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        荧光免疫技术

        互联网

        1954

        原理

        应用荧光素标记的抗体或抗原进行免疫沉淀反应,然后置于荧光显微镜下观察。此法有利于微量可溶性抗原的检查和鉴定。

         

         

         

        材料与试剂配制

        1 .荧光素标记抗体(或抗原)

        2 .待测可溶性抗原(或抗体)

        3 .醋酸纤维膜( 10cm × 2.5cm

        4 0.05Mol/L pH8.2 巴比妥缓冲液

        5 .洗涤液 pH10.0 的巴比妥缓冲液。

        6 .液体石蜡

         

         

         

        操作方法

         

        1 .取 5 μ l 待测抗原进行膜电泳(见醋酸纤维膜电泳一节)电压 6V/cm~10V/cm ,电流 0.4mA/cm ,电泳 2h

        2 .取下膜放入湿盒内,沿抗体槽的位置放一条含标记抗体滤纸条(约 10 μ l ),在室温中孵育过夜。

        3 .去掉抗体纸条,将膜浸在洗涤液中 1h

        4 .流水中冲洗 10min ,置室温干燥。

        5 .干后浸入液体石蜡中使其透明 10min

        6 .用荧光显微镜观察荧光弧。

         

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