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        Gel Mobility Shift Analysis

        互联网

        1974

        Material/reagents:

        • 2X binding buffer:
              20 mM Tris pH 7.5 
              100 mM NaCl 
              2 mM EDTA 
              10% glycerol

        • poly(dI-dC) (5 mg/ml in TE)

        • BSA (10 mg/ml)

        • 32P-labeled probe

        • Buffer C: 
              20 mM HEPES pH 7.9 
              25% glycerol 
              420 mM NaCl 
              1.5 mM MgCl2

        • 4% native polyacrylamide gel (50 ml): 
              5 ml 40% acrylamide (30:1) 
              2.5 ml 5X TBE 
              41.95 ml H20 
              0.5 ml 10% APS 
              50 ml TEMED

        • 0.25X TBE running buffer

        • Loading dye: 
              0.2% bromophenol blue 
              0.2% xylene cyanol 
              50% glycerol 
              0.5 mM DTT 
              0.5 mM PMSF 
              0.2 mM EDTA

        具体操作流程请点击下面的链接下载:

        Gel Mobility Shift Analysis .pdf

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