染色体G带技术

互联网2013-07-12

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实验八染色体G带技术

【实验目的】

　　学习和掌握胰蛋白酶法的染色体 G 带显带技术。

【实验原理】

染色体由 DNA 、组蛋白、非组蛋白等组成。在 DNA 链上有 A-T 丰富区及 G-C 丰富区，用 Giemsa 染色时， A-T 区较 G-C 区更易染色。当用 Tryposin 法处理后，染色体上特定的蛋白质组成部分被抽取，使得染色体结构变得不均匀，加强 A-T 区与 G-C 区染色上的反差，形成深浅、明暗不同的带。由此，为染色体识别，染色体遗传病诊断，杂种细胞鉴定，特殊细胞株标记等开创了一系列检测方法。

【实验步骤】

　　1、将片置于 37 ℃的 pH 7.0 ICN 0.25 ％ trypsin 液中 40 ～ 100 sec
　　2、pH7.0GKN15sec
　　3、吸去下端多余液体
　　4、pH 6.8 PBS 5 ％ Giemsa 染色 10 － 20min
　　5、微流水漂洗
　　6、吸去下端水分
　　7、空气干燥
　　8、100 搜索细胞
　　9、400x 尋找中期分裂相及染色体分散好的图象
　　10、绘图或拍摄

【相关图片】

【作业】

　　1. 简要说明 G 带技术的主要原理。
　　2. 在染色体 G 带技术的显带过程中，哪个步骤最关键，分析用 Trypsin 处理时间不同的结果并附绘图。