转染真核表达载体后需要将载体线性化吗
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问:
我是新手,我想将一个构建的真核表达载体转染进HEK293细胞 中,有人说要先将质粒线性化,也有人说不用,不知道到底应该怎样呢?如果需要线性化,具体怎么操作呢?谢谢了!
答:
要看你的目的,是做瞬时表达还是稳定表达,做稳定表达,为了更好的整合到细胞的基因组 上,可将质粒线性化,选择好酶切位点。不酶切直接筛选稳定表达也可以得到结果。293转染效率还是较高的,一般不用稳定筛选。
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我是新手,我想将一个构建的真核表达载体转染进HEK293细胞 中,有人说要先将质粒线性化,也有人说不用,不知道到底应该怎样呢?如果需要线性化,具体怎么操作呢?谢谢了!
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要看你的目的,是做瞬时表达还是稳定表达,做稳定表达,为了更好的整合到细胞的基因组 上,可将质粒线性化,选择好酶切位点。不酶切直接筛选稳定表达也可以得到结果。293转染效率还是较高的,一般不用稳定筛选。
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