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        高质量的内切酶 vs.普通内切酶

        互联网

        2096

        不好的内切酶常常被各种 蛋白酶 、非特异外切酶和核酸外切酶污染。

        使用被外切酶污染的内切酶切割DNA,则会在切割底物的同时破坏产物的末端(外切酶偷偷切掉1、2个bp,琼脂糖电泳却看不出来),让后续的连接、克隆和表达出现问题!

        而NEB提供的内切酶大部分都经过重组改造,在最大程度上避免了外切酶污染的问题,让你的基因安全可靠!

        好的内切酶 不好的内切酶
        · 活性高
        · 品质稳定,保存期长
        · 无其它 核酸酶 污染(包括外切酶污染)
        ·活性不高
        ·保存一段时间后活性迅速下降
        ·有其它 核酸酶 的污染(包括外切酶污染)

        质粒DNA
         酶切反应 

        好的内切酶切割

           不好的内切酶切割

         
        完整的DNA片段

               连接
           完整的DNA片段

                   少量的外切酶损坏DNA末端
          

                   不完整的DNA片段+1、2个dNTP
              
        连接

         
        成功连接,克隆并表达 连接失败,克隆不成功,无法表达或产物不正确
        NEB EcoRV: Survival rate=49/50 Company T EcoRV: Survival rate=3/50

        看看,不同质量的内切酶,实验结果大不相同!

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