核酸的电泳与检测

相关专题

 

【实验目的】
（1）了解核酸琼脂 糖凝胶电泳的原理，学会其具体的操作程序。
（2）对提取的DNA进行检测，掌握紫外电泳图谱的观察分析方法。
【实验原理】
琼脂糖凝胶电泳 是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。带电荷的物质在电场中的定向运动称为电泳，核酸分子是两性解离分子，在pH8.0时，DNA分子带负电荷在电场中向正极移动。采用琼脂糖凝胶介质作为电泳支持物，长度不同的DNA分子由于受凝胶阻遏作用大小不一，迁移速度不同，从而达到有效分离DNA的目的。
【仪器、材料、试剂】
（一）仪器
1．电泳装置：电泳仪 、水平电泳槽、梳子、制胶槽
2．紫外观察：凝胶成像系统
3．高速离心机
（二）材料
1．琼脂糖
2．三羟甲基氨基甲烷（Tris）
3．硼酸
4．乙二胺四乙酸（EDTA）
5．溴酚蓝
6．蔗糖
7．溴化乙锭（EB）
8．DNA Marker（λDNA）
9．称量纸、容量瓶、瓷盘、一次性手套、取液器、三角瓶、量筒（100mL）、Tip头（10uL）、胶带
（三）试剂配制