【求助】western blot 急求助
丁香园论坛
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本人想请教高手：在westernblot中煮样时需不需加上loading buffer后再煮样？以及loadingbuffer和样加的比例如何定？如6Xloadingbuffer加到样中的量如何定？谢谢
那是要加LOADING BUFFER, 6X的上样缓冲液，那样本与BUFFER之比为5：1（V/V）。
和做SDS-PAGE一样，加多大浓度、多少量的上样缓冲液视样品的浓度而定。
就是蛋白样品加上loading buffer后加热来处理蛋白。比例是…6×buffer：蛋白样品=5：1（体积比）
当然是要加上loading buffer再煮啊！
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