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        果蝇的三点测交

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        10862

        实验六 果蝇的三点测交

        一、实验目的:

        掌握三点测交的原理及方法;学习三点测交的数据统计处理及分析方法;了解绘制遗传学图的原理和方法。

        二、实验材料:

        黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)品系:野生型果蝇(+++) 红眼、长翅、直刚毛

        三隐性果蝇(wmsn 3 ) 白眼、小翅、焦刚毛

        三、实验原理:

        连锁交换定律:处在同一染色体上的两个或两个以上基因遗传时,联合在一起的频率大于重新组合的频率。重组类型的产生是由于配子形成过程中,同源染色体的非姊妹染色单体间发生了局部交换的结果。

        三点测交:三点测交就是通过一次杂交和一次测交,同时确定三对等位基因(即三个基因位点)的排列顺序和它们之间的遗传距离,是基因定位的常用方法。主要过程是:用三杂合体和三隐性个体杂交,获得三因子杂种(F1),再使F1与三隐性基因纯合体测交,通过对测交后代表现型及其数目的分析,分别计算三个连锁基因之间的交换值,从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置,即相当于进行三次两点测验,而且能在试验中检测到所发生的双交换。

         

         

        观察到的双交换频率

        两个单交换频率的乘积

        如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换,那么预期的双交换频率应当等于两个单交换频率的乘积,但实际上观察到的双颊还值往往低于预期值,因为每一次发生单交换,它邻近也发生一次交换的机会就减少一半,这叫干涉。一般用并发率表示干涉的大小。

        四、实验内容:

        1、 选处女蝇:每组做正,反交各1瓶,正交选野生型为母本,三隐性雄蝇为父本。反交选三隐性雌蝇为母本,野生型为父本,将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死,在8-12h内收集处女蝇5只,将处女蝇和5只雄蝇转移到新的杂交瓶中,贴好标签,于25℃培养;

        2、 7d后,释放杂交亲本(一定要干净);

        3、 再过4-5天,F1成蝇出现,在处死亲本7天后,集中观察记录F1表型及性别。

        4、 选取5对F1代果蝇,转入一新 培养瓶 ,于25℃培养,其余F1代果蝇处死;

        5、 7d后,处死F1亲本;

        6、 再过5d,F2成蝇出现,开始观察记录,连续统计7d,观察眼色,翅形及刚毛形态。正交只需统计雄性个体。要求每组至少统计250只果蝇。

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