免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation)：禽IgA提取与纯化

（一）材料与试剂配制

1 ．禽胆汁

2 ．饱和硫酸铵溶液

3 ． 0.01Mol/L pH7.4PBS 液

4 ． 0.10Mol/L pH6.4PBS 液（ 0.30Mol/L NaCl ）

5． DEAE₅₂ - 纤维素

（二）操作方法

1 ．取冷藏的胆汁 3 Ⅹ ml ，缓慢滴加Ⅹ ml 饱和硫酸铵液，边加边搅拌，使成 25 ％饱和硫酸铵液。 4 ℃ 放置 30min 。

1． 3 000r/min 离心 30min ，去沉淀。

2． 取上清，加饱和硫酸铵液，使成 35 ％的饱和度， 4 ℃ 放置 30min 。

3． 3 000r/min 离心 30min ，弃上清。

4． 取沉淀，加 0.85 ％ NaCl 液溶解，加饱和硫酸铵溶液，重复步骤 3 和 4 三次。

5． 将沉淀用 0.85 ％ NaCl 液溶解，装入透析袋，以 0.01Mol/L pH7.4PBS 液透析。

6． 以 0.01Mol/L pH7.4PBS 液平衡，过 DEAE52 纤维柱（ 20 × 250mm ）。

7． 取透析样品 4ml( ﹥ 20mg/ml 蛋白浓度 ) 加入层析柱。以 0.01Mol/L pH7.4PBS 液洗脱。

8． 再用 0.10Mol/L pH6.4PBS 液（ NaCl 浓度为 0.30Mol/L ）洗脱，收集洗脱液。

10 ．浓缩洗脱蛋白液至 20mg/ml ，分装，低温冰箱保存。