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        【求助】关于内切酶的提问

        丁香园论坛

        1515
        小弟想用pGL3-vector basic作为载体装载一个启动子片段,该启动子片段需要经PCR克隆,故要设计引物,在引物的5‘端加入内切酶位点。经过查询后发现可以用一下三种内切酶:KpnI,NheI,MluI
        查TAKARA的产品目录后发现,这三种酶的反应温度均为37°,但所用缓冲液不同。
        提问:有没有适合两种酶(从上述三种同时反应的universal buffer(通用缓冲液)?
        查看takara产品目录的双酶切buffer表,可以找到大多数双酶切搭配的最适buffer
        查了,没有
        只能采用M型缓冲液,KPN能到达60%活性,Nhe能到达100%

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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