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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Mouse Prolyl endopeptidase / PREP Protein (His Tag)
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
10 µg/20 µg/50 µg
| 规格: | 10 µg | 产品价格: | ¥2310.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 20 µg | 产品价格: | ¥3870.0 |
| 规格: | 50 µg | 产品价格: | ¥3870.0 |
蛋白名称:Mouse Prolyl endopeptidase / PREP Protein (His Tag)
蛋白构建:A DNA sequence encoding the mature form of mouse PREP (Q9QUR6) (Leu2-Gln710) was expressed, with a polyhistidine tag at the N-terminus.
表达宿主:HEK293 Cells
蛋白纯度:> 95 % as determined by SDS-PAGE
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端:His
蛋白分子量:The recombinant mouse PREP consists of 727 amino acids and predicts a molecular mass of 82.9 KDa. It migrates as an approximately 79-83 KDa band in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:Q9QUR6
蛋白氨基酸序列:Leu2-Gln710
蛋白标签:N-His
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文献和实验(图2): 利用Ni-NTA纯化QIAgenes载体表达的蛋白 QIAgenes表达载体N端带有His标签,可以利用Ni-NTA一步纯化得到高纯度蛋白。如果实验需要得到无标签蛋白,His标签可以利用TAGZyme system去除(图3)。 QIAgenes Expression Kits — Insect / Mammalia • 预制蛋白表达载体,专门针对35,000个人类基因所设计 • 合成全长、序列优化且经过验证的cDNA,cDNA免费克隆到表达载体 • 带有三种启动
重组蛋白纯化基本原则蛋白的分离纯化是生物工程下游阶段一个比较重要的部分,尤其在基因工程重组蛋白的分离纯化中,上游过程的许多因素会直接影响到下游蛋白的分离,充分利用上游对下游的影响,对蛋白的纯化做一个全面的考虑和整体的设计。是否带有亲和标签,His标签,GST标签等,不同的亲和标签选择不同的纯化方案;可能是可溶性表达,可能形成包涵体,可溶性的蛋白往往需要复杂的纯化步骤,而包涵体易于分离,纯度较高,但回收具有生物活性的蛋白却变的相当困难,需要对聚集的蛋白进行变复性,通常活性蛋白的得率比较低;是否
【原创】真核表达His蛋白,进行天然构象蛋白纯化的心得和疑问。
由于要做酶活性实验,所以选择真核表达His标签蛋白进行非变形的纯化。(避免了原核表达可能得到没功能的蛋白。)先上图上真相:这个说明了:细胞超声裂解后,离心沉淀的碎片里含少量His标签的过表达目的蛋白(第一道),上清里含大量His蛋白(第二道)。之后用特殊的含有镍的树脂小球纯化His蛋白,由于裂解液体积太大了,就分了两次加到柱子里。第一次加进去之后4度孵育1h,然后弃流出液(第三道),第二次把剩下的裂解液加进去,同样4度孵育1h后弃流出液(第四道)然后用漂洗液洗2次柱子里的树脂,使得非特异性黏着
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