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        细胞的分裂指数测定

        互联网

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        一、原理
        体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据。
         
        二、仪器、用品与试剂
        1.  仪器与用品:CO2培养箱、普通显微镜、细胞培养血、盖玻片、吸管
        2.  试剂:培养液、胰酶、甲醇、冰醋酸、Giemsa染液
         
        三、 操作步骤
        1.  消化细胞,将细胞悬液接至内含盖玻片的培养皿中。
        2.  CO2培养箱中培养48小时,使细胞长在盖片上。
        3.  取出盖片,按下列顺序操作:
        PBS漂洗3分钟→甲醇:冰醋酸=3:1固定液中固定30分钟→Giemsa液染色10分钟→自来水冲洗。
        4.  盖片晾干后反扣在载玻片上,镜检。
        5.  计算:
        分裂指数=分裂细胞数/总细胞数×100%
         
        四、注意事项
        操作时动作要轻,以免使盖片上的细胞脱落。
         
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