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        Tris缓冲液(TBS和THB)的配制

        互联网

        41908

        一、TBS的配制

        0.05 M TBS ( pH7.4 ) 的配制:

        Tris ( 三羟甲基胺基甲烷 ) 12.1g

        NaCl 17.5g

        加蒸馏水 1500ml

        磁性搅拌下滴加浓HCl至pH为7.4,再加蒸馏水至2000ml,即可。

        如需含1% Triton X-100,则在滴加HCl前先加入20ml Triton X-100。

        二、THB的配制

        A液 ( 0.2 M Tris ):( MW 121.14 ) 称取2.428克 Tris,溶于100毫升蒸馏水中。

        B液 ( 0.1 N HCl): 取37% HCl ( 比重1:19 ) 0.84毫升,加入蒸馏水中,使成100毫升。

        不同pH ( 7.19 ~ 9.10 ) 的0.05 M THB配制:按下表,取A液25ml加B液Xml,补加蒸馏水至100ml。

        B=X
        pH
        B=X
        pH
        45.0
        7.19
        25.0
        8.14
        42.5
        7.36
        22.5
        8.23
        41.4
        7.40
        20.0
        8.32
        40.0
        7.54
        17.5
        8.41
        38.4
        7.60
        15.0
        8.51
        37.5
        7.66
        12.5
        8.62
        35.0
        7.77
        10.0
        8.74
        32.5
        7.87
        7.5
        8.92
        30.0
        7.96
        5.0
        9.10
        27.5
        8.05

        免疫组织化学中,常用pH7.6的THB。

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