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        豚鼠T淋巴细胞的测定

        相关实验:豚鼠T淋巴细胞的测定—兔红细胞玫瑰花环实验

        最新修订时间:

        原理

        根据E—玫瑰花环形成率,可以间接判断机体细胞免疫力。目前,已广泛应用于临床,作为测定人群免疫状态的一个指标。

        材料与仪器

        步骤

        1.  淋巴细胞提取

        (1)取豚鼠抗凝血2毫升,加3毫升Hanks液使之稀释。加于3毫升淋巴细胞分层液液面之上(沿管壁轻轻加入,勿使两液相混)。

        (2)2000转/分离心30分钟,吸淋巴细胞层到另一试管中加5倍体积的Hanks液洗1~2次,(1500转/分离心10分钟)弃上清即成。
        豚鼠T淋巴细胞的测定
        图1  用分层液离心后的血细胞层

        2.  加吸收过的胎牛血清0.1毫升,0.5%兔红细胞悬液0.2毫升,于淋巴细胞中。混合后,37℃水浴5分钟。

        3.  500转/分离心5分钟,放4℃冰箱中2小时后,弃大部分上清。

        4.  染色及观察
        轻轻悬浮沉积的细胞。向悬液中滴一滴美兰液,混合,10分钟后取一滴放载玻片上,加盖玻片镜检。
        高倍镜或油镜下计数200个淋巴细胞,凡结合3个或3个以上的兔红细胞者为阳性,计算花环形成细胞的百分率。

        来源:丁香实验

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