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        Protocol for Annealing Oligonucleotides

        互联网

        1562

        1. Prepare a solution of 10X annealing buffer.

           10 mM MgCl2 , 200 mM Tris-HCl, pH 8.0

        2. Prepare an aliquot of the oligonucleotide probe in an eppendorf tube.

        3. Add a molar excess of oligonucleotide target to the tube.

        4. Calculate the volume of 10X annealing buffer to add.

           Reaction Volume = Volume of Probe + Volume of Target

           Volume of 10X Annealing Buffer = 9 x Reaction Volume

        5. Add the 10 X Annealing buffer and vortex to mix.

        6. Place the tube in a 95o C Heat Block for 3 minutes.

        7. Remove the tube and let it cool to room temperature. (~10 minutes)

        8. Vortex the mixture

         

         

         


         

         


         

         

         

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