【求助】关于内切酶的提问
丁香园论坛
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小弟想用pGL3-vector basic作为载体装载一个启动子片段，该启动子片段需要经PCR克隆，故要设计引物，在引物的5‘端加入内切酶位点。经过查询后发现可以用一下三种内切酶：KpnI，NheI，MluI
查TAKARA的产品目录后发现，这三种酶的反应温度均为37°，但所用缓冲液不同。
提问：有没有适合两种酶（从上述三种同时反应的universal buffer（通用缓冲液）？
查TAKARA的产品目录后发现，这三种酶的反应温度均为37°，但所用缓冲液不同。
提问：有没有适合两种酶（从上述三种同时反应的universal buffer（通用缓冲液）？
查看takara产品目录的双酶切buffer表，可以找到大多数双酶切搭配的最适buffer
查了，没有
只能采用M型缓冲液，KPN能到达60%活性，Nhe能到达100%
只能采用M型缓冲液，KPN能到达60%活性，Nhe能到达100%
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