• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        疏水相互作用层析

        Cytiva(思拓凡)

        5172

        疏水相互作用层析原理

        疏水作用层析原理是根据生物分子的疏水性差异进行分离。当生物分子通过疏水作用层析介质的时候,生物分子的疏水基团与层析介质的疏水配基相互作用,之后通过降低缓冲液的疏水性来进行洗脱,从而使生物分子通过疏水作用产生分离,纯化获得目标样品。

         

        特色

        属于其他层析技术的互补技术

        • 高选择性,特别适用于疏水性高的目的物分离纯化
        • 由于需要高盐条件,易使蛋白沉淀、变性,因此其应用范围受限
        • 属于吸附性层析类型,具有浓缩作用
        • 操作环境的温度对层析过程及结果的影响较大
        • 适于疏水性强的蛋白、耐高盐蛋白的分离

         

        基本步骤

        疏水作用层析作为一种吸附性层析,主要步骤包括平衡、上样、清洗、洗脱和再生步骤。疏水作用层析一般在高盐环境中上样,经过上样和清洗之后,通过降低洗脱液中的盐浓度逐渐对不同的分子进行洗脱。其流程可参考下图(图13):

        疏水相互作用层析

        图13 疏水作用层析流程图

         

        填料选择

        疏水填料和离子交换填料类似,都是由基架和疏水配基交联而成,常见的疏水填料配基有 Phenyl、Butyl、Octyl 等,常见疏水填料强弱如图所示:

        疏水相互作用层析

        图14 常见疏水填料强弱图

         

        • 疏水性强弱,在实验初期,一般先使用疏水性最强的疏水填料(如 Phenyl 填料)进行条件摸索,确保对于目的分子来说,疏水层析是适用的,后期为了改善分离效果可以选择其他的疏水填料。
        • 按照不同的基架或粒径大小进行填料的选择,粒径越小,分辨率越高,反之则分辨率相对较低
        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序