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        Quick Yeast DNA Prep: Isolation of Total DNA (genomic and plasmid)

        互联网

        1131

         

        Quick Yeast DNA Prep: Isolation of Total DNA (genomic and plasmid)

        Linda Hoskins, Hahn Lab 10/16/98

        1. Grow a 5 ml YPD O/N culture inoculated with a single yeast colony at 30 deg.
        2. Transfer culture to a small 13 x 100 glass tube. Spin down cells 2 min. in tabletop centrifuge. Pour off supernatant.
        3. Wash cells with 5 ml H2 O. Spin down cells 2 min. Pour off supernatant. Cell pellet can be stored at -20 deg.
        4. Resuspend cells in 500 ul lysis buffer by vortexing.

           

          Lysis buffer:   20 ml:
          0.1M Tris pH 8.0   2 ml 1M Tris 8.0
          50 mM EDTA   2 ml 0.5M EDTA
          1% SDS   2 ml 10% SDS
              14 ml H2 O
               

         

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