着太多所谓的好事可能并不那么好,食物中的抗氧化剂,包括多酚,类黄酮和其他植物化合物,可能会增加肠癌的风险!临床上有一个奇怪的现象,小肠的癌症相当罕见,而结直肠癌却是一种很常见的癌症。究竟是什么让结肠「吸引」癌症? 坊间传闻「遇事不决,量子力学;机制不明,肠道菌群」,这不,又是肠道菌群在「搞鬼」。 2020 年 7 月 29 日,以色列希伯来大学的 Yinon Ben-Neri ...

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天然蛋白纯化,选对策略一样简单

天然蛋白的特性可以说是迥然有异,每种蛋白都是不一样的烟火,共同特点就是丰度很低,自带丰富的背景杂质,并且没有特异性的纯化方法可寻。然万物皆有共性,我们只需找到他们的共同点就可以求同存异,一切难题也就可以迎刃而解。凡是蛋白质都是氨基酸组成的,氨基酸既是两性电离物质又有多种多样的 R 取代基,那么丰富的氨基酸组成就让不同蛋白质或多或少拥有带电性与疏水性。以上给我们的纯化提供了基础方案:以离子交换层析和疏水层析为核心步骤来 ...

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要做好标签蛋白质的纯化实验,选好填料和预装柱很重要

老话说的好,巧妇难为无米之炊,要做好标签蛋白质的纯化实验,首先得选择合适的填料和预装柱,以达到事半功倍的效果。我们今天就来看看 Cytiva 标签蛋白填料的大家族,一起 pick 最适合您蛋白质研究的填料吧!蛋白标签(Protein Tag)所谓蛋白标签(Protein Tag)是指利用 DNA 体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪、和纯化等。常用的标签有His、GST、Strep、MBP、Flag ...

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细胞密度梯度分离介质Ficoll:人外周血单个核细胞的分离

Ficoll:一种已灭菌的,特定密度的密度梯度离心介质。被广泛用作从外周血、骨髓及脐带血中分离高活性的单个核细胞。Ficoll-Paque溶液包含:Ficoll PM400:由高分子量蔗糖(Mr 400K)聚合物与表氯醇聚合合成(凝集红细胞)泛影酸钠:使溶液在低粘度下具有高密度EDTA二钠钙Ficoll的保存:开盖前保存在4℃~30℃(避光),开盖后保存在 4℃~8℃(避光)Ficoll 产品细分如下:使用Ficoll (1.077g/ml) 分离 ...

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整合 20 多篇文章,Nature 封面报道 DNA 元件百科全书:近 9000 项高通量实验,挖掘基因的奥秘

源起21 世纪初,在多国科学家的协同努力下,「人类基因组草图」成功完成绘制。按图索骥,人类基因组中编码蛋白质的基因仅占不到 2%,超过 98% 的基因功能未知,这些基因一度被冠以「垃圾 DNA」的称谓。 「垃圾 DNA」准确的说应为没有明确功能的基因,依据「存在即合理」的逻辑,很难证实进化中没有发挥作用,故无法否定它们的存在。于是,这些基因成为人类进化史中的一个个谜团。2003 年由美国人类基因组研究所 (NHGRI) 和欧洲生物信息研究所 (EMBL) 牵头,开展了 E ...

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NI|罗鸿博/李程/马凤霞团队合作发表中性粒细胞稳态和炎症状态下的单细胞图谱

2020 年 7 月 27 日,北京大学生命科学学院李程研究组与哈佛大学医学院罗鸿博研究组、中国医学科学院血液学研究所马凤霞课题组合作在 Nature Immunology 杂志发表了题为 Single-cell transcriptome profiling reveals neutrophil heterogeneity in homeostasis and infection 的研究论文。中性粒细胞是天然免疫系统的主要组成部分,作为循环白细胞中数量最多的细胞类型,是宿主抵 ...

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物联网与人的健康

不管是有意还是无意,你每天都在创造关于你自己的数据——还有很多。这些数据来自你的智能手机,你的Fitbit,甚至你的恒温器和冰箱。连接到internet的任何设备都在收集有关您、您的行为和活动的信息。这些设备统称为“物联网”或简称物联网。这个词最初是在20世纪90年代末被创造出来的,指的是计算机自己汇编的数据,而不是依赖于人们输入的数据。从那时起,像可穿戴设备这样的新技术使计算机更容易创建、收集和存储数据,而我们甚 ...

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