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        C显带技术法

        相关实验:染色体显带实验

        最新修订时间:

        简介

        C显带技术是使结构异染色质或高度重复的 DNA 着色,这种显带方法对染色体着丝粒区和 Y 染色体长臂异染色质区的观察十分有利。

        原理

        C显带技术法的基本原理是是使结构异染色质或高度重复的 DNA 着色。

        材料与仪器

        器材:


        ① 染色缸


        ② 恒温水浴箱


        ③ 显微镜


        ④ 烘箱


        ⑤电吹风


        ⑥人中期染色体玻片标本。


        试剂:


        ① 0.25% 胰蛋白酶溶液


        ② 0.85% 生理盐水


        ③ 吉姆萨工作液


        ④ 1 mol/L NaH2PO4 缓冲液(pH4.0~4.5)


        ⑤ 0.2 mol/L HCl


        ⑥ 1% 的 Ba(OH)2


        ⑦ 2 x SSC 溶液


        ⑧ 0.4% 酚红

        步骤

        C显带技术法的基本过程可分为如下几步:


        A 常规制片后,将染色体玻片标本浸入 0.2 mol/L HCI 溶液中,室温放置 1 h。


        B 用蒸馏水冲洗染色体玻片标本。


        C 将染色体玻片标本浸入 50 ℃ 预热的 1% Ba(OH)2 溶液中,处理 15~20 s。


        D 用蒸馏水冲洗染色体玻片标本。


        E 将染色体玻片标本浸入 2 x SSC 溶液中,60 ℃ 处理 90 min。


        F 用蒸馏水冲洗染色体玻片标本后,用吉姆萨工作液染色 20~30 min。


        G 流水轻轻冲洗玻片背面,将多余的吉姆萨染液冲掉。


        H 空气干燥。


        I 先用低倍镜浏览整张染色体玻片标本,再用油镜观察并识别染色体的着丝粒(或 Y 染色体长臂的异染色质区)。

        来源:丁香实验

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