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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 英文名:
Fast SDS-PAGE Running Buffer
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
F665497-500ml
产品内容
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产品简介
本产品的使用非常简单,只需将您使用的常规TG电泳缓冲液系统更换为本产品的稀释液,调整电压后进行电泳即可,无需添加任何实验步骤。同时稀释为工作液的本产品可重复使用4-5次。本产品既可节省您宝贵的时间也可降低您的实验成本。
注意事项
1.操作时请务必佩戴手套,如溅到皮肤上,请立即用大量水冲洗。
2.本产品中含有SDS,适合变性凝胶电泳,不适合非变性凝胶电泳。
3.应用本产品所进行的SDS-PAGE的结果显示,本产品的应用会使蛋白的分辨范围发生变化,同等浓度的凝胶,其分辨的最低分子量要小于使用TG电泳缓冲液(见下表)。
操作步骤
(以Bio-Rad mini胶及相关配套设备为例)
1.本产品为10倍浓缩液,使用时用纯水10倍稀释后配制成工作液(例如:取100 ml本产品后用纯水定容至1 L)。
2.将适量的本产品加入到电泳槽的内、外槽中,调整电源为恒压200-250 V进行电泳。电泳指示剂溴酚蓝至凝胶底部,所需时间约20-30 min。
3.电泳完成后收集电泳槽内、外槽电泳液,4℃保存,可重复使用4-5次,但如发生浑浊请勿使用。
表1 速泳电泳液与常规TG电泳液的最佳分辨率的比较
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文献和实验在电泳开始的时候,SDS-PAGE 利用不连续系统,在浓缩胶中浓缩或"堆积"样品,使其成为一条非常锐利的区带。在不连续缓冲系统中,最初胶中的阴离子不同于(或不连续)电泳缓冲液中开始时的阴离子。NuPAGE系统(Bis-Tris和Tris-Acetate)和Laemmli(Tris-Glycine)系统二者均为不连续系统的例证,以相同的方式起作用。但是,作为NuPAGE系统中不同离子的结果,这个系统在一个较低的pH值下工作。Tris-Glycine系统(图1)的情况,主要包括三种离子: a)氯
10孔梳子插入玻璃板之间。确保无气泡产生(图 7)。让浓缩胶聚合60分钟。 •在900 ml蒸馏水中稀释100 ml 10 X缓冲液,并添加SDS, 制成最后浓度为3.5mM的 SDS-PAGE电泳缓冲液。 •将两个翼型扳手均匀施力掰开,从灌胶模具中取出凝胶三明治夹。通过灌胶模具背后留的两个大孔,轻轻向上将三明治夹推出(图 8)。 •将电极放入垂直电泳槽内。贴着电极壁,将凝胶三明治夹垂直方向插入电极中(图 9)。 •把凝胶三明治夹置于合适的位置后,关闭电极门(图10)。
RNA的完整性可以通过琼脂糖变性电泳分析检测,而含量则通过紫外分光光度计确定。常见的变性电泳有甲醛变性电泳,戊二醛变性电泳等。甲醛变性电泳检测RNA完整性一、材料、试剂和仪器1 材料: 植物总RNA 5-10μg2 试剂:1)加样运载缓冲液(Loading buffer),50% 甘油,1mmol/L EDTA (pH 8.0),0.25%溴酚蓝,25%二甲苯氰FF2)10×TAE Buffer3)5×甲醛凝胶电泳缓冲液:,0.1mol/L MOPs (pH7.0),40mmol/L乙酸
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